① ELISA，WB，三者之間有什麼區別
WB
只能定性，半定量。
ELISA 可用定量方法檢測蛋白,也就是說你可以觀察不同濃度刺激物對目的蛋白的影響。
WB所檢測的一般是抗原，而Elisa抗原抗體都可以檢測。
WB所檢測的抗原可以知道其分子量的大小，或是否是多聚體、降解產物等。
一般Elisa的靈敏度要遠高於WB，這從一般酶標記物的使用濃度或待檢樣品的稀釋度上就可以看出。
WB一次樣本量就是一塊膠，10-20個樣品最多了。Elisa一塊96孔板一次可以處理96個樣本，可以設置多個復孔、對照、梯度樣等來提高檢測的可信度。
WB實驗時間時間更長，操作更繁瑣。Elisa
有很多現成的試劑盒，按照說明書操作即可。
② 微生物檢測需要什麼儀器和葯劑
1.1 溫箱：36±1℃。
1.2 冰箱:0～4℃。
1.3 恆溫水浴 :44.5±0.5℃。
1.4 天平。
1.5 顯微鏡。
1.6 均質器或乳缽。
1.7 平皿:直徑為90mm。
1.8 試管。
1.9 吸管。
1.10 廣口瓶或三角燒瓶:容量為500mL。
1.11 玻璃珠:直徑約5mm。
1.12 載玻片。
1.13 酒精燈。
1.14 試管架。
2 培養基和試劑
2.1 乳糖膽鹽發酵管:按GB 4789.28中4.9規定。
2.2 伊紅美藍瓊脂平板:按GB 4789.28中4.25規定。
2.3 乳糖發酵管:按GB 4789.28中4.10規定。
2.4 EC 肉湯:按GB 4789.28中4.11規定。
2.5 磷酸鹽緩沖稀釋液:按GB 4789.28中3.22規定。
2.6 生理鹽水。
2.7 革蘭氏染色液:按GB 4789.28中2.2規定。
③ WB相關試驗的材料哪裡有實惠的
這種不僅要實惠吧，質量也要好，推薦你買absin，是國產的品牌
④ 求助做western需要哪些儀器設備
western blot實驗都需要的基礎儀器有：
電泳儀，制膠板，電泳槽，濕轉的轉膜槽或者半干轉儀，脫色搖床，暗室，X光片，紅外燈，成像儀，一些基礎耗材和試劑等
基本上生化實驗室要做western blot還是很容易的
⑤ Western blot實驗需要准備什麼試劑和耗材
1.1細胞
①將細胞培養皿置於冰上，用冰冷得PBS洗滌細胞2次
②吸出PBS，加入裂解液（碧雲天P0013；1%TritonX-100；）
a.融解Western及IP細胞裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數分鍾內加入PMSF，使PMSF的最終濃度為1mM，或者根據實驗需要加入適當的上述蛋白酶磷酸酶抑制劑混合物。
b.對於貼壁細胞：去除培養液，用PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照6孔板每孔加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下，使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸動物細胞1-2秒後，細胞就會被裂解。（一般10*7個細胞用100ul裂解後獲得的上清蛋白濃度約為2-4mg/ml）
③用刮刀刮下貼壁細胞，轉移至EP管，14000rpm離心5分鍾
④將上清液轉移至EP管，負20℃保存
1.2組織
①將組織樣品剪成細小碎片（最好在冰上進行）
②加入裂解液
a.融解Western及IP細胞裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數分鍾內加入PMSF，使PMSF的最終濃度為1mM，或者根據實驗需要加入適當的上述蛋白酶磷酸酶抑制劑混合物。
c.按照每20毫克組織加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當減少裂解液的用量。)
d.用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。如果組織樣品本身細小，可適當剪切後直接加入裂解液，通過強烈渦旋使樣品裂解充分
（每20mg凍存的小鼠肝臟組織用200微升本裂解液裂解後獲得的上清，其蛋白濃度約為15-25mg/ml，不同狀態的不同組織有所不同）
③充分裂解後，10000-14000g離心3-5分鍾，取上清
2. 蛋白定量（Thermo UF289356)
2.1稀釋白蛋白(BSA)標准液的制備
2.2 制備BCA工作液（A液：B液=50：1 密閉室溫可以保存一段時間）
總體積=（#標准孔+#未知孔）*#復孔*每個樣本的體積
測試管每管2ml;96孔板每孔200ul。
2.3 濃度測定
①將25ul標准液和樣本設置復孔加入96孔板，按照樣本：BCA工作液（1：8）加入200ul BCA工作液(如果樣本有限就加10ul比例用1：20；推薦每個待測的樣本做2-3個平行反應；根據樣品的濃度，可提前稀釋5-10倍)
②最好搖勻30秒，將96孔板在37℃孵育30min
③冷卻至室溫，酶標儀設置為562nm，在5分鍾內測試完所有的樣本。
④所有的樣本減去空白對照在562nm處的吸光度，繪制標准曲線，確定樣本的濃度
3. 蛋白電泳
3.1 變性以及還原蛋白
在蛋白樣品中加入含SDS（保證樣品中的所有蛋白帶電荷一致）的上樣緩沖液，100℃加熱煮沸。
3.1.1室溫溶解蛋白上樣緩沖液（5×），按照4 uL蛋白樣品+1 ul (5×)的比例混合。
3.1.2 100℃或沸水浴加熱10分鍾，以充分變性蛋白
3.1.3 冰上驟冷，直接上樣到SDS-PAGE膠加樣孔即可
3.1.4通常電泳至藍色染料到達膠的底端處附近則可以停止電泳
4. SDS-PAGE凝膠電泳
4.1 膠的選擇與制備（根據目的蛋白的大小，選擇合適的分離膠的濃度）
4.2 配膠（碧雲天P0012AC）
洗干凈玻璃板，裝板加水驗漏後，晾乾裝到制膠架上。根據配方配膠。
（配膠順序：先配分離膠（下層膠），充分凝固後，再配濃縮膠（上層膠））
4.2.2 配製濃縮膠（上層膠）
4.2.3 組裝制膠器
①將制備好的分離膠灌入制膠板內（緩慢不要有氣泡），隨後緩慢加入適量異丙醇壓平分離膠。
②20-30分鍾分離膠凝聚完成，傾斜板，倒掉異丙醇，吸水紙吸去殘余液體，棄去上層壓膠的水或醇。
③加入配好的濃縮膠灌入制膠板內，然後插上梳子，20-30分鍾濃縮膠即可凝聚。
④緩慢取出梳子，上樣。
4.2.4 上樣及電泳
①蛋白冰上溶解，調整蛋白濃度，和等體積5×上樣緩沖液混合，即為上樣液。用純水沖洗膠板，放入電泳槽
②兩塊板之間倒入電泳液，確認無漏液
③迅速拔出梳子，用槍輕輕吹孔使碎片沖出
④依次加入蛋白marker和蛋白樣品，每孔加上樣液20ug，留一孔加預染的marker.加滿電泳緩沖液，蓋上槽蓋，接通電源，先用70V恆壓電泳，約30min,當指示劑溴酚藍進入分離膠後改用90V恆壓電泳，當指示劑到達距凝膠下端約0.5cm處時關閉電源，取出膠板。（上樣時間盡量短，避免樣品擴散，但也不能過快避免樣品溢出而造成相鄰加樣孔的交叉污染，未加樣的孔中加入等量的樣品緩沖液）
⑤調節電泳的電壓和時間，傳統膠是上層膠80V，30min;下層膠120V 90-120min.
(為了防止蛋白條帶再凝膠上擴散，電泳後應盡快轉膜)
5. 轉膜
將蛋白凝膠中的蛋白，通過電流作用轉移到轉印膜上。由於蛋白凝膠本身易碎，蛋白條帶容易子啊凝膠中擴散，而且抗體也不易於進入凝膠中與目的蛋白結合，所以需要在轉印膜這樣的固相載體上實現後續封閉、洗滌，顯色等實驗操作。
5.1 轉膜
①將減好的PVDF膜用無水甲醇潤濕30秒以上，然後用dd H2O漂洗2min,浸泡於轉移緩沖液中5min後開始後續操作
②裝配轉膜三明治結構（在轉移緩沖液中制備三明治可以避免氣泡的產生）
黑面（負極）→海綿墊→3層濾紙→凝膠→轉印膜→3層濾紙→海綿墊→紅面（正極），每層之間不能有氣泡。然後將三明治轉移至電泳槽中，黑面對黑面。
⑥ 我公司是個實驗室性質的公司想代理有關pcr和wb相關的儀器和產品
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Invitrogen is another choice.
⑦ 做western blot只買一個試劑盒就行了嗎
westernblot實驗都需要的基礎儀器有：電泳儀，制膠板，電泳槽，濕轉的轉膜槽或者半干轉儀，脫色搖床，暗室，X光片，紅外燈，成像儀，一些基礎耗材和試劑盒等基本上生化實驗室要做westernblot還是很容易的
⑧ 大家都來說說實驗室常用到的儀器，耗材和試劑，哪些
要說儀器的話，初中階段，主要就是些酒精燈，漏斗，燒杯，試劑瓶，分液漏斗，長頸漏斗，滴管，量筒之類的比較便宜的，一般幾十塊吧。試劑也就初中學的那幾樣。高中是分析實驗，有什麼酸鹼滴定管，容量瓶，真空水泵，電子天平，冷凝管，移液管，錐形瓶，布氏漏斗，幾百塊吧。然後大學階段用的就比較多了，有機實驗有電子攪拌器，坩堝，恆溫水浴鍋，燒瓶，三口燒瓶，溫度計。然後還有電子設備，比如紅外，紫外 ，液相色譜，氣相色譜，質譜儀，氫火焰離子化檢測器，都是幾十萬幾百萬，很貴的。反正儀器非常多，要舉例的話也說不全。