⑴ 常用於細菌和酵母菌接種的工具為
接種常見方法有:平板劃線接種法、斜面接種法、傾注培養法、穿刺接種法、液體接種法。
一、平板劃線分離法
平板劃線分離法:是指把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環在平板培養基表面,通過分區劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞,經培養後生長繁殖成單菌落,通常把這種單菌落當作待分離微生物的純種。
二、斜面接種法
該法主要用於單個菌落的純培養、保存菌種或觀察細菌的某些特性。
三、穿刺接種法
穿刺培養,是指將帶有欲培養微生物的接種針深插至半固體培養基(瓊脂含量0.2%〜1.0%)中接種,並進行微生物固體深層培養的一種方法,主要用於厭氧或兼性厭氧微生物的培養。
四、液體接種法
液體培養,是指將微生物直接接種於液體培養基中,並不斷振盪或攪拌,使微生物均勻地在液體培養基中生長繁殖的一種培養方法。液體培養適用於好氧微生物和植物組織培養,以迅速得到大量繁殖體為目的。
五、塗布接種法
微生物學實驗中的一種操作方法。由於將含菌材料現加到還較燙的培養基中再倒平板易造成某些熱敏感菌的死亡,而且採用稀釋倒平台法也會使一些嚴格好氧菌因被固定在瓊脂中間缺乏氧氣而影響其生長,因此在微生物學研究中更常用的純種分離方法是塗布平板法。
⑵ 幾種觀察放線菌方法的優缺點分別是什麼
1、印片法:主要用於觀察孢子絲的形態、孢子的排列及其形狀等,方法簡便。
2、插片法:可觀察到放線菌自然生長狀態下的特徵,而且便於觀察不同生長期的形態。
3、水封片:比較普通的方法,操做簡單.水封片發是插片法的延伸。
4、玻璃紙法:又助於觀察基內菌絲、氣生菌絲和彎曲狀或螺旋狀的孢子絲.觀察棘孢小單孢菌時注意把視野調暗。
⑶ 微生物實驗室需要哪些常用的儀器
微生物實驗室主要用於無菌環境下微生物提純、分離、增殖及鑒定等工作,對無菌環境的要求很高。那麼微生物實驗室中則需要用到以下儀器設備。
一、無菌室
無菌室是實驗室的核心部分,主要為樣品提供保護,保證實驗結果的准確和人員的安全。
二、超凈工作台
微生物的培養都是在特定培養基中進行無菌培養,那麼無菌培養必然需要超凈工作台提供一個無菌的工作環境。超凈工作台的主要用途是微生物的接種及處理時的無菌操作。
三、高壓蒸汽滅菌鍋
高壓蒸汽滅菌鍋是一個密閉的、可以耐受一定壓力的雙層金屬鍋。一般在進行無菌操作前需要將操作器皿、培養基等在高壓滅菌鍋里進行滅絕後才能使用。
四、培養箱
培養箱主要用於實驗室微生物的培養,為微生物的生長提供一個適宜的環境。培養箱有以下幾種:
1、普通培養箱
2、生化培養箱
3、恆溫恆濕箱
4、厭氧培養箱
五、天平
天平是用於精確稱量各類試劑及葯品的設備。實驗室常用的是電子天平。
六、微波爐/電爐
其主要作用是用於溶液的快速加熱,微生物固體培養基的加熱溶化等。
七、搖床
搖床又稱搖瓶機,它是培養好氣性微生物的小型試驗設備或作為種子擴大培養之用。
八、冰箱
冰箱是實驗室中保存試劑和樣品必不可少的儀器。微生物學實驗中用到的試劑有些要求是4度保存,有些要求是負20度保存,實驗人員一定要看清試劑的保存條件,放置在恰當的溫度下保存。
九、顯微鏡
微生物個體微小,必須藉助顯微鏡才能觀察清楚它們的個體形態和細胞結構。因此,在微生物學的各項研究中,顯微鏡就成為不可缺少的工具。
十、生物安全櫃
微生物實驗中所涉及到的部分試劑和樣品微生物有些是有毒的,對於操作人員來說傷害比較大。為了防止有害德懸
十一、菌落計數器
菌落計數儀可幫助操作者計數菌落數量。通過放大,拍照,計數等方式來准確的獲取菌落的數量。有些高性能的菌落計數器還可直接連接電腦來完成自動計數的操作,方便快捷的計數。
十二、分光光度計
分光光度計在微生物試驗中用於測定微生物懸液的濃度,可以正確選取合適的培養時間。
十三、離心機
離心機是用於收集微生物菌體以及其他沉澱物。有冷凍離心機和常溫離心機之分。
十四、液氮罐
液氮罐里裝有液氮,可用於微生物實驗室中各菌種的長期保存。
⑷ 觀察細菌的結構需要藉助哪兩樣儀器
如果一定是兩種的話就是光學顯微鏡和酒精燈
用顯微鏡觀察細菌步驟如下:先在載玻片上滴加一滴生理鹽水.把菌落用接種環挑起後,塗於生理鹽水中央直徑1CM左右要混勻——把載玻片放在酒精燈上加熱烘乾———滴加草酸銨結晶紫60秒——水洗——革蘭氏碘液60S——95%酒精脫色30S——水洗——番紅2分鍾——乾燥鏡檢。
最終目的是要在顯微鏡中看見清晰的細菌形狀,所以在染色後脫色和水洗最重要,如脫色和水洗不凈就會造成細菌和沒洗凈的顏色混在一起分不清。
觀察細菌個體的主要方法是染色法,一般會用到革蘭氏染色法,然後顯微鏡觀察。
觀察細菌的群落一般是直接觀察法,一般觀察其菌落形狀,大小,顏色,邊緣光滑與否,表面濕潤與否,這是判斷細菌種類的重要方法。
另外如果要觀察細菌的超微結構,就要用到電子顯微鏡
希望對你有幫助
⑸ 放線菌的介紹
放線菌(Actinobacillus)是一類主要呈菌絲狀生長和以孢子繁殖的陸生性較強大的原核生物。因在固體培養基上呈輻射狀生長而得名。大多數有發達的分枝菌絲。菌絲纖細,寬度近於桿狀細菌,約0.5~1微米。可分為:營養菌絲,又稱基內菌絲,主要功能是吸收營養物質,有的可產生不同的色素,是菌種鑒定的重要依據;氣生菌絲,疊生於營養菌絲上,又稱二級菌絲。

⑹ 微生物檢測儀器有哪些
微生物學實驗室是生物學領域的一個基本實驗室,對於一個完備的微生物學實驗室,我們需要配置哪些儀器呢?
1、超凈工作台
微生物的培養都是在特定培養基中進行無菌培養,那麼無菌培養必然需要超凈工作台提供一個無菌的工作環境。
2、培養箱
培養箱有多種類型,它的作用在於為微生物的生長提供一個適宜的環境。生化培養箱只能控制溫度,可作為一般細菌的平板培養;黴菌培養箱可以控制溫度和濕度,可作為黴菌的培養;CO2培養箱適用於厭氧微生物的培養。
ES5000-6S型智能配平儀
3、天平
天平用於精確稱量各類試劑。實驗室常用的是電子天平,電子天平按照精度不同有不同的級別。
4、微生物均質器
用於從固體樣品中提取細菌。用微生物均質器制備微生物檢測樣本具有樣品無污染、無損傷、不升溫、不需要滅菌處理,不需洗刷器皿等特點,是微生物實驗中使用較為方便的儀器。
5、菌落計數器
菌落計數儀可協助操作者計數菌落數量。通過放大,拍照,計數等方式准確的獲取菌落的數量。有些高性能的菌落計數器還可連接電腦完成自動計數的操作。
6、微波爐/電爐
用於溶液的快速加熱,微生物固體培養基的加熱溶化。
7、高壓滅菌鍋
微生物學所用到的大部分實驗物品、試劑、培養基都應嚴格消毒滅菌。滅菌鍋也有不同大小型號,有些是手動的,有些是全自動的。用戶需要根據自己的需要選購。
8、移液器
液體量器用於精密量取各類液體。常見的液體量器有量筒、移液管、微量取液器、刻度試管、燒杯。
9、低溫冰箱
冰箱是實驗室保存試劑和樣品必不可少的儀器。微生物學實驗中用到的試劑有些要求是4度保存,有些要求是負20度保存,實驗人員一定要看清試劑的保存條件,放置在恰當的溫度下保存。
10、生物安全櫃
微生物實驗中涉及的試劑和樣品微生物有些是有毒的,對於操作人員來說傷害較大。為了防止有害懸浮微粒、氣溶膠的擴散,可以利用生物安全櫃對操作人員、樣品及樣品間交叉感染和環境提供安全保護。
11、搖床
搖床是實驗室常用的一種儀器,在微生物實驗操作過程中,液體培養基培養細菌時需要在特定溫度下振盪使用。
12、純水裝置
超純水器,製造出各精密檢測無雜質、無污染的純水,
純水裝置包括蒸餾水器和純水機。蒸餾水器的價格便宜,但在造水過程中需要有人值守;純水機價格高些,但是使用方便,可以儲存一定量的純水。純水使用也有不同的級別,實驗中配製試劑,配製培養基均需用純水。一般所有的食品檢測都要用的超純水;
13、生物顯微鏡
由於微生物體積較小,所以在觀察時需要藉助生物顯微鏡。生物顯微鏡用於微生物和微小物品結構,形態等的觀察
14、冷凍乾燥機燥機
主要適用於細菌、微生物、酵母等的乾燥。用於乾燥保存易脫水的產品,在加水以後能夠再次恢復原材料的特性,不影響其生物活性等。通過冷凍乾燥,細菌之類的材料成為乾燥狀態,從而不會發生化學改變。
15、分光光度計
⑺ 放線菌,真菌的鑒定技術方法
通過電子顯微鏡下的菌形態來區分
或者直接用儀器,比如梅里埃VITEK2
或者用API實驗條
⑻ 酵母菌培養技術需要什麼儀器設備
一般用PDA(土豆和糖)培養基在28-35度培養.發面用的乾酵母中就有酵母菌. 培養基(Medium)是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配製的養料,一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)以及維生素和水等.有的培養基還含有抗菌素和色素.
按所用原料不同,可分為兩類:應用肉湯、馬鈴薯汁等天然成分配製的,稱為天然培養基;應用化學葯品配成並標明成分的,稱為合成培養基或綜合培養基.化學試劑中的培養基,大多為合成培養基.由於液體培養基不易長期保管,現在均改製成粉末.培養基由於配製的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同.一般培養基在受熱、吸潮後,易被細菌污染或分解變質,因此一般培養基必須防潮、避光、陰涼處保存.對一些需嚴格滅菌的培養基(如組織培養基),較長時間的貯存,必須放在2~6.C的冰箱內.
常見培養基有:
1、細菌培養基
配方一 牛肉膏瓊脂培養基
牛肉膏0.3克 ,蛋白腖1.0克,氯化鈉 0.5克,瓊脂 1.5克,
水 100毫升
在燒杯內加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白腖和氯化鈉,用蠟筆在燒杯外作上記號後,放在火上加熱.待燒杯內各組分溶解後,加入瓊脂,不斷攪拌以免粘底.等瓊脂完全溶解後補足失水,用10%鹽酸或10%的氫氧化鈉調整pH值到7.2~7.6,分裝在各個試管里,加棉花塞,用高壓蒸汽滅菌30分鍾.
配方二 馬鈴薯培養基
取新鮮牛心(除去脂肪和血管)250克,用刀細細剁成肉末後,加入500毫升蒸餾水和5克蛋白腖.在燒杯上做好記號,煮沸,轉用文火燉2小時.過濾,濾出的肉末乾燥處理,濾液pH值調到7.5左右.每支試管內加入10毫升肉湯和少量碎末狀的干牛心,滅菌,備用.
配方三 根瘤菌培養基
葡萄糖 10克 磷酸氫二鉀 0.5克
碳酸鈣 3克 硫酸鎂 0.2克
酵母粉 0.4克 瓊脂 20克
水 1000毫升 1%結晶紫溶液 1毫升
先把瓊脂加水煮沸溶解,然後分別加入其他組分,攪拌使溶解後,分裝,滅菌,備用.
2、放線菌培養基
配方一 澱粉瓊脂培養基(高氏培養基)
可溶性澱粉 2克 硝酸鉀 0.1克
磷酸氫二鉀 0.05克 氯化鈉 0.05克
硫酸鎂 0.05克 硫酸亞鐵 0.001克
瓊脂 2克 水 100毫升
先把澱粉放在燒杯里,用5毫升水調成糊狀後,倒入95毫升水,攪勻後加入其他葯品,使它溶解.在燒杯外做好記號,加熱到煮沸時加入瓊脂,不停攪拌,待瓊脂完全溶解後,補足失水.調整pH值到7.2~7.4,分裝後滅菌,備用.
配方二 麵粉瓊脂培養基
麵粉 60克 瓊脂 20克
水 1000毫升
把麵粉用水調成糊狀,加水到500毫升,放在文火上煮30分鍾.另取500毫升水,放入瓊脂,加熱煮沸到溶解後,把兩液調勻,補充水分,調整pH值到7.4,分裝,滅菌,備用.
3、真菌培養基
配方一 薩市(Sabouraud』s)培養基
蛋白腖 10克 瓊脂 20克
麥芽糖 40克 水 1000毫升
先把蛋白腖、瓊脂加水後,加熱,不斷攪拌,待瓊脂溶解後,加入40克麥芽糖(或葡萄糖),攪拌,使它溶解,然後分裝,滅菌,備用.
本培養菌是培養許多種類真菌所常用的.
配方二 馬鈴薯糖瓊脂培養基
把馬鈴薯洗凈去皮,取200克切成小塊,加水1000毫升,煮沸半小時後,補足水分.在濾液中加入10克瓊脂,煮沸溶解後加糖20克(用於培養黴菌的加入蔗糖,用於培養酵母菌的加入葡萄糖),補足水分,分裝,滅菌,備用.
把這培養基的pH值調到7.2~7.4,配方中的糖,如用葡萄糖還可用來培養放線菌和芽孢桿菌.
配方三 黃豆芽汁培養基
黃豆芽 100克 瓊脂 15克
葡萄糖 20克 水 1000毫升
洗凈黃豆芽,加水煮沸30分鍾.用紗布過濾,濾液中加入瓊脂,加熱溶解後放入糖,攪拌使它溶解,補足水分到1000毫升,分裝,滅菌,備用.
把這培養基的pH值調到7.2~7.4,可用來培養細菌和放線菌.
配方四 豌豆瓊脂培養基
豌豆 80粒 瓊脂 5克
水 200毫升
取80粒干豌豆加水,煮沸1小時,用紗布過濾後,在濾液中加入瓊脂,煮沸到溶解,分裝,滅菌,備用.
4、食用菌菌種培養基
配方一 馬鈴薯—蔗糖--瓊脂培養基
20%馬鈴薯煮汁 1000毫升
蔗糖 20克 瓊脂 18克
把馬鈴薯洗凈去皮後,切成小塊.稱取馬鈴薯小塊200克,加水1000毫升,煮沸20分鍾後,過濾.在濾汁中補足水分到1000毫升,即成20%馬鈴薯煮汁.在馬鈴薯煮汁中加入瓊脂和蔗糖,煮沸,使它溶解後,補足水分,分裝,滅菌,備用.使用該培養基對pH值要求不嚴格,可以不測定.
配方二 綜合馬鈴薯培養基
20%馬鈴薯煮汁 1000 毫升
磷酸二氫鉀 3克 硫酸鎂 1.5克
葡萄糖 20克 維生素 10毫克
瓊脂 18克
先配製20%馬鈴薯煮汁,方法同上.在煮汁中加入上述各種組分,加熱溶解後補足水分,調整pH值到6.分裝,滅菌,備用. 該培養基用於培養和保存靈芝、平菇、香菇等食用菌菌種.
5.煙草的培養基
在植物組織培養時,通過調節IAA和CTK的比值能影響愈傷組織分化出根或芽.CTK/IAA高時,愈傷組織分化芽
CTK/IAA低時,分化根;CTK/IAA比例適中維持愈傷組織不分化
愈傷組織誘導培養基制備
以MS培養基母液為基礎,向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,鐵鹽100×母液20mL ,維生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配製得MS培養基後,再加入0.5mg·L-1的BA8mL,0.5mg·L-1的NAA8mL.然後加入實際配製培養基體積約2/3-3/4的蒸餾水,加入40g蔗糖後攪拌使其溶化,用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl調整pH值至5.8-6.0.加入14g瓊脂,將鋁鍋置於電爐上,攪拌加熱使瓊脂完全溶化,然後用蒸餾水定容至終體積2L,繼續加熱幾分鍾使之混合均勻後分裝於三角瓶中.
煙草葉片愈傷組織誘導
取一無菌培養皿,用解剖刀切取1-2片無菌苗葉片置於無菌培養皿中,並用解
剖刀將葉片切成2mm2左右的小片,然後將其接種於准備好的培養基上,每瓶接種
5小片,一共接種6瓶.接種後的三角平置於24條件下黑暗培養1周,然後在同
樣溫度下有光照和全黑暗下培養3周直至愈傷組織形成(兩種情況各置3瓶).觀
察愈傷組織誘導結果,統計愈傷組織誘導率.
器官分化及植株再生培養
將誘導的愈傷組織按類型分別轉入分化培養基上,置於連續光照,溫度20-22 C條件下培養3周,統計愈傷組織再生植株情況.
愈傷組織誘導的總體情況
煙草愈傷組織誘導培養4周後,愈傷組織基本形成,即排除因生長時間不夠而
未形成愈傷的情況.具體情況見表一中所示,6瓶培養物均有愈傷形成,且都未發
生污染,但誘導率幾乎各不相同.其中, 在光照條件下培養的3瓶平均愈傷誘導率為
60.0℅, 在黑暗條件下培養的3瓶平均愈傷誘導率為46.7%.由於實驗過程中,外植
體即煙草葉片取得偏小,接種時可能已有部分外植體的大部分細胞脫水死亡,使整
個實驗的愈傷組織誘導率偏低,愈傷塊偏小.
特殊培養基:
一 選擇性培養基
1酵母菌富集培養基
葡萄糖5% 尿素0.1% 硫化銨0.1% 磷酸二氫鉀0.25% 磷酸氫二鈉0.05% 七水合硫酸鎂0.1% 七水合硫酸鐵0.01% 酵母膏0.05%
孟加拉紅0.003% pH4.5
2 Ashby無氮培養基 富集好養自生固氮菌
甘露醇1% 磷酸二氫鉀0.02% 七水合硫酸鎂0.02% 氯化鈉0.02%
二水合硫酸鈣0.01% 碳酸鈣0.5%
二 鑒別培養基
EMB培養基,常用於鑒別E.coli
蛋白腖 10g 乳糖5g 蔗糖5g 磷酸氫二鉀2g 伊紅Y 0.4g 美藍0.065g
蒸餾水1000g pH7.2
分離海洋微生物的培養基配方
2216E培養基配方(固體培養基)
蛋白腖 5克
酵母膏 1克
磷酸高鐵 0.01克
瓊脂 15-----20克
陳海水 1000毫升
煮沸氫氧化納(5%)的溶液調PH值7.6—7.8
⑼ 觀察細菌常用的儀器
D,應為細菌比一般微生物小低倍顯微鏡無法觀察到!
⑽ 放線菌的培養基有哪些
培養放線菌一般用:
澱粉硝酸鹽培養基(高氏一號培養基)
可溶性澱粉 2.0g 硝酸鉀0.1g 磷酸氫二鉀0.05g 氯化鈉0.05g 硫酸鎂0.05g 硫酸亞鐵0.001g 瓊脂2g 水100ml 先把澱粉放在燒杯里,用5毫升水調成糊狀後,倒入95毫升水,攪勻後加入其他葯品,使它溶解。在燒杯外做好記號,加熱到煮沸時加入瓊脂,不停攪拌,待瓊脂完全溶解後,補足失水。調整pH值到7.2~7.4,分裝後滅菌,備用。
麵粉瓊脂培養基
麵粉60g 瓊脂20g 水1000ml 把麵粉用水調成糊狀,加水到500ml,放在文火上煮30分鍾。另取500ml水,放入瓊脂,加熱煮沸到溶解後,把兩液調勻,補充水分,調整pH值到7.4,分裝,滅菌,備用。