㈠ 大腸桿菌檢測需要哪些儀器及耗材
常用儀器:滅菌鍋、恆溫培養箱、鼓風乾燥箱,冰箱,電子天平,均質器,菌落計數器,PH計,顯微鏡,超凈工作台。
產品名稱
無菌吸管、錐形瓶、玻璃培養皿、pH試紙、試管、燒杯、量筒、試管刷、洗耳球、試管架、均質袋、移液器,酒精燈、接種環。
平板計數瓊脂培養基....
㈡ 做大腸桿菌 沙門氏菌 葡萄球菌 巴氏桿菌的實驗檢測 一般都用什麼方法 和儀器設備 請說的詳細些
大腸埃希菌(Escherichia coli)
取供試液10ml(相當於供試品1g、1ml、10cm2),直接或處理後接種至適量(不少於100ml)的膽鹽乳糖培養基中,培養18~24小時,必要時可延長至48小時。
取上述培養物0.2ml,接種至含5mlMUG培養基的試管內,培養,於5小時,24小時在366nm紫外線下觀察,同時用未接種的MUG培養基作本底對照。若管內培養物呈現熒光,為MUG陽性;不呈現熒光,為MUG陰性。觀察後,沿培養管的管壁加入數滴靛基質試液,液面呈玫瑰紅色,為靛基質陽性;呈試劑本色,為靛基質陰性。本底對照應為MUG陰性和靛基質陰性。
如MUG陽性、靛基質陽性,判供試品檢出大腸埃希菌;如MUG陰性、靛基質陰性,判供試品未檢出大腸埃希菌;如MUG陽性、靛基質陰性,或MUG陰性、靛基質陽性,則應取膽鹽乳糖培養基的培養物劃線接種於曙紅亞甲藍瓊脂培養基或麥康凱瓊脂培養基的平板上,培養18~24小時。
若平板上無菌落生長、或生長的菌落與表1所列的菌落形態特徵不符,判供試品未檢出大腸埃希菌。若平板上生長的菌落與表1所列的菌落形態特徵相符或疑似,應進行分離、純化、染色鏡檢和適宜的生化試驗,確認是否為大腸埃希菌。
表1 大腸埃希菌菌落形態特徵
培養基 菌落形態
曙紅亞甲藍瓊脂 顯藍黑色、淺紫色、藍紫色或粉紅色,菌落中心呈深紫色或無明顯暗色中心,圓形,稍凸起,邊緣整齊,表面光滑,濕潤,常有金屬光澤
麥康凱瓊脂 鮮桃紅色或微紅色,菌落中心呈深桃紅色,圓形,扁平,邊緣整齊,表面光滑,濕潤
沙門菌(Salmonella)
取供試品10g或10ml,直接或處理後接種至適量(不少於200ml)的營養肉湯培養基中,用勻漿儀或其他適宜方法混勻,培養18~24小時。
取上述培養物1ml,接種於10ml四硫磺酸鈉亮綠培養基中,培養18~24小時後,分別劃線接種於膽鹽硫乳瓊脂(或沙門、志賀菌屬瓊脂)培養基和麥康凱瓊脂(或曙紅亞甲藍瓊脂)培養基的平板上,培養18~24小時(必要時延長至40~48小時)。若平板上無菌落生長,或生長的菌落不同於表4所列特徵,判供試品未檢出沙門菌。
若平板上生長的菌落與表4所列的菌落形態特徵相符或疑似,用接種針挑選2~3個菌落分別於三糖鐵瓊脂培養基高層斜面上進行斜面和高層穿刺接種,培養18~24小時,如斜面未見紅色、底層未見黃色;或斜面黃色、底層無黑色,判供試品未檢出沙門菌。否則,應取三糖鐵瓊脂培養基斜面的培養物進行適宜的生化試驗和血清凝集試驗,確認是否為沙門菌。
表4 沙門菌菌落形態特徵
培養基 菌落形態
膽鹽硫乳瓊脂 無色至淺橙色,半透明,菌落中心帶黑色或全部黑色或無黑色
沙門、志賀菌屬瓊脂 無色至淡紅色,半透明或不透明,菌落中心有時帶黑褐色
曙紅亞甲藍瓊脂 無色至淺橙色,透明或半透明,光滑濕潤的圓形菌落
麥康凱瓊脂 無色至淺橙色,透明或半透明,菌落中心有時為暗色。
金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)
取供試液10ml(相當於供試品1g、1ml、10cm2),直接或處理後接種至適量(不少於100ml)的亞硫酸鈉(鉀)肉湯(或營養肉湯)培養基中,培養18~24小時,必要時可延長至48小時。取上述培養物,劃線接種於卵黃氯化鈉瓊脂培養基或甘露醇氯化鈉瓊脂培養基的平板上,培養24~72小時。若平板上無菌落生長或生長的菌落不同於表5所列特徵,判供試品未檢出金黃色葡萄球菌。
表5 金黃色葡萄球菌菌落形態特徵
培養基 菌落形態
甘露醇氧化鈉瓊脂 金黃色,圓形凸起,邊緣整齊,外圍有黃色環,菌落直徑0.7~1mm
卵黃氯化鈉瓊脂 金黃色,圓形凸起,邊緣整齊,外圍有卵磷脂分解的乳濁圈,菌落直徑1~2mm
若平板上生長的菌落與表5所列的菌落特徵相符或疑似,應挑選2~3個菌落,分別接種於營養瓊脂培養基斜面上,培養18~24小時。取營養瓊脂培養基的培養物進行革蘭染色,並接種於營養肉湯培養基中,培養18~24小時,作為漿凝固酶試驗。
血漿凝固酶試驗 取滅菌小試管3支,各加入血漿和無菌水混合液(1:1)0.5ml,再分別加入可凝固株的營養肉湯培養物(或由營養瓊脂培養基斜面培養物制備的濃菌懸液)0.5ml、金黃色葡萄球菌營養肉湯培養物(或由營養瓊脂培養基斜面培養物制備的濃菌懸液)0.5ml、營養肉湯或0.9%無菌氯化鈉溶液0.5ml,即為試驗管、陽性對照管和陰性對照管。將3管同時培養,3小時後開始觀察直至24小時。陰性對照管的血漿應流動自如,陽性對照管血漿應凝固,若試驗管血漿凝固者為血漿凝固酶試驗陽性,否則為陰性。如陽性對照管或陰性對照管不符合規定時,應另取制備血漿,重新試驗。
若上述疑似菌為非革蘭陽性球菌、血漿凝固酶試驗陰性,判供試品未檢出金黃色葡萄球菌。
㈢ 觀察大腸桿菌時應該用什麼顯微鏡
不行,因為一般顯微鏡的我們使用的目鏡是10*,高倍物鏡是40*,所以高倍鏡放大倍數是400倍左右,而大腸桿菌大小一般為大小0.5~3微米,至少要放大1000多倍才可以看清,而且用光學顯微鏡時由於光線的限制,其實是很難看得清的。你要觀察大腸桿菌時,最好能將它作為臨時切片。
用的儀器嘛,最好能夠用電子顯微鏡,肯定能看得清楚。
㈣ 如何讓大腸桿菌破碎
在低溫下超聲波破碎,效果還是很好的
㈤ 怎麼除去污水中的大腸桿菌,需要用到什麼葯品和儀器
煮沸半小時。
或者用次氯酸鈉處理。
或者用乙醇處理。
或者超聲。
或者用鹼處理。
或者用酸處理。
都可以的,看你的需要而定。很多種方法。
㈥ 做飲料大腸桿菌和細菌總落數的實驗需要哪些儀器
就是培養細菌的常用儀器啊···平板,塗布器,樣品經梯度稀釋後塗布接種,在37℃培養後計數,然後查在相應稀釋倍數下規定的菌落數比較一下就行了···
㈦ 化驗水裡面的大腸桿菌都用什麼設備或儀器,急!急!謝謝!
恆溫培養箱、恆溫水浴鍋、冰箱、托盤天平(感量0.1克)、培養皿、刻度吸管、錐形瓶。
㈧ 建微生物實驗室都需要什麼儀器(主要做大腸桿菌、黴菌等)
高壓滅菌鍋、生化培養箱、乾燥箱、恆溫水浴鍋、顯微鏡、萬分之一的天平、0.1的台秤 稱量紙、
還有密閉的無菌室 還有很多玻璃器皿
除了這些 另外你的無菌室裡面必須配有紫外燈殺菌用的 我也做過一段時間的麵包中 大腸桿菌和細菌總數水分的測定
㈨ 如何破碎大腸桿菌細胞且讓蛋白有活性啊
可以用反復凍融法,-20攝氏度冷凍,4攝氏度復融。反復幾次,即可。但是需要注意的是,具體條件需要自己摸索。
還有一種方法,將E.Coli製成部分原生質體,然後採用低滲狀態,讓細胞漲破。
如果覺得還不行,還可結合各種表面活性劑,如NP-40等
呵呵!最好的建議還是找一台超聲波細胞破碎儀,因為條件是現成的不需要花大力氣摸條件………………
……………………
詳細資料請參考:
細胞活性/細胞增殖/細胞毒性分析:
http://proct.bio1000.com/100112/
㈩ 大腸桿菌的檢測方法
多管發酵法。
多管發酵法是一種檢測水體中大腸桿菌的傳統方法,這種方法是在44.5℃的含有熒光底物的培養基上連續培養24h,而後能產生分解熒光底物——葡萄糖醛酸酶,從而釋放出熒光產物,進而使培養基在紫外光照射下產生特徵熒光。此方法可被用來對原樣品中的菌落數作統計學估計。
在單料或雙料乳糖膽鹽發酵管內發酵,分離培養試驗,利用伊紅美藍培養皿分離,接著是在乳糖發酵管中進行二次發酵,最後通過芽孢染色、革蘭氏染色、顯微鏡觀察等來完成。多管發酵法對試驗條件要求不高,成本低,但是檢測時間較長,容易受其他條件干擾,進而影響到測定結果的精確度。

(10)破碎大腸桿菌用什麼儀器擴展閱讀:
注意事項:
1、檢樣時注意無菌操作。
2、稀釋時採用的稀釋液可以用磷酸鹽緩沖液或生理鹽水,接種時可採用九管法,設置三個梯度,分別為0.1g/mL、0.01g/mL、0.001g/mL,每一個稀釋度的試管應充分混勻。
3、每次實驗需要有陰性對照。
4、使用小倒管培養基配製時,為排凈氣泡,滅菌時不要把試管的蓋子蓋的太緊,滅菌後注意觀察一下倒管中的氣體是否排完全、
5、高壓滅菌後等高壓滅菌鍋的壓力表達到0,取出培養基放到冰箱冷卻,效果會比較好。