㈠ 儀器分析實驗中，利用分光光度法以鋁含量為橫坐標，吸光度A為縱坐標繪制了標准曲線，如何利用標准曲線求
A=εbc，所以利用線性擬合，得到的斜率是εb，b是石英池的長度，就是光通過的長度，這樣就得到ε了
㈡ 儀器分析實驗制定標准曲線時，為什麼需要測定五個濃度
其實並不是一定要製作5點的曲線，有的要求7個點比如光譜分析，有的只要求3個點就可以了，校正曲線的濃度點越多，定量的偏差就越小，同時把被測物包含在線性范圍內的可能性比較大。同時因為不是所有的校正曲線都是會呈現直線的，以為儀器對被測物的響應並不是隨著濃度的增大而呈直線上升的，在高濃度的時候會有信號抑制的現象，這個時候可能看到呈現的是二次曲線，如果點數夠多就可以看到這個現象，避免出現高濃度時候的定量誤差。
㈢ 如何繪制氣相色譜標准曲線
童鞋，翻一翻儀器分析書吧，用預測組分的純物質加稀釋劑配成不同質量分數的標准溶液N組，然後每組測量吧，然後繪制響應信號（縱坐標）對質量分數（橫坐標）的標准曲線，這是個過原點的曲線。
再做一組待測組分的氣象，得到式樣的響應信號，（從這個縱坐標的值查出響應橫坐標的值）既為待測組分濃度
㈣ 儀器分析：標准曲線法的定義
用於描述待測物質的濃度或量與測量儀器的響應量或其它指標之間定量關系的曲線
㈤ 急呀 知道的給說一下 生化實驗！！！製作定 量分析測定標准曲線的原理和方法
植物生理生化實驗課程教學大綱
一、課程基本概況
1. 課程名稱：植物生理生化實驗
2. 課程名稱（英文）： Experiments of Plant physiology and Biochemistry
3. 課程編號：B16035
4. 課程總學時：60學時（均為實驗教學）
5. 課程學分：3學分
6. 課程分類：必修課
7. 開設學期：第3、4學期
8. 適用專業：園藝、農學、植物保護、植物生物技術等農科類本科專業。
9. 先行課：《物理學》、《化學》、《分析化學》、《植物生理生化》等。
二、課程性質、目的和任務
本課程是植物生理學的配套課程，是農科類各專業必修的專業基礎課，屬於以植物為對象各專業的工具課程之一。其先行課為物理學、化學、分析化學、植物學、生理生化。該課程主要介紹植物生理生化的實驗研究技術以及常用植物生理生化指標的分析方法及原理，為專業課的學習與科學研究工作提供技術支持與手段。
通過本課程的學習，要求學生掌握植物生理生化的一些基本實驗技術與原理，熟悉植物生理生化常規儀器的使用方法，能獨立設計並完成一般性實驗內容，操作規范，能夠完成以植物為材料的基本的科學研究工作。從而達到更好地利用植物、人為地影響和改造植物，使之更大限度的為人類服務的目的。。
三、主要內容、重點及難點
實驗一 應用紙層析分離鑒定氨基酸
（一）目的要求：學習紙層析分離技術，掌握紙層析分離鑒定氨基酸的原理和方法。
（二）重點：紙層析分離鑒定氨基酸的原理、操作方法、結果分析。
（三）難點 點樣適量、分析確定層析結果。
實驗二 氨基酸含量的測定——茚三酮比色法
（一）目的要求：掌握茚三酮比色法測定氨基酸含量的原理和方法；學習分光光度計的使用；學習標准曲線的製作。
（二）重點：實驗原理和操作方法
（三）難點：樣品提取、標准曲線製作和使用。
實驗三 可溶性糖含量的測定——蒽酮法
（一）目的要求：掌握蒽酮法測定可溶性糖含量的原理和方法，了解可溶性糖含量這一生理指標的意義。練習分光光度計的使用和標准曲線的製作。
（二）重點：實驗原理和方法；蒽酮試劑的配製。
（三）難點：樣品提取及適度稀釋，標准曲線製作和使用。
實驗四 蛋白質含量的測定
（一）方法：考馬斯亮藍比色法；福林酚比色法
（二）目的要求：掌握測定蛋白質含量的原理和方法，了解蛋白含量測定的意義及使用方面。練習分光光度計的使用和標准曲線的製作。
（三）重點：了解實驗原理，正確運用方法。
（四）難點：樣品提取及適度稀釋，標准曲線製作和使用。
實驗五 酶的基本性質
（一）目的要求：通過實驗，進一步理解酶的重要性質和影響酶活性的條件。
（二）重點：酶的專一性，溫度、pH、激活劑、抑制劑對酶活性的影響，鑒定酶促反應速度快慢的依據和方法
（三）難點：鑒定酶促反應速度快慢的依據和方法。
實驗六 RNA的提制
（一）目的要求：掌握濃鹽法提制RNA的原理和方法，進一步理解RNA的理化性質。
（二）重點：理解實驗原理和各步操作的方法、意義和目的。
（三）難點：理解實驗原理和各步操作的方法、意義和目的。
實驗七 RNA含量的測定
（一）目的要求：掌握苔黑酚法測定RNA含量的原理和方法；學習RNA含量和純度的計算方法及計算原理；進一步練習分光光度計的使用和標准曲線法的應用。
（二）重點：掌握苔黑酚法測定RNA含量的原理和方法；學習RNA含量和純度的計算方法及計算原理。
（三）難點：正確稱量，掌握測定原理。
實驗八 澱粉酶活性的測定
（一）目的要求：了解α澱粉酶和β澱粉酶催化的產物和作用條件，掌握α澱粉酶活性、β澱粉酶活性和澱粉酶總活性的測定原理和方法；進一步理解酶的作用條件。
（二）重點：澱粉酶活性的測定原理和方法，進一步理解酶的作用條件。
（三）難點：通過控制實驗條件，准確測定不同澱粉酶的活性。
實驗九 電泳法分離酶或蛋白質
（一）方法：醋酸纖維薄膜電泳；聚丙烯醯胺凝膠電泳
（二）目的要求：掌握電泳的概念、原理以及電泳技術
（三）重點：電泳的原理和電泳技術
（四）難點：電泳技術的掌握
實驗十 穀物種子中賴氨酸含量測定
（一）方法：茚三酮溶液顯色法；染料結合（DBL）法；.三硝基苯磺酸（PDAB）法
（二）目的要求：掌握測定原理、方法及技術
（三）重點：原理及標准曲線製作
（四）難點：材料處理
實驗十一 植物組織水勢的測定
（一）方法：小液流法
（二）目的要求：學習並掌握小液流法植物組織水勢的測定方法，理解水分在細胞內外的轉移的條件和水勢的概念。
（三）重點：測定原理和方法
（四）難點：根據試材確定濃度系列；檢驗操作方法。
實驗十二 呼吸強度的測定
（一）方法：小籃子法；氧電極法。
（二）目的要求：掌握呼吸強度的測定原理和方法；學習滴定管的使用。
（三）重點：測定原理和方法。
（四）難點：滴定管的使用；滴定終點的把握。
實驗十三 葉綠素含量的測定
（一）方法：光電比色法
（二）目的要求：掌握分光光度法測定葉綠素含量的原理和方法；學習分光光度計的使用。
（三）重點：葉綠素的提取、含量計算。
（四）難點：葉綠素的提取、定容；按要求稀釋到適當濃度；正確地使用分光光度計。
實驗十四 光合色素的提取分離與理化性質
（一）目的要求：進一步理解光合色素的重要理化性質；學習鑒定理化性質的方法。
（二）重點：光合色素的種類；光合色素的化學與光學性質；紙層析分離鑒定光合色素的方法。
（三）難點：皂化反應；吸收光譜。
實驗十五 硝酸還原酶活力測定
（一）方法： 對-氨基苯磺酸法。
（二）目的要求：掌握測定硝酸還原酶活力的原理及方法，加深對硝酸還原酶在植物體內重要作用的認識；學習真空泵的使用；練習標准曲線的製作。
（三）重點：測定原理和方法；真空泵的使用；標准曲線的製作。
（四）難點：理解測定原理；製作出符合要求的標准曲線；理解各步操作的目的性。
實驗十六 種子生活力的測定
（一）方法（三種方法同時做）：紅墨水染色法；TTC染色法；BTB顯色法。
（二）目的要求：理解測定原理；學會用三種方法測定種子生活力。
（三）重點：三種方法的原理與操作；各步注意事項。
（四）難點：在實踐中能根據具體種子的特點選擇適用的測定方法；能正確判別種子的生活力。
實驗十七 超氧化物歧化酶（SOD）活性測定
（一）方法：NBT光化還原法。
（二）目的要求: 認識SOD的作用及測定SOD活性的意義，掌握SOD的測定原理和方法。
（三）重點：掌握測定原理和方法；理解照光的意義。
（四）難點：測定原理；具體使用中能根據酶活決定加入提取液的數量；各種試劑的作用；實驗條件的控制。
實驗十八 過氧化物酶（POD）活性的測定
（一）方法：聯苯胺氧化法；愈創木酚法。
（二）目的要求：認識過氧化物酶的作用，掌握過氧化物酶活性的測定原理和方法。
（三）重點：明了測定原理；掌握測定方法。
（四）難點：具體使用中能根據酶活決定加入提取液的數量及三濾乙酸的量；准確保溫。
實驗十九 丙二醛（POD）含量的測定
（一）方法：硫代巴比妥酸法。
（二）目的要求：認識丙二醛的來源、作用及測定意義，掌握測定原理和方法。
（三）重點：測定原理和方法
（四）難點：明了測定原理；掌握測定方法。
實驗二十 植物細胞差別透性的測定
（一）方法：電導率儀法。
（二）目的要求：了解逆境對細胞膜透性的影響，掌握電導儀法測定細胞膜透性的原理和方法；學習電導儀的使用。
（三）重點：明了測定原理；掌握測定方法；學會使用電導率儀。
（四）難點：正確控制實驗環節，正確使用電導率儀。
實驗二十一 光合強度的測定
（一）方法：改良半葉法；氧電極法；光合測定儀法。
（二）目的要求：學習不同方法測定光合強度的原理；進一步理解總光合強度和凈光合強度；掌握測定方法；要求能根據需要和條件獨立完成光合強度測定。
（三）重點：相關儀器的使用、測定原理和方法；實驗環節的條件控制。
（四）難點：正確使用儀器和測定方法。
實驗二十二 脯氨酸含量影響
（一）方法：酸性茚三酮法；磺基水楊酸法。
（二）目的要求：掌握脯氨酸的測定方法及原理；能根據需要獨立完成測定過程。
（三）重點：標准曲線的製作、植物材料的處理。
（四）難點：標准曲線的製作、植物材料的處理。
實驗二十三 植物根系活力的測定
（一）方法：TTC比色法；α-萘胺氧化法。
（二）目的要求：理解根系活力的內涵，掌握根系活力的測定原理和方法。
（三）重點：實驗原理和方法
（四）難點：操作方法
實驗二十四 維生素C含量的測定
（一）方法：滴定法；二苯胺萃取比色法；2，4二硝基苯肼比色法；熒光法。
（二）目的要求：掌握測定原理和方法；能根據需要和條件選擇適當的測定方法。
（三）重點：相關儀器的使用、測定原理和方法；實驗環節的條件控制。
（四）難點：正確掌握操作方法。
實驗二十五 綜合性實驗——植物組織中POD的提取分離純化與鑒定
（一）方法：採用分段鹽析法提取分離POD；用透析法脫鹽；用福林酚法測定蛋白質含量；愈創木酚法測定POD活性，計算比活力和回收率；用聚丙烯醯胺凝膠電泳分離鑒定POD同工酶。
（二）目的要求：掌握實驗的基本原理和方法；能設計實驗操作流程。
（三）重點：相關儀器的使用、測定原理和方法；各實驗環節的銜接。
（四）難點：實驗技術的綜合運用。
實驗二十六 設計性實驗——植物組織衰老過程中的生理變化
（一）方法和實驗流程：設計使植物組織衰老的處理方法；根據理論知識，設計在衰老的不同階段測定與衰老有關的生理指標；確定各生理指標的測定方法；寫出實驗設計方案；配製葯品；取材、測定；寫出實驗報告。
（二）目的要求：學習實驗設計方法，初步培養科學研究的基本能力。
（三）重點：實驗設計、相關儀器的使用、測定原理和方法；各實驗環節的銜接。
（四）難點：試驗設計、實驗技術的綜合運用。
四、學時分配表
教學時數分配
順 序
授 課 內 容
學時分配
小計
生化實驗部分
（第三學期與生化理論課教學平行開課）
實驗一
應用紙層析分離鑒定氨基酸
4
4
實驗二
氨基酸含量的測定——茚三酮比色法
3
3
實驗三
可溶性糖含量的測定——蒽酮法
3
3
實驗四
蛋白質含量的測定——福林酚法
3
3
實驗五
RNA的提制
4
4
實驗六
RNA含量的測定
3
3
實驗七
澱粉酶活性的測定
4
4
實驗八
聚丙烯醯胺凝膠電泳分離同工酶
6
6
綜合性實驗
（任選）
將蛋白質含量測定、酶活性測定、聚丙烯醯胺凝膠電泳三項實驗內容綜合起來，開設綜合性實驗植物組織POD的提取分離純化與鑒定。
18
18
備選實驗一
酶的基本性質
4
4
備選實驗二
穀物種子中賴氨酸含量測定
3
3
生理實驗部分
（第四學期與植物生理理論課教學平行開課）
實驗十一
植物細胞水勢測定
3
3
實驗十二
呼吸強度測定
3
3
實驗十三
光合色素含量測定
3
3
實驗十四
光合色素的提取分離與理化性質
3
3
實驗十五
硝酸還原酶活性測定
3
3
實驗十六
種子生活力快速測定
3
3
實驗十七
超氧化物岐化酶（SOD）活性測定
3
3
實驗十八
過氧化物酶（POD）活性測定
2
2
實驗十九
丙二醛（MDA）含量測定
3
3
實驗二十
細胞差別透性測定
4
4
備選實驗一
光合強度測定
4
4
備選實驗二
脯氨酸含量測定
3
3
備選實驗三
根系活力測定
3
3
備選實驗四
維生素C含量測定
3
3
設計性實驗（任選）
將光合色素含量測定、POD、SOD活性測定、MDA含量測定和細胞差別透性測定結合起來，開設設計性實驗植物組織衰老過程中的生理變化。
15
15
註：根據需要和實驗室條件從中選擇60學時實驗，生理、生化部分各30學時。
五、課程教學的基本要求和主要環節
（一）實驗教學的基本要求：
1．堅持精講多練的原則，講授、演示、指導與學生獨立設計獨立完成相結合，讓學生成為實驗課主體。
2．將能力培養做為實驗課的主要目標追求。一方面要求學生掌握實驗原理，能根據實驗原理適當調整實驗步驟；另一方面訓練學生能根據專業研究的需要，能獨立地從選擇實驗內容、確定實驗方法、試劑配製、實驗條件控制、儀器使用等環節完成實驗內容；
3．把培養學生動手能力做為實驗課重點之一，達到規范操作目的。
4．實驗內容可根據需要和實驗室條件在大綱范圍內選擇10～11項，並應根據需要和實驗室條件啟動備選實驗。
（二）教學主要環節
1．實驗教學：與相應理論課相伴進行。
2．考試及成績構成：本課程為考查課。成績由兩部分構成，一是實驗報告成績，占總成績的30%～50%；二是期末考試成績，占總成績的50%～70%。
六、本課程與其它課程的聯系與分工
本課程與物理學、化學、分析化學、植物學、生理生化理論課有重要聯系，與化學尤其是分析化學的聯系尤為重要。
化學課為本課程奠定試劑配製、實驗室基本操作方法與操作規范的基礎，本課程運用這些知識與技能基礎完成教學，並在教學中使之鞏固和強化；
植物學為以植物為材料試材准備和取捨提供基礎知識；
植物生理生化為本課程的學習提供必要的理論指導，本課程的學習加深對生理生化知識的理解，並使深奧的理論知識具有可操作性，甚至使之物質化。
七、建議教材與參考教材
建議教材：劉永軍主編《植物生理生化實驗》，中國農業科技出版社，2002年。
參考教材：
1．李合生主編. 植物生理生化實驗原理及技術.北京：高等教育出版社，2000.
2．李建武等主編. 生物化學實驗原理和方法. 北京：北京大學出版社，2000.
3．白寶璋等. 植物生理學測試技術. 中國科學技術出版社，1993
4．西北農業大學. 基礎生物化學實驗指導. 陝西科學技術出版社，1986
5．張志良主編. 植物生理學實驗指導（第二版）. 北京：中國農業出版社，2000.
6．鄒琦主編. 植物生理學實驗指導. 北京：高等教育出版社，1990.
7．朱廣廉等主編. 植物生理學實驗. 北京：北京大學出版社，1990 .
9．李秀錦主編. 實用生化實驗技術. 北京：中國農業出版社，1995.
10．劉福嶺編著. 食品物理與化學分析方法. 北京：輕工業出版社，1987.
11．張承圭等合編. 生物化學儀器分析與技術. 北京：高等教育出版社，1990.
12．何忠孝主編. 電泳. 北京：科技出版社，1999.
13．華東師范大學生物系植物生理教研組編. 植物生理學實驗指導，人民教育出版社，1980
14．.植物生理與分子生物學報
15．.植物生理學通訊
㈥ 何為標准曲線定量分析方法的適用條件及使用注意事項是什麼
儀器分析上的吧，標准曲線法是用分析物的純樣准確配製一系列已知濃度的標准試樣，測得每一濃度對應的凈響應S後，以S對濃度C作圖，得到線性工作曲線，測定時，找到S對應的C,即得試樣濃度。
適用范圍廣，是儀器分析中最基本的定量方法。
注意：為了提高測定準確度，繪制工作曲線的條件應與測定試樣的條件盡量保持一致，否則不宜用此法
㈦ 儀器分析實驗制定標准曲線時,為什麼需要測定五個濃度梯度,平行測定三次
減少測量的誤差。
意思就是 你單個測定的數據可能是不準確的，重復測定三次可以減少誤差。測定五個濃度梯度，是看該曲線的線性關系，
因為濃度的變化有可能不是呈線性排列的，比如拋物線或者其他曲線，測定5個點就是確定是否線性排列
㈧ 什麼是儀器分析中的工作曲線
工作曲線：檢測信號與被測定物質含量（濃度）一一對應的直角坐標繫上的曲線（一般情況是一條直線）。
工作曲線繪制方法：用被測物質的標准含量（濃度），按照操作規程配製由低到高含量（濃度）等梯度的系列，測量響應信號（這個信號一般是和含量成線性關系），在直角坐標系中，以標准含量（濃度）為橫坐標，以測量響應信號值為縱坐標，繪出對應的點（坐標），將這些點連接起來做成一通過原點的直線（嚴格的說，這條直線應通過計算獲得，一般情況手工近似繪制，現在的儀器由電腦直接計算給出）。
工作曲線使用： 當獲得未知試樣的信號值時，在此工作曲線上查對應含量（濃度）即可。
㈨ 有關儀器分析的內標法問題. 何謂內標法光譜定量分析時為何要採用內標法
在被測元素的譜線中選一條分析線,在基體元素譜線中選一條與它相勻稱的內標線,根據這一對譜線強度的比值對被測元素的含量製作工作曲線,然後對未知試樣進行定量分析的方法稱為內標法.
因為譜線強度 I 不僅與元素的濃度有關,還受到許多因素的影響,採用內標法可消除因實驗條件的波動等因素帶來的影響,提高准確度.