① 請教梯度PCR設置梯度問題
在三步法PCR中，變性溫度通常設為94℃，也有98℃，溫度和時間可以參考PCR酶的說明書；延伸溫度通常設為72℃，時間根據酶的擴增效率和目的基因的長度來確定；這兩個溫度對PCR的影響不是關鍵的。但退火溫度的改變會對PCR產生很大的影響，所以梯度PCR主要是針對退火溫度而設計的。在同樣的PCR反應體系下，設置的梯度溫度為引物Tm值附近的溫度范圍，比較哪一個退火溫度能擴增出目的條帶。
反應管的放置由PCR儀的設置決定，我所使用的梯度PCR 儀是48孔的模塊，一橫排一個溫度，最多可設8個不同退火溫度，放反應管的地方裡面的溫度最高，外面溫度最低；如果是96孔的模塊，最多可設12個不同退火溫度，具體你要看說明書對於儀器的詳細說明。
② PTC200梯度PCR儀如何設置梯度
在添加步驟的時候有一個Option選項，選擇就能看到了
③ Bio-RAD PTC-200 PCR儀如何具體設置梯度pcr
編寫程序：
temp 設置溫度和時間
ramp 調整變溫速率
go to 設定循環的步驟
Gradient 設置梯度溫度
在Step 3 中選擇Gradient，下一個界面中Lower temp 輸入你所設梯度的下限溫度，Upper temp輸入你所設梯度的上限溫度，再輸入時間
注意：你輸入上限和下限溫度後，儀器會自動平分為8個梯度溫度。
④ eppendorf pcr儀的退火溫度梯度怎麼設置
設一個高的退火溫度,設一個低的退火溫度,然後會自動計算出中間每排孔的退火溫度,你只要用最低和最高的那兩個就夠了.可以打EPPENDORF的技術支持電話問具體怎麼操作.
⑤ 請問有誰知道如何使用Mx3005P（熒光定量PCR儀）設置梯度溫度
博凌科為-為你解答：我用的也是Mx3005P，不能設置梯度溫度，只能設置整體退火溫度的梯度變化，463363484，歡迎交流
⑥ 普通PCR怎麼跑梯度啊
是不同的管跑不同的溫度呢？還是同一管跑梯度？如果不通的管子，就需要梯度pcr儀了，如果是一管，你可以設置在循環的時候，每循環一次溫度遞增或者遞減0.5或者1度之內的。如果pcr連這個功能都沒有，那你就多設幾個循環，比如前10個循環50度，中間10個循環55度，後面10個循環60度，具體怎麼設置根據自己的情況。
⑦ 誰能給我介紹一下這個PCR儀，可不可以用梯度PCR ，梯度PCR 的各個參數什麼設置
這個型號做不了梯度，只能是一個溫度的。如果你有其他型號的，直接上他們的官網去下載對應型號機器的說明書，有詳細說怎麼設定梯度PCR溫度的步驟。http://www.biometra.com/thermocycler.0.html
⑧ 梯度PCR儀怎麼設置溫度循環我們用的是wealtec的SEDI G
威泰克pcr儀有中文界面的，可以先去setup裡面把language調成簡體中文，然後按照提示走就可以了。
PCR原理很簡單，就是三個步驟的循環么，首先你要在紙上打一個草稿，設計好每個步驟什麼溫度，運行多久，然後幾個循環。然後設置程序的時候，其實就是把你設計的步驟輸進去就好了。
循環的概念也很簡單，就是告訴系統，我想讓這三個步驟運行多少遍的意思，SEDI裡面內置的是GOTO函數，也就是說，當系統從左到右一步一步走，走到一個步驟如果遇到帶GOTO函數了，系統就要停下來看一下，我下一步去哪？所以GOTO函數要告訴系統回到循環中的哪一步（舉例，如果步驟1是95℃ 30s解鏈的步驟，然後步驟3是75℃延伸的步驟，那就在步驟3裡面的GOTO函數設置回步驟1），但是你不能光告訴我回哪，你還得告訴我回幾次吧？總不能每次到你這步都給我打回去，那不是永遠跑不完了么？？所以設置GOTO step1之後，還需要在最下面的框里，告訴我循環多少次，比如35次。
這樣，在第36次系統運行到這個步驟的時候，這個步驟的GOTO函數就會把系統放行到下一個步驟了。至此，這套循環執行完畢。
提出這種問題的小朋友應該是沒有編程經驗，對基本的原理想不清楚。要是有點編程的經驗，這個設置應該是很容易理解的。
⑨ 請問 新引物怎樣設置梯度PCR啊
根據引物Tm值（Na+：50mM），兩條引物有2個Tm值，一般建議低於較低Tm值的5~10℃，但實際上問題不是非常大，只要不是GC含量過高或過低的引物或非常難擴增的片段，Tm值不會影響太多。
另外，梯度PCR需要使用的PCR儀具有梯度功能，至於怎樣設置，不同的PCR儀不一樣，請參考對應的儀器說明書。