細胞凍存最常用的設備是什麼

① 如何凍存細胞

細胞凍存是生物醫學研究中一種重要的細胞保存技術。在進行細胞凍存前，需要准備一系列的儀器和試劑。常用的儀器包括凈化工作台、離心機、恆溫水浴箱、冰箱（4℃、-20℃、-70℃）、倒置相差顯微鏡、培養箱、液氮冰箱等。此外，還需要各種玻璃和塑料器皿，例如吸管、培養瓶、玻璃瓶、廢液缸、吸頭、槍頭、膠塞、移液管、離心管、凍存管等。其他工具如微量加樣槍、紅血球計數板、記號筆、醫用橡皮膏、移液槍等也是必不可少的。

在凍存細胞時，首先需配製含有10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養液。然後取對數生長期的細胞，用胰蛋白酶消化，懸浮細胞移至15ml離心管中。離心後去除胰蛋白酶及舊的培養液，加入適量凍存培養液，輕輕吹打使細胞均勻，計數並調整細胞密度。接著將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5ml，標記相關信息。凍存程序為降溫速率-1～-2℃/min，溫度達-25℃以下時可增至-5℃～-10℃/min，最後迅速浸入液氮中。

細胞復甦時，從液氮容器中取出凍存管，置於37℃溫水中融化，打開蓋子，用吸管吸出細胞懸液，加入離心管並滴加10倍以上培養液，混勻。離心後棄去上清液，加入含10%小牛血清培養液重懸細胞，計數並調整細胞密度，接種培養瓶，37℃培養箱靜置培養。次日更換一次培養液，繼續培養。

在進行細胞凍存和復甦的過程中，需要注意幾個要點。首先，適合凍存的細胞應從增殖期到形成緻密單層細胞前的培養細胞，最好為對數生長期細胞。在凍存前一天最好換一次培養液。其次，凍存管放入液氮容器或從中取出時，需做好防護工作，以免凍傷。最後，凍存和復甦最好用新配製的培養液。

② 大家都用什麼設備，液氮存儲細胞

儲存細胞一定要用到專用保存液氮的低溫液氮容器，但是存放細胞的是定製的提筒或提籃，提筒可定製兩層的，提籃可定製5cmx5cmx4cm和5cmx5cmx6cm的，據客戶提出提籃的容量有點小，儲存的細胞有點少，所以為了滿足客戶凍存大量細胞天馳液氮低溫容器生產廠家特別做改進，盡可能達到客戶的需求。然而也有用冰箱儲存細胞培養基等低溫條件保存的珍貴樣本等。但是大部分都會選擇液氮罐，因為液氮的沸點-196度，可以滿足很多細胞的實際保存。提醒一下：如果用提籃只能選擇125mm和210mm口徑的液氮罐。