① 請問微生物實驗室需要什麼設備和環境.大概多大成本.需要政府批准嗎
二級生物安全實驗室的選址
1 就選址而言,盡管二級生物安全實驗室沒有特殊的要求,但是從生物安全形度講該實驗室所處的位置比較理想。
主實驗室技術參數:
1、潔凈度8級 Cleanliness Class 8
大於等於0.5μm的塵粒數大於352000粒/m3(352粒/L)到小於等於352000粒/m3(3520粒/L),大於等於3μm的塵粒數大於3000粒/m3(3粒/L)到小於等於30000粒/m3(30粒/L)。
2、照度:最低≥300Lx,
3、雜訊:≤60dB
4、相對濕度:30%~65%
5、溫度:18-25℃
6、壓差:-10Pa
7、氣流方向:單相流,從清潔區流向污染區
8、牆面、吊頂:彩鋼板:鋼板厚度0.426,15克覆膜
9、鋁合金:門窗用電泳材質,其餘均採用噴塑。
10、凈化門:帶觀察窗,閉門器
11、高效送風口:不銹鋼沖壓成型
12、地面:PVC卷材
13、洗手盆:不銹鋼材質,內含感應水龍頭、自動干手器
14、傳遞窗:不銹鋼機械連鎖
15、洗眼器:不銹鋼台式
16、送風機組:內含新風口、新風回風混合段、送風段、均流段(維修段)、中效段、出風段、消聲段
17、排風機組:出口有高效過濾器過濾
18、操作台:貼面理化板
19、入口處有國際通用生物安全危險符號,同時有標明實驗室名稱、預防措施負責人、緊急聯絡方式的有機玻璃板。在出口處有黑暗中可明確辨認的安全出口標志。
圍護結構
BSL-1實驗室
1) 無需特殊選址,普通建築物即可,但應有防止節肢動物和嚙齒動物進入的設計。
2) 每個實驗室應設洗手池,宜設置在靠近出口處。
3) 在實驗室門口處應設掛衣裝置,個人便裝與實驗室工作服分開放置。
4) 實驗室的牆壁、天花板和地面應平整、易清潔、不滲水、耐化學品和消毒劑的腐蝕。地面應防滑,不得鋪設地毯。
5) 實驗檯面應防水,耐腐蝕、耐熱。
6) 實驗室中的廚櫃和實驗台應牢固。廚櫃、實驗台彼此之間應保持一定距離,以便於清潔。
7) 實驗室如有可開啟的窗戶,應設置紗窗。
8)實驗室內應保證工作照明,避免不必要的反光和強光。
9)應有適當的消毒設備。
BSL-2實驗室
1) 滿足BSL-1的要求。
2) 實驗室門應帶鎖並可自動關閉。實驗室的門應有可視窗。
3) 應有足夠的存儲空間擺放物品以方便使用。在實驗室工作區域外還應當有供長期使用的存儲空間。
4) 在實驗室內應使用專門的工作服;應戴乳膠手套。
5) 在實驗室的工作區域外應有存放個人衣物的條件。
6) 在實驗室所在的建築內應配備高壓蒸汽滅菌器,並按期檢查和驗證,以保證符合要求。
7)應在實驗室內配備生物安全櫃。
應設洗眼設施,必要時應有應急噴淋裝置。
9) 應通風,如使用窗戶自然通風,應有防蟲紗窗。
10) 有可靠的電力供應和應急照明。必要時,重要設備如培養箱、生物安全櫃、冰箱等應設備用電源。
11) 實驗室出口應有在黑暗中可明確辨認的標識。
下面分類詳細介紹如下:
1 實驗室圍護結構採用彩鋼板材料,表面光滑、耐腐蝕、防水,所有縫隙可靠密封,便於清潔消毒,且防震、防火。
2 天花板、地板、牆壁間的交角均為圓弧形,且可靠密封。
3 地面採用PVC材料,防滲漏、無接縫、光潔、防滑。
4 實驗室的所有門均可自動關閉。
5 實驗檯面採用理化板,防水、耐腐蝕、耐熱。
6 所有入口處均能防止節肢動物和嚙齒動物進入。
7 實驗室出口有在黑暗中可明確辨認的標識。
平面結構與分區
1 分區:分為清潔區、半污染區和污染區
1.1 清潔區:用於實驗人員辦公活動、休息的區域。
1.2 半污染區:即緩沖走廊,用於標本的傳送、廢物的輸出、進入更衣室, 1.3 污染區:是實驗室的核心區域,用於實驗操作。
2 設置:包括配電箱、空調、更衣櫃、II級生物安全櫃、實驗台、洗手池、洗眼器、傳遞窗等。 實驗室消毒隔離要求
1 要求
1.1 實驗室相對獨立,通過隔離門與公共部位相隔。實驗核心區應包括實驗室間及與相連的緩沖走廊,明確劃分為清潔區、半污染區和污染區。
1.2 實驗室內所有物品應專用,需帶出時必須嚴格消毒。
1.3 實驗室工作人員進入實驗室應穿戴好個人防護用品
1.4 培養基、組織、體液等必須放入防漏密閉的容器內儲運。
1.5 血清學試驗、致病菌檢測、樣品處理及分裝應在II級生物安全櫃內進行。
1.6 樣本離心時,離心機應放在排毒櫃內或生物安全櫃內進行,以防產生氣溶膠或濺出。
1.7 實驗過程中使用的器材、實驗廢棄物均應按規定進行消毒、滅菌處理。
1.8 實驗完畢,先消毒物體表面,再按規定程序脫下個人防護用品,並進行空氣消毒。
1.9 離開實驗室前,必須按有關規定清潔消毒雙手。
1.10 儀器設備運出實驗室前必須按有關規定進行嚴格消毒。
2 消毒方法
2.1 實驗室內空氣消毒
2.1.1 可使用送排風系統加強通風。
2.1.2 紫外線燈管、燈車適用於無人室內空氣、物體表面的消毒。常用的室內懸吊式紫外線燈對室內空氣消毒時安裝的數量為平均1.5W/m3(照射強度≥70MW/cm2),照射時間不少於60分鍾。
2.2 實驗室表面消毒
2.2.1 地面
實驗室地面要濕式拖掃,禁止干拖干掃。需消毒時,可用有效氯為500-1000mg/L的含氯消毒液噴灑或拖地,消毒液用量不小於100ml/m3。污染區和清潔區拖把應專用,不得混用。使用後,用上述消毒液浸泡30分鍾,再用水清洗干凈,懸掛晾乾,最好在陽光下曬干後備用。
2.2.2 物體表面的消毒
實驗台、桌、椅、凳、門把手等可用有效氯為500-1000mg/l的含氯消毒液噴灑或擦拭,並作用10-15分鍾後及時用清水擦洗,以除去殘留的消毒液。
2.2.3 手的消毒
實驗室工作完畢後應立即進行手的清洗和消毒。採用感應式自動洗手設備,使用瓶裝式液體皂,洗手後可用一次紙巾擦拭,最好用烘乾機烘乾。離開實驗室前,脫掉工作服後,應進行手的清洗。
2.2.4 病原微生物實驗污水消毒
按GB(8466-2001《醫療機構污水排放要求》執行。
清潔管理制度
1 實驗室清潔的原則
實驗室的清潔工作要在保證生物安全的前提下進行,符合生物安全防護的要求,遵守先消毒後清潔的原則。一般情況下,生物安全實驗室應由專門人員進行消毒,但每名實驗室工作人員都有責任做好實驗室清潔和消毒工作。
2 清潔和消毒用品
實驗室應備有必要的清潔和消毒用品,主要包括拖把、抹布或紗布、水桶、消毒液、配好的75%乙醇等。
3 消毒劑
主要是過氧乙酸、含氯消毒劑等。
4 消毒器械
主要是紫外線燈、紫外線燈車。紫外線的穿透能力特別弱,因此必須定時定期對紫外線燈進行清潔。一般情況下每月使用浸有75%乙醇的抹布擦拭燈管一次,擦拭前,先拔掉插頭並冷卻10分鍾;還應經常檢測紫外線燈的照射強度,當照射強度低於原始照射強度的70%時,就應由專業人員更換燈管,一般情況下每三個月檢查一次紫外線燈的照射強度。
5 保持實驗室環境的整潔
實驗室內禁止飲食、吸煙、會客和喧嘩。每項工作完成後,必須清潔檯面,恢復實驗室的待運行狀態。實驗室檯面和器械應在每次實驗操作完成後及時用消毒液擦拭表面。
6 實驗室地面的清潔
實驗室地面要濕式拖掃,禁止干拖干掃。需消毒時,可用0.1%過氧乙酸或有效氯為500-1000mg/l的含氯消毒液噴灑或拖地,消毒液的用量不得少於100ml/m2。污染區和清潔區拖把應專用 ,不得混用。使用後,用上述消毒液浸泡30分鍾,再用水清洗干凈,懸掛晾乾,最好在陽光下曬干後備用。每次實驗完畢後由工作人員使用消毒液拖地,每月徹底清洗一次。
7 實驗台、桌、椅、凳。門把手的清潔
可用0.1%過氧乙酸拖地或有效氯為500-1000mg/l的含氯消毒液噴灑或擦拭,作用10-15分鍾後及時用清水擦洗,以除去殘留的消毒液。
8 紡織品的清潔
棉織工作服、帽子、口罩等放入專用的污物袋中,用70℃以上熱水加洗滌劑洗滌;有明顯病原微生物污染時,隨時噴灑消毒液消毒或放入專用污物袋中,進行高壓蒸汽滅菌處理。
9 儀器設備的清潔
可用消毒液或75%乙醇擦拭表面消毒,再用中性洗滌劑和清水擦洗去污。
10 手的清洗
實驗室工作完畢後應立即進行手的清洗和消毒。採用感應式自動洗手設備,使用瓶裝式液體皂,洗手後可用一次紙巾擦拭,最好用烘乾機烘乾。離開實驗室前,脫掉工作服後,應進行手的清洗。
消毒隔離制度
1 及時消毒
1.1 當實驗微生物污染實驗環境時,應立即停止實驗,用有效消毒液進行消毒處理。
1.2 實驗室被空氣和氣溶膠傳播的病原微生物污染時,應立即關閉實驗室進行消毒處理。
1.3 可疑污染的物品帶出生物安全實驗室前,應進行徹底滅菌或消毒處理。菌株和相關樣本應對樣本的載體和包裝容器表面進行嚴格滅菌或消毒處理後,方可帶出,且在取出樣本時應對載體進行再次消毒處理,對包裝容器進行滅菌或消毒處理。
1.4 盛裝污染微生物實驗耗材的容器應有足量的消毒液,用過的耗材立即浸入消毒液中。
1.5 實驗結束後,應立即對實驗環境進行消毒處理,如擦洗、消毒工作檯面、地面,開啟紫外線燈照射1小時以上。
1.6 實驗完成後,對實驗廢棄物應立即進行高壓滅菌或消毒等無害化處理。
1.7 實驗人員在實驗結束後應立即清洗消毒雙手,洗臉,必要時應洗澡更衣。
2 徹底消毒
2.1 對需消毒的物品應採取徹底的消毒措施,不留死角。
2.2 消毒液浸泡消毒時,要將被消毒物品全部浸泡在消毒液中,對有管腔的物品,應將消毒液灌入管腔,排除氣栓。
2.3 消毒劑擦拭消毒時,要將消毒液擦拭需要消毒物品的所有表面並保持充分作用時間。
2.4 消毒對象的選擇要根據試驗情況而定,凡可能接觸試驗微生物的實驗器材、試驗環境(包括檯面、地面、牆壁、空氣)、人員(個體及防護用品等)均應採取相應消毒處理。
3 有效消毒
3.1 要根據消毒對象和微生物的種類選擇合適的消毒和滅菌方法。
3.1.1 對細菌芽孢、真菌孢子污染的物品,選用高水平消毒或滅菌法。對於受高抵抗力致病因子污染的器材必須用氫氧化鈉和高壓蒸汽(136℃,60分鍾)進行消毒處理。
3.1.2 對受到分枝桿菌、真菌、親水病毒、螺旋體、支原體、衣原體等病原微生物污染的物品,選用中水平以上消毒方法。
3.1.3 對受到一般細菌繁殖體、親脂病毒等污染的物品,選用中水平或低水平消毒方法。
3.14 存在較多有機物(如血液、分泌物、排泄物)的物品消毒時,應加大消毒葯物的使用劑量和/或處長作用時間。
3.1.5 消毒物品上微生物污染特別嚴重時,應加大消毒劑的的使用劑量和/或處長作用時間。
3.1.6 選擇表面消毒方法,應考慮表面性質,光滑表面可選擇紫外線消毒器近距離照射或消毒液擦拭,多孔材料表面可採用噴霧消毒法。
3.2 消毒器械和消毒液應有衛生許可批文。
3.2.1 消毒產品應在有效期內使用,應按照說明書標示的作用濃度(或強度)、作用時間和使用方法進行消毒操作。連續使用的消毒劑應定期測試有效成分含量並及時更換。
3.2.2 消毒、滅菌設備應定期測定消毒或滅菌效果。大型消毒、滅菌設備在正式使用前和大修後,應通過性能檢測,證明可以有效使用。
4 注意事項
4.1 要減少消毒處理對人體的傷害、對物品的破壞、對環境的影響。
4.2 根據被消毒物品的理化性狀,選擇相容性好的消毒劑。耐高溫、耐濕的物品和器材,首選高壓蒸汽滅菌;金屬、玻璃器材、油劑類和乾粉類等可選乾熱滅菌。畏熱、畏濕、畏腐蝕及貴重物品,可選環氧乙烷薰蒸消毒、滅菌。
4.3 用於人體消毒的消毒劑應選擇對人體皮膚粘膜刺激較小的消毒劑。
4.4 用於環境消毒的消毒劑,要嚴格按照消毒對象、目標污染物種類以及污染程度,以其達到有效消毒、又不污染環境為前提,合理選擇消毒劑使用濃度和作用時間。
實驗室廢棄物管理
1 實驗後的廢棄物如不及時處置則會污染環境,從而對工作人員造成危害,因此有關人員必須嚴格按規定執行。
2 實驗樣本在處理和進行實驗室檢測時產生的廢棄物,如平皿、吸頭盒、塑料試管等應放入適當的容器或嚴格防漏的高壓袋內。
3 實驗過程中產和生的污染性液體物質、廢棄的液體標本、培養物等應放在盛有消毒液的嚴格防漏的專用容器中,並及時加蓋。
4 進行實驗所必須使用的銳器,如一次性注射器、針頭、微量移液器吸頭、玻璃器具、手術刀片及碎玻璃,必須放入指定專用的堅壁容器中,加蓋密封。
5 以上所有盛有廢棄物的容器,在每次實驗完成後,應送高壓滅菌。
6 實驗室所有垃圾及用過的乳膠手套、隔離衣、口罩、一次性帽子等,裝於相應的污物袋內,經高壓消毒處理後丟棄。
7 所有臨床標本在留驗期過後,均應高壓消毒處理後再進行後續處理。
8 高壓鍋應有專人負責,嚴格按使用說明操作,確保在121℃條件下,高壓至少30分鍾,以達到有關滅菌消毒要求。
9 所有實驗產生的廢棄物,必須經嚴格高壓消毒後方能運出實驗區,並送到指定地點集中焚燒處理。
10 空化學製品容器
10.1 非危險性的空化學製品:依照通則消毒後,按普通廢棄物分類處理。
10.2 危險性空化學製品:不得將危險性空化學品容器按普通廢棄物處理。根據有關危險化學製品處理辦法進行相應無害化處理或由上級主管部門處理。
11 如果遇到本作業指導書中未提及的情況,請與實驗室安全部門聯系。
常規安全操作規程
1 禁止非工作人員進入實驗室,參觀實驗室等特殊情況須實驗室主任批准方可進入。
2 嚴禁在實驗室工作區飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝、存放食物和日常生活用品。
3 與實驗無關的物品不得帶入實驗室。
4 接觸微生物或含有微生物的物品後,要洗手;離開實驗室前要脫掉並洗手。
5 實驗過程中,嚴格按有關操作規程操作,降低濺出和氣溶膠的產生。
6 每天至少消毒一次工作檯面,活性物質濺出後要隨時消毒。
7 以移液器吸取液體,嚴禁口吸。
8 所有培養物、廢棄物在運出實驗室前必須經可行的消毒或滅活,如高壓消毒。需運出實驗室消毒的物品應置於防滲漏的專用密閉容器內。
9 制定尖銳器具的安全操作規程。
10 制定有效的防鼠防蟲措施。
11 實驗室入口須貼上醒目的生物危險標志,註明危險因子、生物安全級別、實驗室負責人及其他相關負責人姓名、電話。
第二章 特殊安全操作規程
1 實驗室相對獨立,明確劃分清潔區、半污染區和污染區,三區不得交叉,人流與物流分開。
2 進行感染性實驗時,禁止他人進入實驗室,或必須經實驗室主任同意方可進入;免疫耐受或正在使用免疫抑制劑的工作人員不得進入實驗室,或必須經實驗室主任同意方可進入。
3 工作人員應接受必要的免疫接種和檢測(如乙型肝炎疫苗、卡介苗等)。
4 必要時收集從事危險性工作人員的基本血清留底,並根據需要定期收集血清樣本,檢測並出具報告,如有問題及時解決。
5 實驗室主任應制定規章制度和生物安全程序,並納入生物安全手冊,由實驗室負責人專門保管,工作人員在進入實驗室前要閱讀並在工作中遵照執行;其他人員須告知其潛在風險並符合進入實驗室要求,經實驗室主任允許方可進入。
6 工作人員須接受有關的潛在危險知識的培訓,掌握預防暴露及暴露後的消毒處理程序;每年要接受一次最新的培訓。
7 除特殊情況,禁止在實驗室使用銳器,盡可能使用塑料器材代替玻璃器材,必須使用時應嚴格遵守銳器安全操作規程。
8 培養基、組織、體液及其他具有潛在危險性的廢棄物須按廢棄物處理制度處理。
9人員暴露於感染性物質時,應及時向實驗室負責人匯報,並記錄事故經過和處理方案。
10 禁止將無關動物帶入實驗室。
11 實驗過程中應使用驗收合格的二級生物安全櫃。
12 實驗設備在運出修理或維修前必須嚴格消毒。
至於批准,是一定要經過批準的.不過不一定是政府.如果是大學的實驗室,要經過教育部批准.如果是省級政府部門,那麼就要國務院批准.不一樣的. 至於鵝的疫苗的流程啊,不可能知道的.那是屬於國家機密,告訴你會犯法的.
② 如何控制食品微生物污染求答案
微生物超標是作為判定食品被污染程度的標志,也是判斷其保存能力的指標。食品中細菌菌落總數越多,則食品含有致病菌的可能性越大,食品質量就越差;菌落總數越小,則食品含有致病菌的可能性越小。統計發現,導致這些食品不合格的原因包括很多,微生物污染是問題食品主因,一般微生物超標原因是個別企業可能未按要求嚴格控制生產加工過程的衛生條件如:
1、生產設備消毒不到位
2、生產環境消毒不到位
3、包裝材料清洗消毒不到位
4、產品包裝密封不嚴、
5、人員消毒不到位(更衣室,工作服等)
6、儲運條件控制不當、
7、工器具等生產設備消毒不到位、
8、有滅菌工藝的產品滅菌不徹底。
在消毒劑領域,傳統的方式包括紫外線燈照射殺菌、葯物噴灑滅菌、臭氧、採用初中高效三級過濾方式濾塵等。不可否認在過去的很多年中,他們在之前的食品安全上有著突出的貢獻,但隨著現在國家監管及食品質量的不斷提升,缺點也慢慢體現出來。
紫外線燈照射殺菌:紫外線燈對人體有害,所以只能在靜態(無人)的情況下使用,實際生產時為細菌二次污染食品的提供機會。紫外線燈還有一個弊端,有效輻照距離為1.5米,開啟時空氣中大部分細菌、病毒只是暫時擊暈(隱藏在0.6M以下或輻照距離外),並未完全殺死;關閉時,待人、物流動後被擊暈的細菌、病毒會反彈,使空氣浮游菌數量更高。
葯物噴灑滅菌:如過氧乙酸、次氯酸鈉等,因強烈的氣化作用,刺激性很強,只能在靜態(無人)的情況下使用。多數出口食品企業也不在用噴灑方法滅菌,主要原因是極易造成二次污染。化學試劑易在食品中殘留,對作業人員的皮膚、神經系統、腸胃及呼吸道也有影響,長期容易患毒害性職業病。
臭氧:使用面比較廣,其殺菌效果取決於車間濕度及臭氧濃度大小。在靜態(無人)的狀態下使用,對器具、設備有氧化、腐蝕作用。由於臭氧會造成人的神經中毒、引發支氣管炎和肺氣腫等危害。
初中高效三級過濾方式濾塵:目前,潔凈室無法在食品行業普及(保健食品除外),原因如下:1、潔凈室造價高、耗電大、易損耗品更換頻繁,運行成本大;2、現有食品企業多為老式廠房,改造成本大,搬遷或重建時則報廢。因此,無塵潔凈室對諸多企業而言成了一種擺設,一種形象工程,只有上級檢查時才開啟。
通過以上常用方法比較,得出如下結論:很多企業無法穩定,有效,長期的控制微生物,究其原因就是消毒產品和消毒方案不正確的緣故。因此解決食品微生物超標的的一個重要前提是:了解客戶生產工藝,制定專門的消毒方案和選擇一款優質的消毒劑。
奧克泰士作為進入中國5年的品牌,深耕於食品行業,對眾多產品的生產流程了如指掌,配合我們獨有的消毒方案和專業的技術人員,奧克泰士己經為超過1000多家食品生產企業解決了食品微生物超標問題。
奧克泰士—德國原裝進口,專為食品廠設計,奧克泰士配合空間、環境、物表等可達到食品企業消毒滅菌的要求,近來深受食品企業的青睞。其主要成分是由食品級過氧化氫和銀離子組成的復合型溶劑,食品級無色無味無毒無殘留型。
產品經過IFS國際食品標准認證,歐盟EMAS檢測認證、ISO9001/ISO14001管道體系認證、德國萊茵TUV認證等。由於產品其獨特的作用原理,能夠快速殺滅包括芽孢、細菌孢子、真菌孢子、放射菌、分支桿菌、酵母菌、黴菌、病毒、大腸菌群、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌、志賀氏菌、溶血性鏈球菌、李斯特菌、大腸埃希菌、副溶血性弧菌、肉毒桿菌、霍亂弧菌、變形桿菌、空腸彎麴菌、蠟樣芽孢桿菌、平酸菌、耶爾森氏菌、阪崎腸桿菌、蛔蟲卵等在內的所有類型的微生物。
奧克泰士食品廠專用消毒滅菌劑,是利用消毒劑的質量特性在鹼性條件下穩定,在酸性條件下殺菌效果良好的特點,利用德國技術工藝將消毒劑和酸性活化劑分別加工,經總混壓片制備的同體速溶性消毒劑.是集消毒、清洗、滅菌三者合一的產品,穩定性好、無刺激性氣味,對人體健康安全無副作用,使用非常方便,樣品在54℃上儲存14天,有效成分降解率達到3.83%,通過測試,奧克泰士的穩定性良好,殺菌效果符合同家衛生部《消毒技術規范》規定要求。

③ 如何防止微生物感染人體或污染環境
談如何預防微生物污染食品 ----採用合理殺菌措施 提高食品衛生質量近年來,微生物超標多次引發食品安全問題,食品企業都積極採取控制措施,並制訂了嚴格的工藝流程和消毒制度,但產品中微生物超標的問題仍不時發生。既然採取了多種控制措施,那麼,微生物污染問題為何還會不斷發生呢?專業從事食品殺菌消毒技術研究的上海尼那環保科技有限公司周立法先生認為,產生這個問題的一個重要原因是不少食品企業在控制微生物的過程中,步入了誤區,忽視了動態持續殺菌(也稱動態同步殺菌)的重要性;如果採用動態持續殺菌技術,則可有效控制微生物污染、提高食品衛生質量。
為了保障食品不受微生物的污染,食品企業的品控人員通常從以下五個方面進行控制,即:
1.原輔料控制;
2.加工過程的控制;
3.工藝流程設計;
4.三庫控制:原料庫、輔料庫、成品庫;
5.人員衛生控制。
有的企業為了控制微生物污染,不惜投入巨資,重新裝修,甚至採用不銹鋼吊頂;或是重金聘用海外工程師、勞民傷財,但結果是微生物超標依然超標。目前,在對生產場所進行消毒的過程中,食品企業採用的紫外線照射、化學葯物噴灑等幾種殺菌消毒方式,都存在一定的缺陷,周立法先生對其中的問題進行了分析:
1.紫外線燈照射殺菌:有較強的殺菌作用,安裝簡單,使用方便,在食品行業廣泛應用。但由於過量的紫外線對人體健康有害,所以,這種方法只能在靜態(無人)的情況下使用。而且,用紫外線燈殺菌存在一個弊端,即殺菌距離過短:一般紫外線消毒的有效距離只有1.5米,導致空氣中大部分細菌、病毒只是暫時被擊暈(隱藏在1.5米以下),並未被完全殺死;關閉紫外線消毒機,待人、物流動後,被擊暈的細菌、病毒數量會反彈,又會對空氣的衛生質量造成污染。
2.化學葯物噴灑滅菌:如過氧乙酸、甲醛等,對微生物有較強的殺滅作用,且應用成本低廉。由於化學葯物具有強烈的氣化作用,且刺激性很強,所以,只能在靜態(無人)的情況下使用。現在,多數食品出口企業也不再使用葯物噴灑方法滅菌,主要原因是極易造成二次污染,化學葯物會殘留在食品中,導致殘留量超標;化學消毒劑在殺菌的同時,易與其他有機物發生反應,形成難以被自然環境降解的致癌物質,對操作人員的皮膚、神經系統、腸胃及呼吸道的不良影響很大,長期如此,操作人員容易患毒害性職業病。
3.臭氧:對有害細菌的殺滅有特效,可以減輕車間內的異味,使用面比較廣,其殺菌效果取決於車間內的濕度及臭氧濃度的大小,一般都在靜態(無人)的狀態下使用:因為,臭氧過多釋放時,對人體健康有害。另外,過量的臭氧,對食品生產所用的一些工器具、設備,也會產生強氧化和腐蝕作用。由於臭氧會造成人的神經中毒、視力下降、記憶力衰退,致使人的皮膚起皺、 出現黑斑,引發支氣管炎和肺氣腫,誘發淋巴細胞染色體病變,加速衰老,致使孕婦生出畸形兒等危害,故建議用臭氧消毒後,等殘余的臭氧分解散盡之後,工作人員再進入車間。
4.採用凈化層流初、中、高三級過濾設施:過濾空氣中的塵埃、潔凈密閉工廠的污染空氣;但層流設施本身不具備殺菌功能,殺菌尚需配合大型臭氧發生器。目前,層流凈化在食品行業還無法普及(除保健食品企業外),主要原因如下:1)層流造價高、耗電量大、易損耗品的更換費用大,清理維護難,且施工/維護時需要停工停產、不能局部使用。2)許多食品企業的車間多為老式廠房,如使用層流,需要投入大量資金來改建廠房,且車間重建或搬遷時皆為廢棄物。因此,凈化層流設施,在很多企業成了一種擺設、一種形象工程,只有在執法部門來檢查時,才開啟運行。
採用以上幾種控制微生物超標的方式,由於在散熱間及包裝區域,沒有採用有效的動態殺菌保障措施,在這種情況下停留的待包裝食品,很容易感染上大量的微生物。已有不少食品企業意識到動態同步殺菌的重要性,可是,他們對動態同步殺菌技術並不了解,也不知道如何應用。其實,食品加工操作時的動態同步殺菌技術已經成熟,食品企業採用原先手術領域用的的多功能空氣消毒設備對食品車間進行殺菌,不但殺菌效果顯著,且能炭化空氣中的塵埃、延長食品的保質期、提高車間內的潔凈度。
國內的上海尼那環保科技有限公司生產的NCL空氣凈化消毒車,就可對食品生產車間進行動態同步殺菌。據悉,該動態殺菌設備工藝靈感來源於暴雨後的空氣十分清新,雨水能洗刷掉空氣中的塵埃。其原理為:採用洗滌液進入設備的鼻腔,快速洗掉吸入的污染空氣,將塵埃洗入洗滌液中;通過壓力泵的作用,將塵埃輸入自動除塵過濾器,濾塵排污,從而達到自動清除塵埃、潔凈空氣的功效。此工藝風阻小,且恆定(15-20P),可代替初中效過濾器,不形成二次污染,其稱為除塵法。
根據客戶需求,在洗滌液中配置生物酶、三氧水、鹼水等化學試劑,吸收電機組所散發的熱量來保持恆溫,迅速中和分解空氣中的放射體和氣態污染物,其稱為中和法。採用鋁蜂窩為載體,表面附載一定量的納米級鎳、二氧化鈦材料、光催化材料,合成金屬光觸媒網,在特定的光源照射下,不斷地吸附—催化—分解,可清除空氣中的細菌、病毒及有害氣體,其稱為殺菌法。據上海尼那環保科技有限公司項目經理周立法先生介紹,該公司推出的NCL牌空氣消毒設備就是一個塵埃收集運輸器,在運輸過程中,同步殺滅細菌、病毒,能保證設備長期恆效正常運行。而其他的某些空氣凈化消毒設備或層流設施純粹就是一個塵埃和細菌的收集器(吸塵器),隨著工作時間的延長,消毒效率會逐漸降低,需頻繁更換過濾器材,才能保證工作效果。如採用上海尼那環保公司的NCL-2型消毒設備1台,在200立方米的有人(動態〉車間內,室內空氣潔凈度可達30萬級以上,對空氣中的黴菌、大腸桿菌等殺滅率可達99.9%。該消毒設備採用220伏的電源,8小時約用1度電,開機半小時可達消毒效果。為了向更多的食品企業提供更優質的服務,上海尼那環保科技公司可免費為食品企業設計凈化車間的平面圖紙及投建方案。
同時,NCL公司承諾:該公司賣出的消毒設備在規定的使用范圍內,經檢測的消毒效果不達標,該公司將全額退還客戶的貨款,以保障客戶的利益。食品企業在嚴格執行工藝流程和消毒制度的同時,若採用空氣凈化消毒車,可有效控制微生物污染、提高食品的衛生安全質量。
④ 生物實驗室必備設備有哪些
生物實驗室必備設備:
一、溫度與濕度
二、光源
三、供/排水、排污
四、供電
五、隔音設備
六、降噪設備
七、安全設備
⑤ 污染食品的微生物主要有哪幾種類型防治策略急求,謝謝
1、大腸菌群大腸菌群,它不代表某一個或某一屬細菌,而指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關的細菌。
大腸菌群都是直接或間接地來自人和溫血動物的糞便。一般食品中大腸菌群超標,表示食品受動溫血動物的糞便污染,其中典型大腸桿菌為糞便近期污染,其他菌屬則可能為糞便的陳舊污染。人吃了大腸菌群超標的食物可能會導致:腸道傳染病、食物中毒等。
2、黴菌黴菌,是絲狀真菌的俗稱,意即"發霉的真菌",它們往往能形成分枝繁茂的菌絲體,但又不像蘑菇那樣產生大型的子實體。在潮濕溫暖的地方,很多物品上長出一些肉眼可見的絨毛狀、絮狀或蛛網狀的菌落,那就是黴菌。
黴菌在我們的生活中無處不在,它比較青睞於溫暖潮濕的環境,一有合適的環境就會大量的繁殖,必須採取措施來阻止黴菌的繁殖或切斷其傳播途徑,就可以擺脫黴菌的污染。
黴菌對食物的污染,降低食品的食用品質外,還會產生黴菌毒素。黴菌毒素對人主要毒性表現在神經和內分泌紊亂、免疫抑制、致癌致畸、肝腎損傷、繁殖障礙等。
3、酵母酵母是一些單細胞真菌,並非系統演化分類的單元。是子囊菌、擔子菌等幾科單細胞真菌的通稱,一般泛指能發酵糖類的各種單細胞真菌,有的對食品加工有益,如發酵粉、釀酒酵母,有的為致病菌。
空氣中、人體中都存在一定數量的酵母菌,只要在合適的環境就會快速繁殖。吃了致病性酵母菌污染的食品易造成食物中毒,有些免疫力低的人群亦可能發生酵母菌感染。
4、金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌是人類的一種重要病原菌,隸屬於葡萄球菌屬,有「嗜肉菌"的別稱,是革蘭氏陽性菌的代表,可引起許多嚴重感染。
金黃色葡萄球菌在自然界中無處不在,空氣、水、灰塵及人和動物的排泄物中都可找到。因此,食品受到污染的機會很多。美國疾病控制中心報告,由金黃色葡萄球菌引起的感染占第二位,僅次於大腸桿菌。
金黃色葡萄球菌是人類化膿感染中最常見的病原菌,可引起局部化膿感染,也可引起肺炎、偽膜性腸炎、心包炎等,甚至敗血症、膿毒症等全身感染。
5、沙門氏菌沙門氏菌是一種常見的食源性致病菌。沙門氏菌屬有的專對人類致病,有的只對動物致病,也有對人和動物都致病。沙門氏菌病是指由各種類型沙門氏菌所引起的對人類、家畜以及野生禽獸不同形式的總稱。感染沙門氏菌的人或帶菌者的糞便污染食品,可使人發生食物中毒。據統計在世界各國的種類細菌性食物中毒中,沙門氏菌引起的食物中毒常列榜首。
沙門氏菌主要污染肉類食品,魚、禽、奶、蛋類食品也可受此菌污染。沙門氏菌食物中毒全年都可發生,吃了未煮透的病、死牲畜肉或在屠宰後其他環節污染的牲畜肉是引起沙門氏菌食物中毒的最主要原因。
由沙門氏菌引起的食品中毒症狀主要有惡心、嘔吐、腹痛、頭痛、畏寒和腹瀉等,還伴有乏力、肌肉酸痛、視覺模糊、中等程度發熱、躁動不安和嗜睡,延續時問2~3d,平均致死率為4.1%。
6、志賀氏菌志賀氏菌即通稱的痢疾桿菌。痢疾賀志賀氏菌是導致典型細菌痢疾的病原菌,在敏感人群中很少數量的個體就可以致病。志賀氏菌食物中毒是指由志賀氏菌引起的細菌性食物中毒。引起食物中毒的志賀氏菌主要是宋內氏志賀菌。主要發生在夏秋季,引起中毒的食品主要是熱肉製品等。志賀氏菌侵入腸粘膜組織並釋放內毒素引起症狀。潛伏期一般10-14h。症狀為劇烈腹痛、腹瀉(水樣便,可帶血和粘液)、發熱、里急後重顯著。嚴重者出現痙攣和休克。
7、溶血性鏈球菌溶血性鏈球菌又稱沙培林,對熱和化學清毒劑均敏感,常引起扁桃體、咽部、中耳等感染。亦為腎盂腎炎、產褥熱、猩紅熱的病原體。
一般來說,溶血性鏈球菌常通過以下途徑污染食品:
①食品加工或銷售人員口腔、鼻腔、手、面部有化膿性炎症時造成食品的污染;
②食品在加工前就已帶菌、奶牛患化膿性乳腺炎或畜禽局部化膿時,其奶和肉屍某些部位污染;
③熟食製品因包裝不善而使食品受到污染。
溶血性鏈球菌常可引起皮膚、皮下組織的化膿性炎症、呼吸道感染、流行性咽炎的爆發性流行以及新生兒敗血症、細菌性心內膜炎、猩紅熱和風濕熱、腎小球腎炎等變態反應。
8、李斯特菌李斯特菌,又名單核球增多性李斯特菌、李氏菌,是一種兼性厭氧細菌,為李斯特菌症的病原體。李斯特菌是革蘭氏陽性菌,屬厚壁菌門,取名自約瑟夫?李斯特。它主要以食物為傳染媒介,是最致命的食源性病原體之一。
李斯特菌在環境中無處不在,在絕大多數食品中都能找到李斯特菌。肉類、蛋類、禽類、海產品、乳製品、蔬菜等都已被證實是李斯特菌的感染源。李斯特菌是嗜冷菌,在冰箱冷藏溫度、沙拉中均能生長繁殖。
李斯特菌感染後健康成人個體可出現輕微類似流感症狀,新生兒、孕婦、免疫缺陷患者表現為呼吸急促、嘔吐、出血性皮疹、化膿性結膜炎、發熱、抽搐、昏迷、自然流產、腦膜炎、敗血症直至死亡。
9、大腸埃希菌大腸埃希菌是人和動物腸道中的正常棲居菌。大腸埃希菌的致病物質之一是血漿凝固酶。根據致病性的不同,致瀉性大腸埃希菌被分為產腸毒素性大腸埃希菌、腸道侵襲性大腸埃希菌、腸道致病性大腸埃希菌、腸集聚性黏附性大腸埃希菌和腸出血性大腸埃希菌5種。
常見中毒食品為各類熟肉製品、冷葷、牛肉、生牛奶,其次為蛋及蛋製品、乳酪及蔬菜、水果、飲料等食品。中毒原因主要是受污染的食品食用前未經徹底加熱。中毒多發生在3-9月。不同的致瀉性大腸埃希菌引起的中毒,症狀各不相同。
10、副溶血性弧菌副溶血性弧菌,為革蘭氏陰性桿菌,呈弧狀、桿狀、絲狀等多種形狀,無牙孢。
進食含有該菌的食物可致食物中毒,也稱嗜鹽菌食物中毒。臨床上以急性起病、腹痛、嘔吐、腹瀉及水樣便為主要症狀。副溶血性弧菌是一種海洋細菌,主要來源於魚、蝦、蟹、貝類和海藻等海產品。此菌對酸敏感,在普通食醋中5分鍾即可殺死;對熱的抵抗力較弱。
11、肉毒桿菌肉毒桿菌是一種生長在缺氧環境下的細菌,在罐頭食品及密封腌漬食物中具有極強的生存能力,是毒性最強的細菌之一。肉毒桿菌是一種致命病菌,在繁殖過程中分泌肉毒毒素,該種毒素是目前已知的最劇毒物,可抑制膽鹼能神經末梢釋放乙醯膽鹼,導致肌肉鬆弛型麻痹。
肉毒桿菌在自然界分布廣泛,土壤中常可檢出,偶亦存在於動物糞便中。人體的胃腸道是一個良好的缺氧環境,適於肉毒桿菌居住。肉毒桿菌屬於厭氧菌,嚴格厭氧,在胃腸道內既能分解葡萄糖、麥芽糖及果糖,產酸產氣,又能消化分解肉渣,使之變黑,腐敗惡臭。在厭氧環境中,此菌能分泌強烈的肉毒毒素,能引起特殊的神經中毒症狀,致殘率、病死率極高。
攝食肉毒桿菌的食品可引發食物中毒,如pH>4.6的低酸性罐頭食品(含鐵罐,玻璃罐)或香腸、火腿。人感染肉毒桿菌後會出現視覺模糊、呼吸困難、肌肉乏力等症狀,如病情嚴重可能導致死亡。
12、霍亂弧菌霍亂弧菌是人類霍亂的病原體,霍亂是一種古老且流行廣泛的烈性傳染病之一。曾在世界上引起多次大流行,主要表現為劇烈的嘔吐,腹瀉,失水,死亡率甚高。屬於國際檢疫傳染病。
人類在自然情況下是霍亂弧菌的唯一易感者,傳播途徑主要是通過污染的水源或未煮熟的食物如海產品、蔬菜經口攝入。居住擁擠,衛生狀況差,特別是公用水源是造成暴發流行的重要因素。生產中的控制主要是嚴格審核原材料的來源,以及生產工序中的滅菌處理。
13、變形桿菌變形桿菌是人和動物的寄生菌和病原菌。廣泛分布在自然界中,如土壤、水、垃圾、腐敗有機物及人或動物的腸道內。
可引起多種感染。中毒食品主要以動物性食品為主,其次為豆製品和涼拌菜,發病季節多在夏、秋,中毒原因為被污染食品在食用前未徹底加熱,變形桿菌食物中毒是我國常見的食物中毒之一。進食後2~30小時出現上腹部刀絞樣痛和急性腹瀉,伴有惡心、嘔吐、頭痛、發熱。病程較短,一般1~3天可恢復,很少有死亡。
14、空腸彎麴菌空腸彎麴菌菌體輕度彎曲似逗點狀,在暗視野鏡下觀察似飛蠅。有莢膜,不形成芽胞。最適溫度為37~42℃。在正常大氣或無氧環境中均不能生長。空腸彎麴菌是多種動物如牛、羊、狗及禽類的正常寄居菌。在它們的生殖道或腸道有大量細菌,故可通過分娩或排泄物污染食物和飲水。人群普遍易感,5歲以下兒童的發病率最高,夏秋季多見。蒼蠅亦起重要的媒介作用。亦可經接觸感染。感染的產婦可在分娩時傳染給胎兒。
空腸彎麴菌有內毒素能侵襲小腸和大腸粘膜引起急性腸炎,亦可引起腹瀉的暴發流行或集體食物中毒。該菌有時可通過腸粘膜入血流引起敗血症和其他臟器感染,如腦膜炎、關節炎、腎盂腎炎等。孕婦感染本菌可導致流產,早產,而且可使新生兒受染。
15、蠟樣芽孢桿菌芽胞桿菌屬中的一種。菌體細胞桿狀,末端方,成短或長鏈,革蘭氏陽性。蠟樣芽胞桿菌與少數食物中毒有關(約2–5%),包括一些嚴重的惡心、嘔吐以及腹痛。
大概來說,桿菌性食物中毒是由於錯誤地烹調方法造成細菌孢子殘留在食物上,更糟糕的是食物被不及時冷凍而讓孢子發芽,細菌繁殖的結果是產生腸毒素,人食用含毒素的食物後會產生嘔吐、腹瀉等不良症狀。
16、平酸菌平酸菌是引起罐頭食品酸敗變質而又不胖聽(即產酸不產氣)的微生物,在罐頭工業上稱為平酸菌。它是兼性厭氧芽胞桿菌。其廣泛分布於土壤,灰塵和各種變質食品中。誤食平酸菌導致變質的罐頭會造成食物中毒,有腹瀉、嘔吐等症狀。
17、耶爾森氏菌耶爾森菌屬於腸桿菌科,包括鼠疫耶氏菌、小腸結腸炎耶氏菌與假結核耶氏菌等十餘個菌種,這是一類革蘭陰性小桿菌。
其鼠疫耶氏菌、小腸結腸炎耶氏菌與假結核耶氏菌對人類的致病性已明確,其中鼠疫耶氏菌具有F1、V/W、Pgm、Pst1等重要的毒力因子,毒力很強,少量細菌即可使人致病。本屬細菌通常先引起嚙齒動物、家畜和鳥類等動物感染,人類通過接觸已感染的動物、食入污染食物或節肢動物叮咬等途徑而被感染。
18、阪崎腸桿菌阪崎腸桿菌是乳製品中近幾年新發現的一種致病菌。阪崎腸桿菌能引起嚴重的新生兒腦膜炎、小腸結腸炎和菌血症,死亡率高達50%以上。目前,微生物學家尚不清楚阪崎腸桿菌的污染來源,但許多病例報告表明嬰兒配方粉是目前發現的主要感染渠道。
19、蛔蟲卵蛔蟲卵是通過有蟲卵的糞便污染水和食物,人吃喝了這種被污染而未經煮死的蟲卵的飲水和食物就會得蛔蟲病。控制措施一方面是嚴控生產工序,另一方面是生活中吃生鮮瓜果時一定要清洗干凈答案來自
⑥ 飲料生產中的微生物污染從哪幾個方面進行控制
在飲料生產過程中,灌裝車間的設備管道容器及環境內若有微生物存在,很可能造成二次污染,從而使得飲料微生物超標,埋下產品質量隱患。對於上述已暴露的質量安全問題和潛在的質量安全隱患,我們可以看出灌裝車間的設備容器及環境衛生控製成為整個飲料生產中防止微生物污染的關鍵。如何在潔凈環境下灌注,使灌裝後灌裝容器及空間環境保持潔凈以防止再度感染,達到在不加防腐劑、不經冷藏條件下得到較長質保期呢。
1、保障灌裝設備的設計便於清洗和滅菌,避免灌裝過程中構成二次交叉感染,並將滅菌後的灌裝容器在無菌環境下,快速輸送到灌裝環節,以盡可能減少污染的可能性。
2、飲料容器及管道在使用後會產生一些沉積物,非常容易生長微生物,長期使用後會產生一層生物膜。這些生物膜主要是微生物混合一些雜質長期吸附在內壁上,形成粘性很強的一層膜狀物,很難清除掉。生產完成後,需徹底清洗消毒。
3、灌裝設備停止運行數小時後再恢復生產時,必須在設備停止運行後立刻對物料管路、料缸、灌裝閥等物料通道進行清洗與殺菌,以保證與物料接觸位置處於無菌狀態。
4、完善制度,加大執行能力,如人員的素質培訓、環境衛生保障制度、設備的及時維護等。只有在考慮到每個可能染菌的細節,才能夠保障飲料產品的安全、品質及延長產品保質期。
針對飲料製品在灌裝過程中易受管道及不潔空氣污染、繼而發生微生物超標的問題,濟南辰宇環保科技有限公司引進德國原裝動態殺菌機--奧克泰士冷霧機。配合奧克泰士殺菌劑,徹底解決飲料在灌裝過程中的微生物污染問題。
奧克泰士--德國原裝進口,食品級無色無味無毒無殘留型,主要成分為食品級過氧化氫銀離子,配合空間、環境、物表等可達到食品企業消毒滅菌的要求。產品經過IFS國際食品標准認證,歐盟EMAS檢測認證,ISO9001、ISO14001環境管理體系認證,德國萊茵TUV認證等。由於其獨特的作用原理,能夠殺滅包括芽孢、細菌、真菌、病毒、支原體、衣原體、放射菌、分支桿菌、炭疽桿菌、黴菌、酵母菌、沉降菌、浮游菌等200多種微生物。具有殺菌徹底,不產生微生物耐葯性,無任何毒性殘留,不造成重復污染等特點。

⑦ 在微生物實驗室中無菌操作需要什麼儀器
培養皿 培養基 槍頭 移液槍 ep管 塗布器 酒精燈 等
⑧ 控制食品微生物污染的措施
在食品貯藏工作中,應該採取各種措施,對於可能出現的微生物污染進行預防。一旦出現微生物污染,應採取措施控制。
1
、食品微生物污染的預防
許多食品,如水果、蔬菜、魚、肉、禽蛋等,內部一般不常含有微生物,但其外表往往帶有各種各樣的微生物,在某些條件下,其數量相當巨大。這些微生物的存在,由於它們已適應於這些食品的環境條件,因而極易大量而迅速繁殖。
作為預防措施,首先是對某些食品原料所帶有的泥土和污物進行清洗,以減少或去除大部分所帶的微生物。乾燥、降溫,使環境不適於微生物的生長繁殖,也是一項有效的措施。在加工、運輸、貯藏過程中的環境、設備、輔料和工作人員,都應注意防止微生物對食品的污染。無菌密封包裝是食品加工後防止微生物再次污染的有效方法。
2
、減少和去除食品中已有的微生物
食品及其原料,都不可避免地帶有某些微生物,包括有病原菌和腐敗菌,不僅可引起食品的腐敗變質,食用後甚至會引起人們的健康損害。
減少和去除食品中已有微生物的方法很多,如過濾、離心、沉澱、洗滌、加熱、滅菌、乾燥、加入防腐劑、輻射等等。這些方法可以根據食品的不同性質,加以選擇應用。但應注意選擇的方法應以不損害食品的營養、風味、表觀性狀、內在質地和食用價值為原則。
3
、控制食品中殘留微生物的生長繁殖
經過加工處理的食品,仍有可能殘留一些微生物。控制食品中殘留微生物的生長繁殖,就可以延長食品的貯藏日期,並保證食品的食用安全。控制的方法有低溫法、乾燥法、厭氧法、防腐劑法等等。基本原理就是創造一個不利於微生物生長繁殖的環境條件,或加入某些化學葯劑以抑制微生物的生長。
⑨ 細胞培養的設備及環境要求包括哪些
細胞培養專家——齊氏生物認為,你可以從以下幾個方面進行參考:
實驗室
細胞培養是一種無菌操作技術,要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受 其它有害因素的影響.細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環境清潔,空氣清新,乾燥和無煙塵.細胞培養室的設計原則一般是無菌操作區設在室內較少走動的內側,常規操作和封閉培養於一室,而洗刷消毒在另一室.
2.常用設施及設備
⑴超凈工作台:也稱凈化工作台,分為側流式,直流式和外流式三大類.
⑵無菌操作間:一般由更衣間,緩沖間和操作間三部分組成.操作間放置凈化工作台及二氧化碳培養箱,離心機,倒置顯微鏡等.緩沖間可放置電冰箱,冷藏器及消毒好的無菌物品等.
⑶操作間:普通培養箱,離心機,水浴鍋,定時鍾,普通天平及日常分析處理物
⑷洗刷消毒間:烤箱,消毒鍋,蒸餾水處理器及酸缸等.
⑸分析間:顯微鏡,計算機及列印機等.
3.培養器皿
常用細胞培養器皿有培養瓶,培養板,培養皿等.常准備量是使用量的三倍.器皿應選擇透明度好,無毒,利於細胞粘附和生長的材料,常用一次性聚苯乙烯材料製品或中性硬度玻璃製品.常用的器皿有下面幾種.
⑴液體儲存瓶:用於儲存各種配製好的培養液,血清等液體,常用規格有500ml,250ml,100ml等幾種.
⑵培養瓶:根據培養細胞種類要求不同培養瓶的形態各異,用於細胞傳代培養的細胞要求瓶壁厚簿均勻,便於細胞貼壁生長和觀察,瓶口要大小一致,口徑一般不小於1cm,允許吸管伸入瓶內任何部位,規格有200ml,100ml,50ml,25ml,10ml等幾種.
⑶培養皿:用於開放式培養及其它用途.分直徑30mm,60mm,120mm等幾種.
⑷吸管:常用的有長吸管和短吸管兩類,長吸管也稱刻度吸管.其改良後管上部有球型刻度稱改良吸管,刻度吸管用於移動液體.常用1ml和10ml兩種.短吸管也叫滴管,分彎頭和直頭兩種.
⑸離心管:離心管是細胞培養中使用最廣泛的器皿,根據用途不同形態各樣,常用於細胞培養的離心管有大腹式尖底離心管和普通尖底離心管兩類.前者分別為50ml,30ml,15ml;後者則多為10ml和5ml.
⑹其它:如三角燒瓶,燒杯,量筒,漏斗,注射器等.
4.細胞培養溫度
維持培養細胞旺盛生長,必須有恆定而適宜的溫度.不同種類的細胞對培養溫度要求也不同.人體細胞培養的標准溫度為36.5℃±0.5℃,偏離這一溫度范圍,細胞的正常代謝會受到影響,甚至死亡.培養細胞對低溫的耐受力較對高溫強,溫度上升不超過39℃時,細胞代謝與溫度成正比;人體細胞在39-40℃1小時,即能受到一定損傷,但仍有可能恢復;在40-41℃1小時,細胞會普遍受到損傷,僅小半數有可能恢復;41-42℃1小時,細胞受到嚴重損傷,大部分細胞死亡,個別細胞仍有恢復可能;當溫度在43℃以上1小時,細胞全部死亡.相反,溫度不低於0℃時,對細胞代謝雖有影響,但並無傷害作用;把細胞放入25-35℃時,細胞仍能生存和生長,但速度減慢;放在4℃數小時後,再回到37℃培養,細胞仍能繼續生長.細胞代謝隨溫度降低而減慢.當溫度降至冰點以下時,細胞可因胞質結冰受損而死亡.但是,如果向培養液中加入一定量的冷凍保護劑(二甲亞碸或甘油),可在深低溫下如-80℃或-196℃(液氮)長期保存.
5.合適的氣體環境
氣體是哺乳動物細胞培養生存必需條件之一,所需氣體主要有氧氣和二氧化碳.氧氣參與三羧酸循環,產生供給細胞生長增殖的能量和合成細胞生長所需用的各種成分.開放培養時一般把細胞置於95%空氣加5%二氧化碳混合氣體環境中.二氧化碳既是細胞代謝產物,也是細胞生長繁殖所需成分,它在細胞培養中的主要作用在於維持培養基的pH值.大多數細胞的適宜pH為7.2-7.4,偏離這一范圍對細胞培養將產生有害的影響.但細胞耐酸性比耐鹼性大一些,在偏酸環境中更利於細胞生長.但有一些細胞也喜歡偏鹼環境中生長,如成纖維細胞最適合pH是7.4-7.6.每種細胞都有其最適pH值.