差速离心用什么仪器

㈠ 【离心课堂】差速离心方法

在实验过程中，由于样品的各种性质差异，只有选择了正确的离心方法，才能获得预期的分离纯化结果。常用的离心方法主要有差速离心法、密度梯度离心法。其中密度梯度离心法又可细分为速率区带离心和等密度梯度离心法。本期向大家具体介绍离心方法之差速离心。

离心方法之差速离心

差速离心法(differentialvelocity centrifugation method)又称离心力差分离法。

差速离心法原理

利用样品中各组分沉降系数的差异，对不同的微粒施以不同的离心力，经过多次离心，离心速度逐步加大，将不同的微粒依次沉降，从而实现离心分离。

差速离心原理可用离心力表达式说明：F=ma， 其中 a=ω²R。

由于小粒径的微粒质量小，分离时所需离心力大。为满足大离心力的需要，必需提高其旋转速度，方可分离。以不同的离心力分离不同粒径的微粒是动力学的分离方法，特别是沉降速度差别较大的微粒多采用此种分离方法。

如果分离样品中有大中小三种不同粒径的微粒，对它们施以不同的离心力，大粒径的微粒，其质量较大，将会首先沉降；分离上清液，以更大转速对上清液进行第二次离心，中颗粒被分离出来；再取上清以更大离心力，更高的转速，最后沉降小颗粒，以达到不同颗粒的分离，如图1所示。

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㈡ 离心机的使用注意事项以及风险预防

实验室离心机广泛应用于医院、科研机构、食品药品检验和食品卫生等领域。选择离心机及离心管，注意操作安全和风险防范是关键。离心机分为台式、立式、过滤、沉降、低速、高速、超高速、微量、小、大、超大容量以及冷冻与常温机型。

选择离心机需考虑分离需求：结晶产品时，需低速离心机分离，转速在4000转/分钟至7000转/分钟，适用于台式或落地式低速大容量机型；直径1-50微米的物质分离，推荐低速离心机，转速为4000-7000转/分钟，相对离心力约为2000g-9420g；病毒等直径0.1-1微米的物质，高速冷冻离心机适合，转速在10000转/分钟至20000转/分钟，离心力约为10000g-100000g；蛋白质、DNA、RNA等直径0.002-0.1微米的组分分离，需要超速离心机，转速40000转/分钟以上，离心力要求达到100000g-400000g以上。

易燃易爆物品分离时，应选择防爆离心机；有机活性物质分离过程中保持恒温时，使用冷冻离心机。

计算离心力使用相对离心力（RCF），RCF = (g * R * N) / (1000 * 1000)，其中g为重力加速度，R为离心半径，N为转速。水平、角、垂直转子的转子离心半径R示意图需参考相关资料。

离心机安装应放在稳固、水平、避免阳光直射的地面或台面，确保周围至少30cm无杂物，远离易燃易爆品，并使用稳定电压，最好单独插座，外壳可靠接地。

离心管选择：玻璃离心管仅适用于低速离心机；PA和PP管化学性能稳定，半透明，能耐高温消毒；PC管透明度好、硬度大，耐高温消毒，但不耐强酸强碱及某些有机溶剂；CN管质地较软，透明，不耐强酸强碱及某些有机溶剂，适合蔗糖、甘油等密度梯度离心；钢制离心管强度大、耐热、抗冻、抗化学腐蚀，广泛用于多种离心。

离心管安装需先在天平上精确平衡，确保重量偏差不超过说明书范围。操作时注意密度配平，避免奇数个离心管的不平衡，且在使用无盖离心管时，液体不宜过满，以免离心时甩出；使用盖密封离心管要求抽真空时，液体需满装，以防止离心时塑料离心管上部因真空变形。

常用的离心方法包括差速离心、速率区带离心和等密度区带离心。差速离心法适用于生化样品提取，通过增加离心力逐级分离；速率区带离心法适用于大小不同而密度相同物质的分离，形成区带；等密度区带离心法适用于存在密度差的颗粒分离，直至达到等密度点。

离心机使用注意事项和风险预防包括离心管平衡、装载溶液的合理性、密封情况、离心方法的选择等，避免常见事故如离心管破裂、转子不平衡、转子损坏等。加强安全意识、定期维护设备、严格操作流程是关键。