A. 什么是数字PCR （Digital PCR）
数字PCR作为一种DNA绝对定量技术，它与传统的DNA定量方法有所不同。光度法是基于DNA分子的吸光度来进行定量的，而实时荧光定量则依赖于Ct值，即检测到荧光值对应的循环数来定量。相比之下，数字PCR采用了单分子PCR方法，通过计数的方式对DNA进行定量，因此能够提供绝对的DNA浓度数据。
数字PCR的核心技术在于微流控。这种方法通过将大量的稀释后的DNA溶液分散至芯片的微反应器中，使得每个反应器中的DNA模板数量不超过一个。经过PCR循环后，含有一个DNA模板的反应器会发光，而没有模板的反应器则保持暗态。通过计算发光反应器与非发光反应器的比例，结合每个反应器的体积，可以推算出原始溶液中的DNA浓度。
这种方法不仅提高了定量的准确性，还减少了背景噪音和非特异性结合的影响。数字PCR在生物医学研究、基因检测和疾病诊断等领域具有广泛的应用前景。它能够帮助科学家和临床医生更精确地了解DNA的数量变化，这对于基因表达分析、遗传变异检测以及病原体的快速诊断至关重要。
此外，数字PCR还能够在单细胞水平上进行定量分析，这对于研究细胞间的异质性以及评估稀有细胞的含量具有重要意义。这种技术的进步不仅推动了分子生物学的发展，也为个性化医疗和精准医学提供了强有力的支持。