免疫斑点法需要什么仪器

❶ 胶体金试纸条的测试原理是什么

胶体金快速检测卡是采用胶体金免疫层析技术研制而成的，此技术是90年代初在免疫渗透技术的基础上建立的一种快捷简单的免疫学检测技术，市场上一般用到的有双抗体夹心法、双抗原夹心法、小分子竞争法等等。 胶体金是氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，金离子还原后聚合成的一定大...小的金颗粒，它由一个基础的晶核（11个金原子形成的二十面体）和包围在外的双离子层构成（内层为负离子层AuCl2－，外层是带正电荷的H＋）。由于静电作用，金颗粒之间相互排斥而悬浮成为一种稳定的胶体状态，形成带负电的疏水胶溶液，故称胶体金。 。质量差的溶液烧制后，液面有漂浮物，大小不一，形状各异。胶体金颗粒大小，决定了我们用肉眼观察到的胶体金溶液颜色，由红到紫色。 胶体金一般在弱碱环境下带负电荷，会与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合，一般称这种结合叫静电结合，所以不影响蛋白质的生物特性。除了与蛋白质结合以外，它还可以与许多其它生物大分子结合，如SPA、PHA、ConA等。根据胶体金的一些物理性状，如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应，加上结合物的免疫和生物学特性，从而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。 胶体金标记技术，实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。用于胶体金标记的蛋白必须要经过前处理，其目的在于 1、去除高浓度的盐分，高浓度的盐分往往干扰蛋白与胶体金的吸附结合，或导致胶体金粒子的凝聚，这一步往往采用低浓度缓冲液来进行。 2、使蛋白分子尽量分散为单体，冻干蛋白或高浓度蛋白溶液中蛋白分子往往凝聚为多聚体大分子，可同时与多个胶体金粒子结合，影响标记的灵敏度和定量分析。 3、使蛋白具有适当的分子量。蛋白分子量过小（30 kD），形成的蛋白复合体往往是不稳定，可短时间内失活。而分子量过大时，被认为影响探针的灵敏度，特别是已知蛋白的结构与活性中心的情况下，去除对活性影响的结构部分是提高标记灵敏度，延长探针寿命（防止凝集）的有效办法。把分子量过小的蛋白与其它蛋白（如牛血清蛋白等）结合后，能制备出稳定性更强的探针。 当蛋白前处理完成后，接着要确定胶体金与蛋白结合的最佳pH值。对于理化性质不确定的蛋白这一步尤为重要。过量的蛋白与不同pH值的胶体金结合后，只有某一特定pH值能够形成结合最稳定的探针。在高浓度电解质（如NaCl）作用下不会凝聚。不同蛋白的适宜pH范围的宽窄大不相同。一般选择最小适宜pH值为最佳pH值。但有些探针的实际情况并不完全如此，最稳定的探针并不完全代表活性最好，这要靠实验验证。 在确定最佳pH值后，最后要确定最小蛋白量，即能够形成稳定探针的蛋白的最小量。如果在制备探针时加入太多的蛋白，不仅造成浪费，而且更为严重的是容易造成探针凝聚，并严重影响标记活性。因为探针溶液中的游离蛋白容易抢先与标记位点结合，起到“封闭”（Blocking）作用，而胶体金探针标记不上。在标记位点希少、被标记物含量较少的情况下要特别注意。 胶体金具有很高的动力学稳定性，在稳定因素不受破坏时自身凝聚极慢，可放置数年不发生凝聚。影响稳定的因素主要有电解质、溶胶浓度、温度、非电解质等。金溶胶必须有少量电解质作稳定剂，但浓度不宜过高。高浓度亲水性非电解质能剥去胶粒外面的水化膜使其凝聚。少量的高分子物质促使溶胶凝聚，但一定量的高分子物质反而可增加溶胶稳定性，如蛋白质、葡萄糖、PEG20000等的加入有良好的稳定效果。. 当金溶胶吸附蛋白质后，溶胶的稳定性随溶液pH而变化，而这种变化又取决于吸附蛋白质的等电点，如ConA，过氧化物酶等，当pH较低时保持稳定，提高pH则显得不稳定，接近等电点或略高时又变得稳定了。标记后的胶体金溶液可用0.2～0.5mg/ml PEG20000 作为稳定剂。在4～10℃贮存数月有效，不宜冰冻。贮存中可能会发生程度不同的凝聚，可离心除去。 当今国内有很多胶体金试纸条生产厂商，江浙这一带尤为突出，推荐厂家：苏州快捷康生物技术有限公司。

❷ 纳米金的应用

纳米金的应用相当广泛，涉及到很多领域，简而言之可以概括为：

1.美容护肤

> 祛斑抗衰 > 无痕愈合 > 全效营养导入

❸ 跪求POCT行业大神科普，酶免法，胶体金，凝集法，免疫荧光，比浊法这些方法学的利弊，

比较几种免疫标记技术的异同。
答：根据标记物种类的不同，免疫标记技术可以分为放射免疫分析、酶标记免疫分析、荧光标记免疫分析、化学发光标记免疫分析、胶体金标记免疫分析技术，它们之间具有相同点，也有不同之处，现将其归纳如下。
一、相同点主要包括以下几个方面：
1、均具有高特异性。五种免疫标记技术的免疫技术都是采用抗原抗体反应，而抗原与抗体的结合是一一对应、特异性结合的，故它们都具有非常高的特异性。
2、均具有高灵敏性。由于五种免疫标记技术的标记技术均采用示踪物标记，例如酶、放色性核素、荧光素、胶体金以及致密物质等，当与标本中的相应抗体或抗原反应后，可以不必测定抗原抗体复合物本身，只需测定复合物中的标记物，通过化学或物理的手段使不见的反应放大，转化为可见的、可测知的光、色、电、脉冲等信号，并可借助仪器精密测定，从而间接测出微量的抗原或抗体。
3、检测对象相同。除了放射免疫技术只能检测抗原外，其他四种免疫标记技术均可检测抗原或者抗体，即通过已知抗原(或抗体)特异性结合待测抗体（或抗原），从而定性或定量地测出抗体或抗原。
4、免疫标记的程序基本相同。其包括纯化抗原或抗体、确定标记物质（即决定了最终的检测方式）、进行标记、对标记产物分离纯化和分析鉴定等一系列程序。
二、不同点主要包括以下几个方面：
1、检测原理不一样。首先，酶免疫技术是以酶标记的抗体（或抗原）作为主要试剂，将抗原-抗体反应的特异性和酶催化底物反应高效性和专一性结合起来的一种免疫方法，其对作为标记用的酶具有特定的要求，如活性高、纯度高等；放射免疫标记技术是以放射性同位素作为示踪物的标记免疫测定方法；免疫荧光技术是以荧光素作为标记物与已知的抗体或抗原结合，然后将荧光素标记的抗体作为标准试剂，用于检测和坚定未知的抗原，其对用于标记的荧光素也有特定的要求，如荧光效率高，与蛋白质结合稳定，易于保存等；发光免疫分析技术是将发光分析与免疫反应相结合而建立的一种新型超微量分析技术，它是使用发光剂标记抗体（或抗原），通过发光检测抗原（或抗体）反应的免疫分析方法；免疫胶体金标记技术则是以胶体金作为示踪标记物，而胶体金在碱性环境中带负电荷，与抗体蛋白质分子的正电荷基团因静电而形成牢固结合应用于抗原抗体反应的一种新型免疫检测方法。
2、所采用的标记物不同。由于彼此间免疫标记的原理不一样，故采用的标记物必然存在差异性。荧光免疫技术的标记物为荧光素，一般采用四乙基罗丹明、异硫氨酸荧光素及藻红蛋白等；酶免疫技术的标记物为酶，一般采用辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AP）；放射免疫技术的采用放射性核素标记，一般有131I、125I、14C和3H；发光免疫技术采用化学发光物质来进行标记，常用的化学发光剂有鲁米诺、异鲁米诺以及鲁米诺的衍生物；免疫胶体金技术的标记物为胶体金，，是由金盐被还原成原金后形成的金颗粒悬液，胶体金颗粒大小多在1—100nm。
3、检测所需仪器或方法不同。酶免疫技术通过加酶的底物显色，然后通过酶标检测仪比色来进行检测；放射免疫技术是采用液体闪烁计数仪、晶体闪烁计数仪或X胶片来进行免疫检测；免疫荧光技术则是采用荧光比色计或荧光显微镜来进行分析；发光免疫技术所需仪器为发光分析仪；免疫胶体金技术是通过免疫电竞或斑点免疫金染色法进行检。

❹ 采便器怎么用

采便器里面有液体，采集样本之后里面的液体需要倒掉，不用直接样本放在原来的液体里。

便潜血检测意义：便潜血检测是临床上诊断和检测消化道出血性疾病的重要手段之一，是消化道恶性肿瘤早期诊断的重要筛查指标，现已成为国内外公认的、行之有效的大肠癌筛检技术。

阳性见于各种消化道出血性疾病，如消化性溃疡、胃肠道肿瘤、憩室、息肉、炎症、伤寒、钩虫病、痔疮等。

简介：

便潜血(或隐血)是指消化道少量出血，红细胞被破坏，但粪便外观无异常改变，肉眼和显微镜均不能证实的出血。便潜血检验是用化学检查的方法检测粪便中微量的血红蛋白，主要有化学法和免疫法。

免疫法检测的原理是单克隆抗体标记技术和抗原抗体结合的特异性，如胶体金法、酶联免疫吸附法、免疫斑点法、乳胶凝集法等。与化学法相比，免疫法不受食物和药物干扰，灵敏度与特异性均优于化学法，不易出现假阳性。