凝胶电泳用的什么仪器

❶ 聚丙烯酰氨凝胶电泳的实验材料

一．设备
进行凝胶电泳的装置见图版4。
1）直流电源如果一次进行电泳的管数在20管以内可以用最大电流300毫安的整流器（硅或硒整流器），调压范围0—300伏。
2）电泳装置包括二个缓冲液槽和电泳 管。液槽可以用玻璃或塑料制成，在底部钻孔。插入电泳管，用有孔橡皮塞固定。电泳管选用孔径均匀一致的玻璃管切制。长10厘米，内径 ^5毫米。脱色用玻璃管长10厘米，内径8毫米。底部稍拉尖，用半透膜及橡皮圈套住底部。
3）凝胶管架灌装凝胶管时使管保持垂直位置，用有机玻璃制成。
二．操作方法
1）凝胶管的制备将电泳玻管用小橡皮塞塞住底部，然后灌入新配的凝胶溶液（方法见下文）。每管加至液体高度为7．5厘米。为了保证凝胶表面平整可用注射器通过细针头小心地加一层（高约1厘米）蒸馏水于表面上，勿使与凝胶液混合，室温放置。如果条件合适溶液于 30—60分钟内聚合而成凝胶。凝胶溶液的配制方法如下：溶液甲：丙烯酰胺（氯仿重结晶）25克，双体（甲醇重结晶）1克，加水配成100毫升溶液。必要时用三羟甲基氨基甲烷调pH至7．0。溶液乙：二甲氨基丙腈l毫升，三羟甲基氨基甲烷0．85克（也可用0．625克氨三乙醇或氨乙醇）加水至100毫升。溶液丙：K3Fe(cN)6分析纯0．075克，加水至100毫升新配。用作阻聚剂以延缓凝聚时间。使操作方便，如凝聚时间已足够长可以用蒸馏水代替。溶液丁：过硫酸铵（二级）2．8克加水至 100毫升新配。必要时用氨水调pH至7．0 c， 溶液甲及乙配后可在冰箱中保存数月。溶液丙及丁用时新配。临用前将溶液甲、乙、丙、丁等量混合。
2）准备把已灌装凝胶的玻管通过有孔椽皮塞安装在上面液槽的底孔中，在上下两槽内分别注入缓冲液。装上后电泳管下端应浸没在下槽的缓冲液中，管下端勿留气泡。血清电泳可以用巴比妥缓冲液pH一8．6，离子强度0．05（配法：巴比妥钠10．3克，二乙基巴比土酸1．84克，加水至1升，温热使溶。加硫柳汞0．1克防霉）。
3）加样在资料介绍的方法中，一般还在了这一步。在血清样品中加入少量蔗糖以增加密度，用血红蛋白吸管直接小心地加在凝胶表面上，加样量一般为7微升血清。如果在样品中混入少量溴酚兰指示剂就可以在电泳过程中观察前沿移动的情况。
4）电泳在二液槽中安放铂金丝电极；正极在下，负极在上。接通电源进行电泳，电场强度10伏/厘米左右，视室温高低而定。室温较高时宜用较低的电压以免发热过度影响分离。蛋白质向正极移动。侍染料前沿移动至管底近处，停止电流。电泳时间为1一2小时。电泳完毕取下凝胶管，用细长针头沿管壁注蒸馏水，使凝胶与管壁剥开。然后用橡皮球压出凝胶条。
5）染色及脱色电泳后的凝胶条在1%氨基黑10B在7%醋酸溶液中固定并染色1小时以上。染色后的凝胶条用7%醋酸洗涤数次。置于脱色玻管中，在同一电泳装置中电解脱色。此时改用7%醋酸充装在液槽中。通电后过剩凝胶之上再加一层大孔凝胶，样品聚合在最后的另一层凝胶中（图2）。在我们的试验中省略的染料泳向正极。脱色时电场强度25伏/厘米，电流10—1 5毫安/管。3—4小时脱色完毕。增高电压可以加速脱色。有色的醋酸溶液通过盛有活性炭的漏斗过滤，即可除去染料，重新使用。
6）保存与记录脱色后的凝胶可以装在盛有7%醋酸的有塞试管中保存数年。也可以自然干燥后保存，在需要观察时再浸在7%醋酸中溶胀成原来形状。记录可以用照相摄影。也可以用光密度计进行捕记。光密度计的分辨力决定于其狭缝宽窄及光电管放大倍数。
三、实验结果
1．电泳条件的选择
为了选择血清蛋白电泳较合适的条件，我们分别对单体浓度、双体浓度、配制凝胶时所用不同正离子、各种电压、二甲氨基丙腈的浓度、过硫酸铵的浓度等条件进行了试验。根据以上试验结果，我们在分离血清蛋白时选用的条件是：单体浓度6.25-6.5%，双体占总丙烯酰胺量的4—5%，正离子采用三羟甲基氨基甲烷，二甲氨基丙腈及过硫酸铵浓度分别为0.25%及0.7%。电泳电压以7—10伏/厘米较为合适。但电泳时间较长，约2—3小时，室温低时可以电压稍高。如果室温较高则可以在冰箱中进行电泳。
2．人血清及其酒精分划部分的凝胶电泳
采用上述条件我们进行了正常人血清的凝胶电泳。一般可以分成15—20条区带。我们也根据RaFmand介绍的两向电泳方法比较了纸电泳和凝胶电泳各区带的相对关系。纸电泳上的a：区带在凝胶电泳中可被分离成10条以上区带。但纸电泳中d，区带的一部分则与凝胶电泳中自蛋白区带相重合。二种电泳方法所得的图谱见图版9。在正常人血清中后白蛋白（PA）、转铁蛋白(Tr）和触珠蛋白（HP）均有不同的型， 一例骨髓瘤病人血清的和凝胶电泳自由电泳图谱的比较见图版11、12。我们也比较了酒精分划人血浆各部分的纸电泳和凝胶电泳图谱，结果见图版13。从图中可见在纸上电泳检定时看来较纯晦白蛋白和丙种球蛋白部分，在凝胶电泳中可见明显的其他蛋白区带。
3．放射病狗血清蛋白电泳的观察 放射病动物血清蛋白的改变可以在纸电泳中观察到。一般认为狗在照射后吻球蛋白有增高。用凝胶电泳观察可以得到更深入的资 料。正常狗血清的凝胶电泳图谱大致与人相 似。狗受致死量照射后第九天有明 显变化，至极期时则可以观察到鸭、Tr、融及 sp等区带有明显增高。我们用胎3—10型光 谱仪用光密度计将电泳图谱进行了扫描，所得 结果见图3，图版14。由于仪器的限制光缝 最小只能达到0．5毫米，从而影响了其分辨力。但与正常血清对比可以见到其改变的情况，这 远比纸电泳中所见更为明显。我们认为如果联 系临床表现对变化的本质进行一些研究，将有 助于了解放射病极期来到前后体内蛋白质代谢的一些情况。
4．在分离正常人尿DNase时的凝胶电泳 观察 用葡聚糖凝胶分离人尿中DNase时可以除去大部分其他蛋白质和杂质。但分离所得的制品用凝胶电泳观察还可以见到五条以上的蛋白质区带（见图版14）。将凝胶条在未染色前置于含大分子DNA的琼脂平板上，在37c’温箱中保温2—3小时，再用5%三氯醋酸加至如此处理过的琼脂板上，可以看到乳白色本底上出现被酶水解后的透明斑点。将凝胶条用氨黑染色后显示其蛋白区带的位置。二者比较就可以确定具有酶活性的成分的相应电泳位置。我们的试验中观察到人尿DNase在凝胶电泳中至少被分离成二条以上有酶活性的区带。说明有同功酶的可能。应用这一方法可以较深人地观察体液中酶的情况。同时也说明可以用凝胶电泳来指示生物制剂制备过程中纯化的情况。
四、结 论
本文介绍了聚丙烯酰胺凝胶电泳的一些初步实验条件和实验结果，并与纸电泳、自由电泳等进行了对比。从结果中可以看到聚丙烯酰胺凝胶电泳的分辨力较强，重演性良好。它在临床生化分析及生物活性物质的分离、制备中和纯度鉴定中具有较广泛应用的可能性。

❷ 做电泳实验必须要知道的基础知识

＊样品制备

样品必须完全溶解于上样缓冲液，否则不能在凝胶中移动。样品太浓可能产生假相。

样品缓冲液包含盐类（维持样品）、甘油（增加重量从而使样品下沉至点样孔）、以及示踪染料（以便监测电泳进程）。

样品缓冲液可以分装成小部分冻存。

缓冲液加到凝胶上之后才能点样。

样品缓冲液中的示踪染料可以指示什么时候终止电泳。两种最常用的染料是漠酚蓝(BPB) 与二甲基苯青FF 。

＊标准分子质量

标准分子质量应同时电泳，用来检测电泳进展以及分析结果。

使用相适应的标准分子质量。

胶连同分子质量标准物一起拍照。标上各条带的大小。

标准分子质量有带标记的与不带标记的两种。标记可以是荧光、发光体或者放射性元素。如果手边没有带标记的标准物，可以将染色后的胶与事后标记的印迹相比较。

在每一块胶的同一泳道点上标准物。把标准物加在第一个泳道，就能知道胶的方向。

点上正对照与负对照。

＊样式

琼脂糖凝胶一般以水平方向进行电泳，而聚丙烯酰胺凝胶则是以垂直方向进行电泳。潜水型胶是一种水平方向胶，凝胶被浸淹在电泳槽的底部。

凝胶可以制成多种大小。测序胶必须制成大胶，但是对于大多筛选与转移用胶，甚至包括双向凝胶来说，只要不是把分子量相近的条带区分割，小型胶就可以了。

毛细管电泳利用开口狭小的毛细管来进行DNA 、蛋白质和其他小分子的自动高效分离。分离是与检测分析相连，就像色谱仪器一样。只有专门实验室才有毛细管电泳设备。

＊凝胶

聚丙烯酰胺VS

琼脂糖。尽管凝胶电泳可以在滤纸、醋酸纤维素、淀粉或者其他基质上进行，大多数研究者还是只采用聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶。两种都是多孔性胶，像分子筛样起作用（聚丙烯酰胺或者琼脂糖的百分比越高孔越小）。理论上，任何一种都可以用来分离DNA

、RNA 或者蛋白质。但是，聚丙烯酰胺在低百分比浓度时很软，难以用手操作。一般采用高百分比浓度，用以分析蛋白质和小核苷酸。

低百分比琼脂糖凝胶相对较硬，易于操作，用来分离目的分子，如DNA和RNA或者巨大的蛋白质和蛋白质复体。

胶的浓度必须与片断大小相适应。

每次切去胶的同一小角。这样，万一胶掉落、翻转或在转移过程中放置凝胶，都能给定位做参考。

＊缓冲液

大多数电泳缓冲液配成高浓度母液，在电泳前稀释。

每一种缓冲液在某一电流时会有特定的电压。要认识每一种缓冲液的特性，这样，出错时，就马上可以注意到。

＊电源

电源输出有几种模式：稳压(mV) 、稳流（安培，或者简称安）以及稳功率（瓦特，瓦） 。许多型号允许设定程序，在各种模式之间自动转换。这样可以使用最佳的电压（ 在电泳过程中可能发生变化）同时不超出容量。

不是所有的电源输出装置都相同，所以不能简单地将电泳装置接到任意装置上。要清楚你需要什么电流或者电压，然后找出需要的装置。

大多数实验室都有不止一个电源装置用于测序胶（要求高电压）、电泳转移（要求高电流）以及用于琼脂糖和聚丙烯酰胺电泳（使用大范围的电压）的装置。很少有电源装置能同时满足所有的要求。

变性蛋白胶与DNA和RNA胶中的样品会从负极（阴极）移到正极（阳极） 。用红色导线接正极（＋），黑色导线接负极（一）。可以用同一个电源输出装置同时进行几块胶的电泳，但是没问过其他人前不要这样做，因为电泳条件会发生变化。

设置闹钟提醒自己察看胶。特别是当你要察看低分子质量的分子时，样品很容易跑出胶进入缓冲液中。

接触任何东西前，确信电泳装置必须处于断电状态。如果电源没被切断，不要进行任何操作！

电流效应

         电流（mA）效应

交流电直流电

≤15没有感觉

1~8 电击感觉， 不疼

8~15 疼痛性电击，个别人可以摆脱紧握

15~2075肌肉控制丧失，不能摆脱紧握

20~50 肌肉收缩，呼吸困难

50~100300~500可能会出现心室纤维颤动

100~200 心室纤维颤动

≥200 严重灼伤，肌肉收缩严重以致心跳停止

＊固定

凝胶是否需要固定取决于用途。需要染色的胶一般需要固定，而用于转移的胶则不需要固定。

＊干燥

通过出去胶上的水，胶基质变薄。干燥之后的胶在放射自显影后条带更清晰。

在凝胶干燥仪上干燥一块胶不需1小时。凝胶干燥仪可以加热，从而加快干燥过程。

＊染色

DNA与RNA的染色可以通过在电泳前把染料加到样品中完成，也可以在事后染色。

蛋白质胶在电泳后染色。

＊记录

凝胶经溴化乙锭染色后的Polaroid照片与蛋白质凝胶的35 mm照片是最常用的记录方式。

数字记录与分析系统最常使用，所有数据可以直接用来演示。

各种转移的记录方式取决于体系与实验。例如，放射自显影与化学发光结果可以记录在X射线胶片上，而信号可用光密度计定量。

＊确定分子质量

蛋白质的分子质量可用SDS-PAGE确定，而DNA与RNA的分子质量可以由琼脂糖凝胶电泳来确定。对某一分子而言，其分子质量的对数与其Rf（相对迁移距离）存在线性关系。以标准物的迁移距离对其分子质量的对数作图，得到标准曲线，而样品的Rf 值一也就是分子质量一可以由图外推得到。

1.制胶，胶的浓度应最适宜分离分子质量相近的分子。同时电泳分子质量标准物，其范围涵盖有目的分子的大致大小。

2.跑胶，防止染料前沿跑出胶的边际。

3.胶染色，拍照。如果样品是放射性标记的，你可以使用放射性标记的标准物或者把胶与放射自显影胶片相比较。4.测定从样品孔到每一标准条带的距离。计算每个数值的对数，画到常规图纸的Y 轴上。X 轴上是迁移的距离（以厘米计最方便）。对大多数标准物条带应该得到一条盲线。

5.把样品迁移距离画到图上。外推标准曲线，确定分子质量。

❸ 电泳槽和电泳仪的区别

电泳槽是凝胶电泳系统的核心部分，其系统的迅猛发展主要也是体现在电泳槽上。根据电泳的原理，凝胶都是放在两个缓冲腔之间，电场通过凝胶连接两个缓冲腔。缓冲液和凝胶之问的接触可以是直接的液体接触，也可以间接通过凝胶条或滤纸条。管状凝胶电泳和垂直板状电泳大多采取直接液体接触方式。这种方式可以有效地使用电场，但在装置设计上有一些困难，如液体泄漏，电安全和操作麻烦等问题。水平板状电泳槽大多通过间接方式，用滤纸桥搭接。
电泳槽和电泳仪合用才能进行电泳实验。电泳槽是用来制备凝胶，进行电泳的主要场所。电泳仪主要是用来提供电流，产生电场力带动分子运动的。电泳槽是装（涂料）容器，电泳的工作仪器。电泳仪是提供（电泳）电压的设备。

❹ 跑电泳除了凝胶成像仪还有什么可以拍照的

BIO－RAD凝胶电泳成像系统的操作方法

1. 接通电源和照相机电源

2. 2.打开开关，预热30分钟

3. 3.打开，文件菜单中gel-doc.xr

4. 4.按live/focus,30s后按autoexpose or manualexpose

5. 5.调iris,zoom ,focus调节图像清晰度，之后按freeze拍照，保存。

BIO-RAD 凝胶成像系统 Universal Hood Ⅱ

仪器性能：

拍摄对象：核酸琼脂糖凝胶电泳

X光胶片

功能：获取并处理图像

测定图像光密度

操作步骤：

1. 开启成像系统，电脑电源

2. 打开Quality One，调整光源所示图像

3. 观察并调整曝光时间，获得图像并保存

4. 调整图像，并对图像进行光密度分析

5. 关闭所有电源

❺ 毛细管电泳法的特点;优点

1、电泳柱效更高，可达105m-1～106m-1，分离速度更快，在几十秒至几十分钟内即可完成一个试样的分析。

2、溶剂和试样消耗极少，试样用量仅为纳升级。

3、没有高压泵输液，因此仪器成本更低。

4、通过改变操作模式和缓冲溶液的成分，毛细管电泳有很大的选择性，可以对性质不同的各种分离对象进行有效的分离。

毛细管电泳法使用注意事项

对于实验结果的可靠性和重现性，毛细管的冲洗起到了至关重要的作用，每一次冲洗都必须认真地完成，冲洗时间不允许缩短或者不冲洗。

将实验做完以后一定要使用水对毛细管进行冲洗，不然毛细管可能会被堵塞,使得实验结果受到严重地影响，希望引起足够的重视。

在对毛细管进行冲洗的时候，不要将电压加在毛细管上，讲义上给定的工作电压不允许更改，也不建议对进样时间加以改变。

以上内容参考网络-毛细管电泳法

❻ 分子生物学检验技术常用的仪器有哪些以及如何使用

高速离心机（10000r
/min以上），PCR仪，凝胶电泳系统，其他实验室常规仪器。
使用的话，离心机和电泳仪上面的按钮很少，看到就会了。PCR现在多是触屏的可视化设置，知道PCR原理的话，看到仪器也会用的。
如果楼主是要应付考试，可以去图书馆找分子生物学实验技术指南之类的书，或者分子克隆，这个是分子生物学最权威的操作手册。
至于分子生物学检验的话，就要看你是做哪方面的检验，但是这些基本的仪器是必须的，只要和分子生物学有关。现在应用比较多的可能是生物芯片，这个是生物技术公司的产品，有说明书的。

❼ 核酸电泳方法

带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。核酸电泳是进行核酸研究的重要手段，是核酸探针、核酸扩增和序列分析等技术所不可或缺的组成部分。核酸电泳通常在琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶中进行，浓度不同的琼脂糖和聚丙烯酰胺可形成分子筛网孔大小不同的凝胶，可用于分离不同分子量的核酸片段。

中文名
核酸电泳
外文名
Nucleic Acid Electrophoresis
学科
分子生物学
概念简介

凝胶电泳操作简便、快速，可以分辨用其它方法(如密度梯度离心)所无法分离的核酸片段，是分离、鉴定和纯化核酸的一种常用方法。

分类
琼脂糖凝胶电泳

1.原理琼脂糖是从海藻中提取出来的一种线状高聚物。将琼脂糖在所需缓冲液中加热熔化成清澈、透明的溶胶，然后倒入胶模中，凝固后将形成一种固体基质，其密度取决于琼脂糖的浓度。

将凝胶置电场中，在中性pH值下带电荷的核酸通过凝胶网孔向阳极迁移，迁移速率受到核酸的分子大小、构象、琼脂糖浓度、所加电压、电场、电泳缓冲液、嵌入染料的量等因素影响。在不同条件下电泳适当时间后，大小、构象不同的核酸片段将处在凝胶不同位置上，从而达到分离的目的。琼脂糖凝胶的分离范围较广，用各种浓度的琼脂糖凝胶可分离长度为200bp至50kb的DNA。

2.琼脂糖凝胶电泳的仪器及试剂仪器设备应包括水平凝胶电泳槽及其配套电泳梳、稳压电泳仪、微波炉或普通电炉。同时配备紫外线检测仪和照相系统。

试剂包括琼脂糖、电泳缓冲液、溴化乙锭溶液、凝胶加样缓冲液。

电泳缓冲液常用TBE(1 000ml中含5.4g Tris，2.75g硼酸，2ml 0.5 mol/L EDTA，pH8.0)。

溴化乙锭(ethidium bromide，EB)是一种荧光染料，它可以嵌入核酸双链的配对碱基之间，在电泳过程中随核酸片段迁移，将凝胶置紫外光下，插入核酸链中的EB在紫外线激发下产生红色荧光，可清楚显示各核酸片段的迁移。EB见光易分解，应存棕色试剂瓶中于4℃下保存。由于 EB是一种强的诱变剂并有中度毒性，使用时必须戴手套操作

❽ 双向聚丙基凝胶电泳能分离氨基酸吗如何分离氨基酸，和鉴别氨基酸的含量用到哪些仪器

双向PAGE分不了，因为第二向的SDS-PAGE分离孔径根本不能达到分离氨基酸的要求。

分离氨基酸和鉴别的方法可以用到，纸电泳，液相， 全自动氨基酸分析仪。我知道的就这几个，纸电泳用到的设备最简单便宜，其他的你看名字，你懂的。希望能够帮助你。
还有一点补充，如果是特殊氨基酸的话可以根据其本身性质分析，但那些都是特例了，作为分析化学的一种手段，不是我们做生化试验的常用套路了。

❾ 电泳这么做生物工程方面的电泳有没有具体步骤谢谢

电泳（Electrophoresis）是指带电荷的粒子或分子在电场中移动的现象称为电泳。大分子的蛋白质，多肽，病毒粒子，甚至细胞或小分子的氨基酸，核苷等在电场中都可作定向泳动.1937年Tis

elius成功地研制了界面电泳仪进行血清蛋白电泳，它是在一U型管的自由溶液中进行的，电泳后用光学系统使各种蛋白所形成折光率差别成为曲线图象，将血清蛋白分为白蛋白，α1-球蛋白，α2-球蛋白，β-球蛋白和γ-球蛋白五种，随后，Wielamd 和Kanig 等于1948年采用滤纸条做载体，成功地进行了纸上电泳。从那时起，电泳技术逐渐被人们所接受并予以重视，继而发展以滤纸，各种纤维素粉，淀粉凝胶，琼脂和琼脂糖凝胶，醋酸纤维素薄膜，聚丙烯酰胺凝胶等为载体，结合增染试剂如银氨染色，考马斯亮蓝等大大提高和促进生物样品着色与分辨能力，此外电泳分离和免疫反应相结合，使分辨率不断朝着微量和超微量（1ng～0.001ng）水平发展，从而使电泳技术获得迅速推广和应用。
目前所采用的电泳方法，大致可分为3类：显微电泳，自由界面电泳和区带电泳.区带电泳应用广泛，区带电泳可分为以下几种类型：
按支持物的物理性状不同，区带电泳可分为：
（1）滤纸为支持物的纸电泳;
（2）粉末电泳：如纤维素粉，淀粉，玻璃粉电泳；
（3）凝胶电泳：如琼脂，琼脂糖，硅胶，淀粉胶，聚丙烯酰胺凝胶电泳；
（4）缘线电泳：如尼龙丝，人造丝电泳
2．按支持物的装置形式不同，区带电泳可分为：
（1）平板式电泳：支持物水平放置，是最常用的电泳方式；
（2）垂直板电泳：聚丙烯酰胺凝胶可做成垂直板式电泳。
（3）柱状（管状）电泳：聚丙烯酰胺凝胶可灌入适当的电泳管中做成管状电泳.
3．按pH的连续性不同，区带电泳可分为：
（1）连续pH电泳：如纸电泳，醋酸纤维素薄膜电泳;
（2）非连续pH电泳：如聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳；
电泳所需的仪器

电泳所需的仪器有：电泳槽和电源。
1．电泳槽
电泳槽是电泳系统的核心部分，根据电泳的原理，电泳支持物都是放在两个缓冲液之间，电场通过电泳支持物连接两个缓冲液，不同电泳采用不同的电泳槽.常用的电泳槽有：
（1）圆盘电泳槽：有上，下两个电泳槽和带有铂金电极的盖。上槽中具有若干孔，孔不用时，用硅橡皮塞塞住.要用的孔配以可插电泳管（玻璃管）的硅橡皮塞。电泳管的内径早期为5～7mm，为保证冷却和微量化，现在则越来越细.
（2）垂直板电泳槽：垂直板电泳槽的基本原理和结构与圆盘电泳槽基本相同。差别只在于制胶和电泳不在电泳管中，而是在块垂直放置的平行玻璃板中间.
（3）水平电泳槽：水平电泳槽的形状各异，但结构大致相同。一般包括电泳槽基座，冷却板和电极.
电源
要使荷电的生物大分子在电场中泳动，必须加电场，且电泳的分辨率和电泳速度与电泳时的电参数密切相关。不同的电泳技术需要不同的电压，电流和功率范围，所以选择电源主要根据电泳技术的需要.如聚丙烯酰胺凝胶电泳和SDS电泳需要200～600V电压。
http://ke..com/view/25110.htm?fr=aladdin