Ⅰ 岛津液相LC-20AT的压力问题
首先看看显示的压力,甲醇做流动相,250mm的C18柱一般压力在7左右,如果压力异常偏高,就是哪里堵住了,可以一段段排查,先把柱子卸下来,如果压力马上下降说明色谱柱赌了,可以这样排查。
Ⅱ 岛津的高效液相色谱色谱仪用了一年了,重复性现在不是很好,什么原因
有色友经常反映说,样品或者标品的重现性不好,下面本人根据自己的经验把原因和处理方式给大家分享一下。
不要笼统说重现性不好,要细分两种情况:单独样品重现性不好;样品和标品的重现性不好。
(一)如果单是样品的重现性不好而标品的重现性可以的话,原因比较容易分析。问题可能出现在样品本身上。
1)样品降解或者分解,当你的样品在稀释液中不稳定,这种情况是很有可能发生的。解决办法:改变稀释溶液,要是遇水
分解的流动相中不能有水,必要时还等改用正向色谱。
2)样品溶解时间不足。比如当你进第一针时候假设样品溶解率为90%,后一针为95%,以后随着时间延长而增加,这样
你重现性肯定不好。这种情况的判定比较简单,不要肉眼看容量品是否有不容物,你的眼睛没有那么高的分辨率,只要把
容量瓶超声一下,看看超声前后的对比就可以判断。如果是这种问题,解决方法简单,在处理样品时加入少量的易容溶
剂,超声5秒左右,再用你的稀释液定容,一般就可以解决。
3)样品称量问题。当你做同一容量瓶的样品取得很好的重现,而在同一样品不同容量瓶中存在重现不好的情况。可能就是
你的称量中出了问题。具体哪里的问题,我没有肯定的答案,但是可以肯定的是,你必须要重新称量,并复检,按着要求
可是要加倍复检的,所以每次称量你都必须小心。此外,还可能是容量瓶本身不准,不过这个可能性比较小,建议用
100ml容量瓶。因为容量瓶越小误差越大,这点我做过验证的,在国内可以作为“真理”。真理就不要在耗时费事验证
了。
(二)样品和标准品同时出现重现性不好的情况。
这种情况比上一种可能要稍微复杂一些。但是也比较好分析。
首先,不要笼统说重现性不好。也有两种情况,一是保留时间较好,只是响应值不好;二是两者都不好。
如果是第一种情况,请参考(一)中的分析,这里不赘述。
如果保留时间和响应值都不好可能的原因如下:
1)柱温的影响。柱子温度和保留时间的关系,一般是反向的,即柱温越高保留时间越短,反之亦然。但是柱温不仅会对保
留时间有影响,还会影响响应值也就是峰面积。一般来讲保留时间提起会使峰宽变小和峰高变大,但他们两者的对于峰面
积的作用一般不会正好抵消,也就是说面积有所变化的。所以,柱温箱是必要的。如果你还没有赶快和老板说,如果不给
买,就说是我说的。哈哈!
2)流速和柱压的问题。首先要知道在液相色谱中是用流速控制柱压的,流速你要设定的,而柱压是配合你的流速仪器自行
控制的。柱压是流速的因,流速是柱压的果。当你系统正常运行时突然柱压降低,这个时候流速会突然降低,样品的保留
时间会延后,当然也就造成重现性的不好了。还有柱压波动较大的时候,也不会有好的重现性(保留时间和响应值)。
的。
3)其他比较少见的情况。灯的能量不足。表现为,保留时间可以,但是响应值逐渐降低。解决办法:换灯。说实在的这种
情况比较少见,至少我没有遇到过。有些色友在分析类似的问题时上来就说人家的灯可能不行了,我觉得这是很站不住脚
的一种说法。首先氘灯的平均使用寿命为3000小时,每天8小时的话可以用375天(一年半使用时间),也就是说这种情
况如果成立的可能性为1/375,而且未必成立。其次,一般仪器开机时都有自检的(国产仪器我不清楚,至少waters和
agilent是有的),自检通过了一般工作1天是一点问题都没有的。我曾经在自检初次通不过情况下使用半月也没有问题
(一次不通过,关机,停一会再开机)。第三,我认为灯能量的衰减速度是随着你灯能量降低而降低的。这个是我个人的
观点。好比100元的股票每天跌10%,第一天下跌10元,第十天下跌多少我就不算了,反正比10元少很多。扯远了,这
个观点套用到这里就是,灯的能量低事实,不支持短短一天时间内重现性不好这个现象,也可以近似说等能量低与检测重
现性不好无关。看似比较矛盾,我的论据在反对我的论点。但是我想这就是我的态度,因为这种情况我没有遇到过,而我
推论也仅仅是推论,加之有的色友一再强调,未免心虚,故而矛盾一把吧。
Ⅲ 岛津高效液相最小进样量和最大进样量是多少
最大进样量和最小进样量的问题要看你的仪器。
如果是手动进样,那么定量环就是最大进样量。一般是20ul,最小最好不低于定量环的一半,就是10ul。不过定量环是可以换的。50ul,100ul,都可以。跟厂家购买就行了。
如果是自动进样,那么可调节性就很强了。最小的2ul、5ul,最大的50ul,100ul都可以。不过有一点,你要保证进样量和浓度配合,峰面积不超载。就是说,我打了一针之后不出现平头峰。
关于流速的问题,一般来说0.5ml/min-2ml/min的流速都比较常见。
不过一个要看你的流动相。如果你的流动相当中有盐,最好流速不要太低,会导致盐析的。
一个要看你的柱压。其实岛津的液相流速开到5ml/min也不是问题。不过你的色谱柱未必能承受得住。一般的反相色谱柱(C18、C8、苯基柱),柱压最好都不要超过20MPa。太高的柱压会加速色谱柱老化。
还有流速要看你的样品跑的情况了。一般来说,你的色谱峰要保证都分开,流速太快可能就分的不好了。而且保留时间上面也有问题,最好在5min之后。因为色谱柱还有一个死体积。太快出峰可能物质在色谱柱当中没有保留。这个具体实验的时候可以自己掌握。
Ⅳ 岛津高效液相色谱仪仪器开机压力超大,怎么办
建议你把色谱柱卸下来开机试一下,如果色谱柱卸下来开机压力也高,就说明仪器那里有点堵了。如果不是,就是色谱柱的问题。
氘灯的使用时间,与压力没有关系。
色谱问题建议你去“生化色谱网”去看看。这个网站非常专业。
Ⅳ 岛津液相基线不稳,怎么回事
1、可能是还没有平衡。一般更换色谱柱、流动相之后,系统需要一段时间平衡。大约30-60min左右。有时候系统里面有缓冲盐,那么平衡时间可能就更长了。等过了那个时间就好了。当然,这是针对等度条件说的。如果是梯度洗脱,那么基线肯定是会有变化的。这个在情理之中的。
2、流动相不干净。色谱仪器需要用色谱纯,如果是反相体系,那么水应该是超纯水,如果用到无机盐,那么需要用0.45um或者0.22um的滤膜过滤才行。如果用的是国产的甲醇乙腈,那就换一下吧。
3、氘灯寿命过长。一般岛津的氘灯可以使用2000个小时,但是寿命到了之后它不会坏掉,实验员也就继续使用了。但事实上在氘灯到了寿命之后,它检测样品的线性就会不好,而且在基线会不稳。这种情况在低波长下尤其明显。这个解决方法就只能是更换到等了。
4、其他的实验原因。这个我没办法一一给你说明。比如实验室的温度不稳定。那么对基线肯定是会有影响的。比如在示差检测器里面,那么温度的影响就会相当大。再比如在线脱气,如果流动相是在线混合,那么基线很有可能不稳定。方法也很简单,手混过滤就好了。这个需要具体问题具体分析。
Ⅵ 岛津液相色谱仪的问题。
目前液相色谱只有极少数可以用超纯水冲洗,一般的C8和C18柱都不能用纯水冲水,即使是说明书说可以用超纯水清洗,也不益这么做,这样易造成填料坍塌。泵压高,这是很正常,但不建议用大流量冲冼,一般情况不能超过泵能承受的压力,比泵的最高承受压力低10Mpa。即使用纯的甲醇和乙腈,虽压力不会过线,但最好不要这样用,因为这样容易造成柱的填料坍塌,
Ⅶ 岛津液相色谱仪LC-2010A,流动相选用20%甲醇,接两通,2ml/min的流速,压力67。
首先我问一下,你说压力是67,单位是什么?67bar,6.7MPa?这两个是一个数。如果是着两个单位压力有点高。如果是67PSI就不用折腾了。
岛津色谱最爱堵的几个点:
过滤头:就是插在溶剂瓶里的那个。
单向阀:一进一出两个
进样口六通阀
这个没办法,挨个卸下来试一下。不过你先看看你仪器堵的原因。是盐析了?还是微生物堵了,或者是配件老化了。老化了没办法,如果是前两者,不拆也可以挽救一下。
盐析:5%稀硝酸。如果能开温度,最好把温度调高一点。看看能不能把盐溶出来。
微生物:DMF,记得过滤一下,那玩意挺脏的。
从一两个小时再换异丙醇,低流速冲一会儿。异丙醇粘度大可以带出来。
都不行再看配件。过滤头,一拔就下来了。还有单向阀,拿扳手拧就行了。放在5%的甲醇里面超声30min。然后放在纯甲醇里超声10min。记住单向阀,一定要有方向的放着。就是说它在仪器上是大头朝上的就朝上超声,它是大头朝下的就朝下超声。
六通阀,我不建议你自己拆卸。首先,零配件太多,再有,重装可能会影响密封性。如果拆的话也不太好讲。就是怎么拆的怎么装呗。岛津的说明书上有六通的进出口方向,可以试一下。有可能是样品不干净,没过滤。里面的不溶性微粒堵住了。那就打开六通。它可能是堵在了哪个管路里,或者是堵住六通进出的口上了。
Ⅷ 岛津SIL30压力高什么原因,0.5的流速,压力在9MPA,不接色谱柱的情况下
咨询记录 · 回答于2021-08-05
Ⅸ 怎么挑选岛津液相色谱质谱联用仪
GYE99油色谱测试仪
油色谱分析仪是以气体为流动相(载气)。当样品由微量注射器“注射”进入进样器后被 载气携带进入填充柱或毛细管色谱仪。由于样品中各组份在色谱仪中的流动相(气相)和固定相(液相或固相)间分配或吸附系数的差异,在载气的冲洗下,各组份 在两相间作反复多次分配,使各组织在柱中得到分离,使各组份在柱中得到分离,然后用接在柱后的检测器根据组份的物理化学特性,将各组份按顺序检测出来。油色谱分析仪就是根据上述原理制造的分析仪器。
油色谱分析仪由流量控制部件、进样器、色谱柱箱、检测器、温控及检测器电路部件、色谱工作站等部分组成。 基型仪器中部是色谱柱箱,右侧上部是微机温度控制器,右侧下部是FID微电流放大器,仪器左部是流量控制部件及气路面板,柱箱上方右部是离子化检测器安装 位置(基型安装二个火焰离子化检测器)以及热导池检测器(TCD)安装位置,柱箱上方左部是双填充柱进样器或毛细管进样器。
Ⅹ 岛津高效液相色谱仪压力过大是怎么回事
流速过大、流动相粘度过大、色谱系统堵塞都可能压力过大。