做逆转录的仪器叫什么

『壹』 逆转录PCR的实验步骤用到哪些试剂和仪器

• 一、实验器具与材料：

• 1、移液器：1ml、200μl、20μl、10μl、2μl

• 2、吸头：1ml、200μl、20μl

• 3、匀浆管：5ml

• 4、吸头台：放置1ml吸头的一个，放置20μl吸头的一个

• 5、EP管：1.5ml、0.2ml、100μl

• 6、试剂瓶：2个60ml的棕色试剂瓶（广口，带盖）；1个125ml的白色试剂瓶（放无水乙醇）

• 7、量筒：50ml、250ml、500ml

• 8、容量瓶：250ml、500ml、1000ml

• 9、试管架：5ml、1.5ml、20μl

• 10、盐水瓶：250ml、500ml各2个备用，一个装无水乙醇，另一个装DEPC水

• 11、铝制饭盒：4个

• 12、塑料小饭盒：1个

• 13、大瓷缸：2个

• 14、锡泊纸：一卷

• 15、卷纸：2卷

• 16、三角烧瓶：带盖，稍大

• 二、实验器具的处理与准备

• 1、塑料制品：（包括枪头、EP管、匀浆管等）

• 先将DEPC水从容量瓶中倒入瓷缸中，将塑料制品逐个浸泡其中，其中小枪头需要吸管打入DEPC水，过夜，然后高压，再烤干备用，实验前将枪头等放入吸头台，再高压一次（EP管）

• 2、玻璃制品：泡酸过夜，冲洗干净，蒙锡纸烤干备用（DEPC水泡）（洗净后先泡1‰DEPC过夜，再烤干）

• 3、匀浆器：（包括剪刀、镊子）先洗净后，再高压（不需要泡DEPC）

• 三、试剂配制：

• 1、DEPC水：吸出1ml放在1000ml双蒸水中配成1‰DEPC水，放在1000ml容量瓶中静置4小时备用。

• 2、75%乙醇：用无水乙醇DEPC水配，然后放-20℃保存（其中DEPC水需先高压）

• 3、异丙醇：放入棕色瓶中

• 4、氯仿：放入棕色瓶中

• 5、琼脂糖

• 仅供参考

『贰』 RNA转录为cDNA的试剂盒有哪几种，优缺点各是什么

说白啦，你就是要逆转录试剂盒啦。每个课题组用的都不一样，我们课题组用的比较多的是OneShine™First Strand cDNA Synthesis Kit。给你发下说明吧。

手指轻微弹震PCR管以混匀体系，若液体溅到盖子内壁上则短暂低速离心使其下沉入管底。

3．把经过2处理后的PCR管放入PCR仪中，如果使用Oligo (dT)18Primer或gene specific Primer，则设置反应程序为42℃ 60 min，若使用Random Hexamer Primer，则设置反应程序为37℃ 60 min。

4．85℃ 5 min即可终止反应。

III注意事项

1. 试剂应储存在-20℃。

2. 合成的第一链cDNA可马上用于第二链的合成、PCR、qPCR或线性RNA的扩增，若要长期保存则建议置于-70℃以下。

3. M-MLV 5×Reaction Buffer是一种适配于后续多种实验的酶缓冲液，在进行下一步实验前不需要再用苯酚抽提和乙醇沉淀。

4. cDNA第二链合成的标准操作方法见：Sambrook, J., Fritsch, E. F. and Maniatis, T. (1989) In: Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York, 8.64.

5. 总RNA中必须没有胍盐、多胺、亚精胺、焦磷酸盐、磷酸盐、金属离子、SDS、EDTA、乙醇和苯酚等，因为这些物质可以抑制逆转录酶的活性。

6. 总RNA必须没有DNA污染，可以对总RNA直接进行RT-PCR以验证是否有DNA的污染。也可以设置跨内含子的引物用于后续的RT-PCR实验。可以用DNaseI对总RNA做cDNA第一链合成前的处理，如OneShine DNaseI。DNaseI处理总RNA的标准操作方法见：Wiame, I. et al., Irreversible heat inactivation of DNaseI without RNA degradation, Bio Techniques, 29, 252-256, 2000.

7. cDNA第一链合成实验所用的PCR管、吸头等需用DEPC水处理过，以防止RNase对总RNA的降解。

8. 在进行cDNA第一链的合成实验之前可以对所提取的总RNA进行电泳检测，电泳试剂盒和电泳槽也需用DEPC水配制或重洗,如OneShine DEPC水、OneShine RNase free电泳buffer；电泳的条带中28S和18S的边缘应清晰才表明所提的总RNA质量达到要求。

9. 可以设置不同的Control以证明是否存在影响所研究RNA的实际拷贝数的因素，比如不加模板、不加M-MLV Reverse Transcriptase的阴性Control实验，GAPDH RNA的阳性Control实验等。

10. 在进行后续的RT-PCR时，可以对cDNA第一链进行稀释。

『叁』 荧光定量pcr和实时荧光定量pcr还有反转录pcr都是什么呀有什么区别,分别是什么作用啊

实时就是指每个阶段的荧光都有收集,其实现在所有的荧光定量PCR仪器都是实时的.荧光定量PCR的英文简写是：FQ-PCR,F是荧光的缩写,Q是定量的缩写.（或者写成是RT-PCR.RT就是realtime的缩写）.
做定量PCR的目的是为了了解起始模板数的量,这个一下写不清楚,你看一个说明书绝对看得懂.
而反转录PCR就是把mRNA反转录成cDNA,简写也是RT-PCR.不过和上面的不同!这个RT是reverse transcript的缩写!
其实啊,对于做表达量的实验而言,反转录PCR是荧光定量PCR的第一步,很多人是这么来描述的：RT-qPCR.这个RT就是反转录,这个q是指定量.
总之,自己好好看说明书!

『肆』 要做（mRNA）RT PCR，需要的仪器有哪些

首先，RT不是证明RNA有无表达的很好方法，RT批不出来会有很多原因，并不仅仅是没有模板。建议你做northern。
做RT需要
1，很干净整洁的实验环境，RNA提取对操作环境的要求很高。
2，电动组织分散仪（IKA公司的T10那种）或研钵+液氮或玻璃组织研磨器，以上提取效果递减。
3，1.5ml管冷冻离心机。
4，移液枪1ml、200ul、10ul一套，最好专用。
5，紫外分光光度计、石英狭缝比色皿。
6，核酸电泳仪、电泳槽（电泳槽最好专用）
7，RNase
free的各式枪头、1.5ml离心管；RNase
free的双蒸水。
8，如果样品不会立即进入下一步实验，建议具备超低温冰箱。

『伍』 ABI 7500 PCR仪可以做逆转录吗

可以,只要能够满足精确的温度控制就可以.根据所用逆转录酶的反应温度,选择37C,42C或者50C直接进行逆转录反应就可以了.所以PCR仪没有任何问题的.

『陆』 逆转录的工具

转录所需工具应为DNA解旋酶和RNA聚合酶.翻译所需工具应为tRNA,mRNA是翻译所需的模板.

『柒』 ABI 7500 PCR仪可以做逆转录吗

可以，只要能够满足精确的温度控制就可以。根据所用逆转录酶的反应温度，选择37C,42C或者50C直接进行逆转录反应就可以了。所以PCR仪没有任何问题的。

『捌』 反转录时用水浴锅控制温度好还是pcr仪好

反转录时用水浴锅控制温度好还是pcr仪
水浴锅是实验室常用的恒温设备，水浴锅的液体介质是水，沸点温度通常为100摄氏度。在标准环境下烧开水时，无论烧的火有多大，时间有多长，只要还有水在沸腾，它的温度一定是100度。这样，用水浴锅加热就可以控制一个恒定的温度。
水浴锅主要适用于各大中院校、科研企事业单位的实验室和化验室，数显电子恒温水浴锅广泛位用于干燥、浓缩，蒸馏、浸渍化学试剂，浸渍药品和生物制品，也可用于水浴恒温加热和其它温度试验，是生物、遗传、病毒、水产、环保、医药、卫生、生化实验室、分析室教育科研的必备工具。对各种化学样品，生物制品进行蒸馏、干燥、浓缩及温渍，是实验室不可缺少的实验器材。

『玖』 RPA试剂及试剂盒，提取RNA，然后做逆转录需要什么试剂及试剂盒谢谢了，大神帮忙啊

trizol法提取大小RNA，trizol买invitrogen公司的。 逆转录用promega公司 http://proct.bio1000.com/100167/ 的M-MLV

『拾』 提取RNA，然后做逆转录需要什么试剂及试剂盒

看你要提什么RNA了，如果是总RNA建议用TRIZOL法，反转录用一步法或两步法反转录试剂盒，如果你要做双链cDNA，接下来还要进行第二条链合成，有双链cDNA合成试剂盒，也有这两步都包括的试剂盒。