脂质体分析主要用什么仪器

Ⅰ 求脂质体制备工艺的流程图

1被动载药法

脂质体常用制备方法主要有薄膜分散法、反相蒸发法、注入法、超声波分散等。在制备含药脂质体时，首先将药物溶于水相或有机相中，然后按适宜的方法制备含药脂质体，该法适于脂溶性强的药物，所得脂质体具有较高包封率。

1.1薄膜分散法

此法最初由Bangham等报道，是最原始但又是迄今为止最基本和应用最广泛的脂质体的制备方法。将磷脂和胆固醇等类脂及脂溶性药物溶于有机溶剂，然后将此溶液置于一大的圆底烧瓶中，再旋转减压蒸干，磷脂在烧瓶内壁上会形成一层很薄的膜，然后加入一定量的缓冲溶液，充分振荡烧瓶使脂质膜水化脱落，即可得到脂质体。这种方法对水溶性药物可获得较高的包封率，但是脂质体粒径在0.2～5μm之间，可通过超声波仪处理或者通过挤压使脂质体通过固定粒径的聚碳酸酯膜，在一定程度上降低脂质体的粒径。

1.2超声分散法

将磷脂、胆固醇和待包封药物一起溶解于有机溶剂中，混合均匀后旋转蒸发去除有机溶剂，将剩下的溶液再经超声波处理，分离即得脂质体。超声波法可分为两种“水浴超声波法和探针超声波法”，本法是制备小脂质体的常用方法，但是超声波易引起药物的降解问题。

1.3冷冻干燥法

脂质体混悬液在贮存期间易发生聚集、融合及药物渗漏，且磷脂易氧化、水解，难以满足药物制剂稳定性的要求。1978年Vanleberghe等首次报道采用冷冻干燥法提高脂质体的贮存稳定性。目前，该法已成为较有前途的改善脂质体制剂长期稳定性的方法之一。

脂质体冷冻干燥包括预冻、初步干燥及二次干燥3个过程。冻干脂质体可直接作为固体剂型，如喷雾剂使用，也可用水或其它溶剂化重建成脂质体混悬液使用，但预冻、干燥和复水等过程均不利于脂质体结构和功能的稳定。如在冻干前加入适宜的冻干保护剂，采用适当的工艺，则可大大减轻甚至消除冻干过程对脂质体的破坏，复水后脂质体的形态、粒径及包封率等均无显著变化。单糖、二糖、寡聚糖、多糖、多元醇及其他水溶性高分子物质都可以用做脂质体冻干保护剂，其中二糖是研究最多也是最有效的，常用的有海藻糖、麦芽糖、蔗糖及乳糖。本法适于热敏型药物前体脂质体的制备，但成本较高。陈建明等［1］以大豆磷脂为膜材，以甘露醇为冻干保护剂，采用冻干法制备了维生素A前体脂质体，复水化后平均粒径为0.6151μm，包封率98.5%。林中方等［2］采用冻干法制备了鬼臼毒素体脂质体，复水化后平均粒径为1.451μm，包封率72.3%，但是这种方法仍然存在着不足之处，例如脂质体复水化后粒径分布不够均匀。

1.4冻融法

此法首先制备包封有药物的脂质体，然后冷冻。在快速冷冻过程中，由于冰晶的形成，使形成的脂质体膜破裂，冰晶的片层与破碎的膜同时存在，此状态不稳定，在缓慢融化过程中，暴露出的脂膜互相融合重新形成脂质体。何文等［3］分别用反相蒸发法、乳化法和冻融法制备了甲氧沙林脂质体。通过研究发现，冻融法制备的脂质体的包封率最高，但是粒径最大。反复冻融可以提高脂质体的包封率，王健松［4］制备了阿奇霉素脂质体，实验发现，经3次重复冻融后，阿奇霉素脂质体的包封率从61.4%增加到78%，但是当冻融次数增加到4次，包封率变化很小。该制备方法适于较大量的生产，尤其对不稳定的药物最适合。

1.5复乳法

此法第1步将磷脂溶于有机溶剂，加入待包封药物的溶液，乳化得到W/O初乳，第2步将初乳加入到10倍体积的水中混合，乳化得到W/O/W乳液，然后在一定温度下去除有机溶剂即可得到脂质体。Kim［5］用乳化法制得脂质体的包封率比较高，但是粒径较大。Tomoko等［6］通过研究发现，第2步乳化过程和有机溶剂的去除过程的温度对脂质体的粒径有比较大的影响，较低的温度有利于减小脂质体的粒径，通过控制温度可以制得粒径为400nm，包封率达到90%的脂质体。

1.6注入法

将类脂质和脂溶性药物溶于有机溶剂中（油相），然后把油相均速注射到水相（含水溶性药物）中，搅拌挥尽有机溶剂，再乳匀或超声得到脂质体。根据溶剂的不同可分为乙醇注入法和乙醚注入法。

乙醇注入法避免了使用有机溶剂，丁丽燕［5］用乙醇法制备了司帕沙星脂质体，通过研究发现慢速注入可制得具有较高包封率的脂质体，其包封率为47%。

乙醚注入法制备的脂质体大多为单室脂质体，粒径绝大多数在2μm以下，操作过程中温度比较低（40℃），因此，该方法适用于在乙醚中有较好溶解度和对热不稳定药物，同时通过调节乙醚中不同磷脂的浓度，可以得到不同粒径且粒径分布均匀的脂质体混悬液［8］。

1.7反相蒸发法

最初由Szoka提出，一般的制法是将磷脂等膜材溶于有机溶剂中，短时超声振荡，直至形成稳定的W/O乳液，然后减压蒸发除掉有机溶剂，达到胶态后，滴加缓冲液，旋转蒸发使器壁上的凝胶脱落，然后在减压下继续蒸发，制得水性混悬液，除去未包入的药物，即得大单层脂质体脂质体。此法可包裹较大的水容积，一般适用于包封水溶性药物、大分子生物活性物质等。

1.8超临界法

传统的脂质体制备方法，必须要使用氯仿，乙醚、甲醇等有机溶剂，这对环境和人体都是有害的。超临界二氧化碳是一种无毒、惰性且对环境无害的反应介质。严宾等［9］用超临界法制备了头孢唑林钠脂质体，将一定量的卵磷脂溶解于乙醇中配得卵磷酯乙醇溶液，与头孢唑啉钠溶液一起放入加入高压釜中，将高压釜放入恒温水浴中，通入CO2。在其超临界态下孵化30min，制备脂质体。采用超临界CO2法制备的包封率高、粒径小，稳定性增强。

2主动载药

对于两亲性药物，如某些弱酸弱碱，其油水分配系数介质pH和离子强度的影响较大，用被动载药法制得的脂质体包封率低。

主动载药是利用两亲性的药物，能以电中性的形式跨越脂质双层，但其电离形式却不能跨越的原理来实现的。通过形成脂质体膜内、外水相的pH梯度差异，使脂质体外水相的药物自发地向脂质体内部聚集。

此法通常用脂质体包封酸性缓冲盐，然后用碱把外水相调成中性，建立脂质体内外的pH梯度。药物在外水相的pH环境下以亲脂性的中性形式存在，能够透过脂质体双层膜。而在脂质体内水相中药物被质子化转为离子形式，不能再通过脂质体双层回到外水相，因而被包封在脂质体中。主动载药法广义上就是指pH梯度法。人们把其细分为：（1）pH梯度法；（2）硫酸铵梯度法；（3）醋酸钙梯度法。其中硫酸铵梯度法和醋酸钙梯度法只是pH梯度法的两种特殊形式。

2.1pH梯度法

pH梯度法通过调节脂质体内外水相的pH值，形成一定的pH梯度差，弱酸或弱碱药物则顺着pH梯度，以分子形式跨越磷脂膜而使以离子形式被包封在内水相中。

赵妍等［10］用以pH梯度法制备硫酸长春新碱脂质体，其包封率大于85%，而被动载药法制备的硫酸长春新碱脂质体的包封率最高为14.4%。Jia等［11］用pH梯度法内水相pH0.5%外水相pH4.0制备了卡苯达唑脂质体，包封率高于95%。杜松等［12］用pH梯度法制备盐酸去氢骆驼蓬碱脂质体，包封率大于80%，研究表明，虽然制得的脂质体没有加强药物的抗癌活性，但是大大降低了其毒副作用。

跨膜pH梯度是影响包封率的最主要因素，通常pH梯度越大，载入脂质体内的药物越多，包封率也越高。制备伊立替康脂质体时［13］，当pH梯度≥3.7时包封率达97%以上，当pH梯度＜2时，包封率不到5%；Mamyer等［14］在研究中发现通过跨膜pH梯度法制备多柔比星脂质体，pH梯度达到3.5时包封率达98%，降低内水相缓冲液的pH可增大pH梯度，但会加剧磷脂的水解，降低脂质体的稳定性。

此外，药物自身性质如油水分配系数、膜渗透性等亦可影响包封率。Quan等［15］用pH梯度法制备多巴胺脂质体，由于多巴胺亲水性较强，无法直接克服能量壁垒穿过脂质双分子层进入内水相，但与拉沙洛西（lasalocid)结合形成复合物可暴露出亲脂性表面，即可穿过脂质膜进入脂质体，包封率提高到85%。氧化苦参碱水溶性较大，脂溶性较弱，因此采用pH梯度法制备脂质体包封率只有50%［16］。

希望您能够采纳！！

Ⅱ 制备脂质体为什么要用pbs不直接用去离子水

、脂质体离

适化结构亲脂性药物镶嵌双层膜内包裹脂质体其包封率取决于所用脂质浓度种情况包封率达90％定要除未包裹药物水溶性药物言包裹药物仅总量部必须脂质体悬液除未包裹药物由于脂质体比包裹药物要利用同离除未包裹药物些凝胶滤柱层析渗析等；若包裹物质蛋白质或DNA或者未包裹药物能形较聚结物则利用与脂质体浮力、密度同采用诸离等进行离

()柱层析

凝胶渗透层析技术广泛用于脂质体悬液离除未包裹药物用于悬液脂质体组技术实验室效且快速规模产虽用凝胶滤纯化技术较困难且价格昂贵另外脂质体洗脱介质稀释能需要增加浓缩步骤
柱层析填料用葡聚糖Sephadex G-50其步骤与规致必须指：①葡聚糖表面存着能与脂质体膜结合并相互作用微部位虽种作用并影响脂质体凝胶柱流特征仍导致少量脂质损失使膜稳定性增加导致膜渗透性改变及包裹物质渗漏种现象脂质浓度较低情况特别应予注意般通加脂质体品柱量或用空脂质体预先柱饱解决通使用20mg脂质制单层脂质体饱10g凝胶；②若凝胶颗粒太细较脂质体能滞留凝胶柱层脂质体宜选用粗级凝胶(粒径50～150μm)单层脂质体则用任何级别凝胶

(二)渗析

简单用除未包裹药物(化合物除外)需要复杂技术须昂贵仪器且能够扩产通断改换渗析介质除所游离药物费般室温条件要除95％游离药物至少需要更换三渗析介质间10～24h外渗析介质渗透强度应与脂质体悬液致否则渗析改变脂质体悬液体积且能引起包裹物质渗漏

(三)离

同离力离离除同种类脂质体游离药物效完全除游离药物需重复悬浮离使脂质体沉所需离力取决于脂质体某种程度取决于混悬液絮凝状态脂质体且布窄需要高速离及冰冻条件低速(2000～4000r／min)离能使脂质体沉降
显于量脂质体利用高速冰冻离极其耗能昂贵适于离脂质体于比较脂质体低速离缩短操作间并且同较稀脂质体悬液浓缩所需浓度避免脂质体遭破坏必须注意保证重复混悬介质渗透压与脂质体悬液渗透压相致

二、脂质体包封率测定

()百包封率测定

显考查包裹物质物体内行前必须测定该物质脂质体量采用述离除未包入脂质体游离物质利用式计算百包封率(Encapsulation percentageEN％)

EN％=(1Cf／Ct)×100％

式Cf游离药物量；Ct脂质体悬液药物总量
再介绍两种快速、用量少且适应性广离游离物质并测定EN％

1．微型柱离(minicolumn centrifugation method)

取塑料注射针筒填滤膜作衬片装入用理盐水溶胀Sephadex G-50再针筒置离管低速离(2000r／min3min)除余理盐水凝胶柱变干并能与针筒内壁离精确定量加入脂质体品注意勿滴入柱床边缘离(2000r／min3min)使脂质体进入离管待测再凝胶柱加入少量理盐水依离离液能再脂质体或仍含少量主要取决于脂质体及组游离药物程葡聚糖吸附离凝胶柱再加理盐水离使柱干游离药物洗脱进入离液反复几直至全部游离药物均柱离洗脱别测定包封药物及游离药物浓度计算EN％(图20—10)

微型柱离优点脂质体悬液几乎没稀释于实验室规模试验较用离除未包裹药物快速测定包封率

2．鱼精蛋白凝聚(protamine aggregation)

用于任何组脂质体性或带负电荷脂质体(图20－11)：

取0.1ml脂质体悬液于10ml锥形离管加入0.1ml鱼精蛋白溶液(10mg／ml)搅匀静置3min再加3ml理盐水室温条件离吸取2ml清液测定游离药物浓度剩余清液弃沉淀物0.6ml 10％ Triton X-100重新混悬使脂质体膜材溶解再补充理盐水至总体积3.2ml测定包封药物浓度便算EN％

(二)包裹容积测定

包裹容积(entrapped volume)指制脂质体相于每毫克磷脂所占内水相体积般微升(μl)表示包裹容积计算通测定包裹脂质体内药物总量推测假设脂质体内水性介质药物浓度与始制备所用药物浓度经离除未包裹药物没物质脂质体渗漏则容易计算许情况假设往往能立例用二乳化制备脂质体干燥除机溶剂内水相能失；另外由于内外渗透压差异水进入或逸脂质体测定内部容积办直接测定水量例利用具光谱性液体代替内相介质利用核磁共振(NMR)测定测水量脂质体高速离(200000g6h)沉降紧密沉淀除尽清液沉淀物D20(deuterium oxide)重新混悬由于膜于水渗透性使整体系H20D20快达平衡取少量用于磷脂量测定剩余部作水NMR扫描峰高与D20含水浓度比与标准溶液照即求水量计算脂质体包裹容积

三、脂质体稳定性

脂质体放置程能发种同变化磷脂质氧化水解短链磷脂并膜形具溶解性衍物；另外脂质体发凝聚、融合等物理变化导致包裹物质渗漏脂质体制剂若要发展产品应市必须贮藏期间具良稳定性；体内达靶组织前或发挥其缓释作用前亦须保持定及完整性已证明脂质体血液比较稳定随磷脂化性质、胆固醇比例脂质体、双层数目等同脂质体体内稳定性所同若贮存程药物脂质体迅速渗漏则必限制脂质体应用价值

()化稳定性

脂质体组磷脂氧化降解应制备即加防止采用些措施尽能降低氧化程度例使用新鲜提纯磷脂新鲜蒸馏溶剂尽量避免高温并充氮氧条件完制备程脂质体贮存于惰性环境等
膜材组加入抗氧剂种效目前用抗氧剂α-育酚种毒食用脂质据认蛋卵磷脂氧化解α-育酚加入减缓另选择降低氧化程度使用饱磷脂代替饱磷脂源磷脂其饱度随植物、蛋黄、哺乳物依增加于蛋黄磷脂饱度取决于物饲料及所用提纯
论饱饱磷脂脂质体水性悬液都能水解形溶血磷脂脂肪酸溶血磷脂进步水解形甘油磷脂脂肪酸甘油磷酸间酯键难水解所产游离磷酸甘油精制豆磷脂脂质体水性悬液水解力已研究结表明豆磷脂水解主要受H+OH+催化作用pH6.5左右水解速率体系加入缓冲离醋酸、枸橼酸缓血酸铵轻度增加豆磷脂水解

(二)物理稳定性

脂质体包裹药物渗漏凝聚、融合团块等物理稳定性问题脂质体研究工作难题些研究表明单层脂质体贮存体积增药物渗漏与脂质及包裹药物性质关由性磷脂制备脂质体凝聚主要由于范德华力相互作用所致膜材加入少量负电荷磷脂(10％PA或PG)克服膜材加入微量1,3-二乙酰-2-磷脂酰胆碱阻止较脂质体融合
较脂质体制备适条件般发融合于40nm单层脂质体由于膜曲率易于发融合特别相变温度更易发
采用前体脂质体等重建脂质体较避免脂质体贮存发化物理变化重建脂质体三种类型：含药或含药干脂质膜；含药或含药冻干脂质混合物：含药冻干脂质体于干脂质膜或冻干脂质混合物重建所获药物包封率限特别亲水性药物包封率高悬液含较游离药物实际应价值于具适结构亲脂性药物重建产品达较满意包封率重建程所需条件例搅拌程度要求高温超声处理等实际应用甚便
于亲水性药物选择含药冻干脂质体重建形式报道冰冻程若加入亲水性聚合物葡聚糖能产自由流能利于冻干脂质体水性介质重建例含胰岛素冻干脂质体用种处理其重建包封率达原70％即冰冻重建程胰岛素渗漏率约30％包裹低量药物渗漏率能更高些种技术保证脂质体制剂贮存稳定性提供效

四、脂质体测定

脂质体影响脂质体体内处置脂质体重要质量指标测定脂质体激光扫描电显微镜或库尔特粒度析疑电镜测定准确直接观察每脂质体并获各范围内脂质体外形精确信息要观察量脂质体本非费相反．激光扫描非简单且操作快速仅能测脂质体平均性质与类似采用库尔特粒度析仪测脂质体布二种均难描述更精细结构关于粒度测定细节参见本书第十二章

五、脂质体析

()磷脂质析

1．含量测定

直接精确测定磷脂质浓度比较困难干燥磷脂总含定量残留溶剂或其杂质磷脂广泛使用测定磷脂非直接例含磷量测定于制备脂质体数磷脂言每摩尔磷脂均含1mol磷仅别例外每摩尔磷脂含2mol磷品磷脂浓度通测定磷含量计算介绍二种磷测定

(1)Bartlett

磷脂机磷酸解机磷加入钼酸铵使转化磷钼酸磷钼酸用萘磺酸铵定量原蓝色蓝色强度由光光度测定与标准品(磷酸二氢钾)照即计算含磷量该灵敏度较高且重现性若品含少量机磷则干扰测定

(2)Stewart

脂质体混悬于磷酸盐缓冲液宜采用Stewart该利用磷脂机溶剂与亚铁硫氰酸铵形色复合物受机磷存影响进行测定计算使用与磷脂结构关转换吸收值换算磷脂毫克数该随磷脂基同异利用磷脂标准液绘制标准曲线计算该适于测定含未知磷脂混合物特别须指该能用于甘油磷脂测定若脂质体含卵磷脂甘油磷脂则用该前者定量再通Bartlett测定总磷脂计算甘油磷脂量

2．磷脂质薄层层析

薄层层析检查磷脂质纯度主要手段与所层析磷脂质薄层层析利用磷脂液态机相亲水性固定相同亲性液相固定相展同磷脂具同保留间根据亲水性强弱改变展剂组改变磷脂两相配系数用固定相硅胶展剂则用含氯仿溶剂①氯仿：甲醇：水：(65：25：4 V／V)；②氯仿：甲醇：水：氨水(65：35：2.5：2.5 V／V)；③氯仿：丙酮：甲醇：醋酸：水(6：8：2：2：1 V／V)；④乙酸乙酯：环烷(1：1 V／V)等用显色剂碘用50％硫酸 - 甲醇液或重铬酸钾液显色

(三)磷脂氧化程度

1．磷脂氧化

磷脂脂肪酸氧化主要由于游离基作用电磁波辐射或者微量游离金属离催化脂肪酸碳链首先脱氢原形游离基进与空气氧发连锁反应含双键碳链更易受影响聚合饱磷脂特别容易氧化降解含单或饱脂肪酸脂质混合物磷脂氧化三阶段进行：①单双键偶合；②氧化物形；③形乙醛及链断裂
值注意氧情况仍发游离基反应导致双重或三重偶合形产氧化物另外降解步程要消耗偶合双键终降解产物增加同笫步降解产物减少故难用种试验评估磷脂氧化程度甚至即使应用几同试验仍仅能致估计氧化程相速率

2．氧化指数测定

氧化指数用检测游离基偶合指标氧化偶合磷脂230nm左右具紫外吸收峰别于未氧化磷脂典型紫外吸收图谱图20－12

内提作制备脂质体膜材卵磷脂其氧化指数应控制0.2测定磷脂溶于水乙醇配定浓度澄明溶液别测定波233nm及215nm吸收值按式计算：
氧化指数 = A233nm／A215nm

3．氧化物测定

卵磷脂氧化产丙二醛及溶血磷脂等丙二醛(MDA)酸性条件与硫巴比妥酸(TBA)反应种红色染料(TBA-Pigment)

该化合物波535nm处特异吸收吸收值即反映磷脂氧化程度丙二醛量与溶血间关系进行研究实验证明每毫升含卵磷脂理盐水丙二醛含量超2.3μg37℃放置1～2h即产溶血
除述估计磷脂氧化程度外根据聚合饱脂肪酸链氧化阶段发断裂或缩短用气 - 液色谱解些酰基链变化

(四)胆固醇析

与磷脂质类似胆固醇纯度及其氧化产物用气 - 液色谱进行检测另外由于胆固醇论游离型酯化型都能与含高氯酸铁乙酸乙酯硫酸试剂反应铁复合物波610nm处紫外吸收采用标准胆固醇溶液照计算胆固醇量

六、脂质体灭菌

许研究论文都认脂质体宜用加热灭菌办且各类辐射及各种化灭菌剂敏所能使用滤灭菌或采用菌操作进行制备影响脂质体广泛应用于临床重要原
近内采用100℃ 30min湿热灭菌获功灭菌前脂质体形态及均明显变化渗漏率约5％另采用辐射灭菌即用60钴发γ射线三磷酸腺苷脂质体甲氨蝶呤脂质体作辐射灭菌照射剂量15～20kGy菌试验结均由试验前阳性转阴性脂质体粒径灭菌前显著变化灭菌所致渗漏率较
灭菌实用性能与混悬介质种类、磷脂组及纯度等关采用121℃加热20min灭菌处理几种脂质体发现理盐水脂质体发凝聚等渗糖溶液羟基化合物溶液发凝聚加热灭菌具较高氧化物值含蛋卵磷脂散液稍变黄改用具低氧化物值蛋卵磷脂、氢化蛋卵磷脂或DPPC则变化性pH充入氮气阻止颜色变化加入α-育酚效经0.4μm膜滤由蛋卵磷脂组脂质体变变化介质类型明显影响加热灭菌期间包裹羧基荧光素阴离负电荷脂质体(PC／chol／PG)发渗漏使用电荷脂质体(PC／chol／十八胺)仅加热灭菌期间发渗漏且贮存间渗漏
感觉这样的提问是没有意义的
还是自己找下资料吧

Ⅲ 如何制备氯硝柳胺脂质体,用薄膜分散法或者乙醇注入法可以么,需要用到什么仪器

分别采用薄膜分散法、逆相蒸发法、乙醇注入法、乙醚注入法和熔融法制备新疆紫草提取物（AEE）脂质体,以包封率、形态、粒径分布等为指标比较5种方法的适用性。结果：薄膜分散法、逆相蒸发法、乙醇注入法与乙醚注入法制得的脂质体形态较完整,大小较均匀;其中乙醇注入法制备的AEE脂质体包封率最高,为（63.53±0.71）%。结论：乙醇注入法适合于AEE脂质体的制备。

Ⅳ 关于制备脂质体的问题

美国Genzyme人工合成磷脂在中国的长期供应商是西安瑞禧生物科技有限公司，以下资料由西安瑞禧科技提供。
美国Genzyme公司磷脂类产品列表：
DLPA,Na 1,2-Dilauroyl-sn-glycero-3-phosphate (Sodium Salt) LP-R4-121
DMPA,Na 1,2-Dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphate (Sodium Salt) LP-R4-024
DPPA,Na 1,2-Dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphate (Sodium Salt) LP-R4-025
DSPA,Na 1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-phosphate (Sodium Salt) LP-R4-026
DLPG,Na 1,2-Dilauroyl-sn-glycero-3Phospho-rac(1-glycerol)(Sodium Salt)
DMPG,Na 1,2-Dimyristoyl-sn-glycero-3Phospho-rac-(1-glycerol)(Sodium Salt)
DMPG,NH4 1,2-Dimyristoyl-sn-glycero-3Phospho-rac(1-glycerol)Ammonium Salt)
DPPG,Na 1,2-Dipalmitoyl-sn-glycero-3Phospho-rac-(1-glycerol)(Sodium Salt)
DSPG,Na 1,2-Distearoyl-sn-glycero-3[Phospho-rac-(1-glycerol)(Sodium Salt)
DPPS,Na 1,2-Dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphoserine (Sodium Salt)
DSPE 1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine
DPPE 1,2-Dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine
DOPE 1,2-Dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine
DMPE 1,2-Dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine
DPPC 1,2-Dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine
DPPC 1,2-Dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine
注：以上磷脂纯度≥99%
公司：西安瑞禧生物科技有限公司

Ⅳ 急!!!脂质体粒径怎么测比较准确啊

一、脂质体的分离

适当化学结构的亲脂性药物是镶嵌在双层膜内而被包裹在脂质体中，其包封率取决于所用脂质的浓度。在这种情况下，包封率可达到90％，就不一定要除去未包裹药物。但是对水溶性药物而言，被包裹的药物仅是总量中的一部分，就必须从脂质体悬液中除去未包裹药物。由于脂质体比被包裹的药物分子要大得多，因此可利用它们的不同大小来分离除去未包裹的药物，这些方法有凝胶过滤柱层析法，渗析法等；若被包裹的物质是蛋白质或DNA，或者未被包裹的药物可能形成较大的聚结物，则可利用它们与脂质体浮力、密度的不同而采用诸如离心等方法进行分离。

(一)柱层析法

凝胶渗透层析技术广泛用于从脂质体悬液中分离除去未包裹药物，也可用于对悬液中的脂质体大小分组，这一技术在实验室中很有效且快速。在大规模生产上，虽然也可用凝胶过滤来纯化，但技术较困难且价格昂贵。另外，脂质体被洗脱介质稀释后可能需要增加浓缩步骤。
柱层析填料常用葡聚糖如Sephadex G-50，其步骤与常规方法一致。但必须指出：①在葡聚糖表面存在着能与脂质体膜结合并相互作用的微小部位。虽然这种作用并不影响脂质体在凝胶柱上的流动特征，但仍可导致少量脂质的损失，使膜的不稳定性增加，从而导致膜渗透性的改变及包裹物质的渗漏。这种现象在脂质浓度较低的情况下特别应予注意，一般可通过加大脂质体样品上柱量或用空脂质体预先将柱子饱和来解决。通常使用20mg脂质制成的小单层脂质体可饱和10g凝胶；②若凝胶颗粒太细，较大的脂质体可能被滞留在凝胶柱上，因此对多层脂质体宜选用中粗级的凝胶(粒径大小为50～150µm)，而对小单层脂质体则可用任何级别的凝胶。

(二)渗析法

此法是最简单的也是最常用的除去未包裹药物的方法(大分子化合物除外)。它不需要复杂的技术，也无须昂贵的仪器，且能够扩大生产。通过不断改换渗析介质可除去所有的游离药物。但是此法很费时，一般在室温条件下，要除去95％以上的游离药物至少需要更换三次渗析介质，时间在10～24h以上。此外，渗析介质的渗透强度应与脂质体悬液一致，否则在渗析中就会改变脂质体悬液的体积，且可能引起包裹物质的渗漏。

(三)离心法

在不同的离心力下离心是分离除去不同种类脂质体中游离药物的有效方法。为了完全除去游离药物，常常需重复悬浮和多次离心。使脂质体下沉所需的离心力取决于脂质体的大小，在某种程度上还取决于混悬液的絮凝状态。如果脂质体小且分布窄，就需要高速离心及冰冻条件。低速(2000～4000r／min)离心只能使大脂质体沉降。
显然，对于大量脂质体利用高速冰冻离心是极其耗能和昂贵的，因此此法不适于分离小脂质体。对于比较大的脂质体，低速离心可缩短操作时间并且可同时将较稀的脂质体悬液浓缩到所需浓度。为了避免脂质体遭到破坏，必须注意保证重复混悬介质的渗透压与脂质体悬液的渗透压相一致。

二、脂质体包封率的测定

(一)百分包封率的测定

显然，在考查包裹物质在生物体内的行为之前必须测定该物质在脂质体中的量，采用上述方法分离除去未包入脂质体中的游离物质，就可利用下式计算出百分包封率(Encapsulation percentage。EN％)

EN％=(1一Cf／Ct)×100％

式中，Cf为游离药物的量；Ct为脂质体悬液中药物的总量。
这里再介绍两种快速、用量少且适应性广的分离游离物质并测定EN％的方法。

1．微型柱离心法(minicolumn centrifugation method)

取一塑料注射针筒，填上过滤膜作衬片，装入用生理盐水溶胀的Sephadex G-50，再将针筒置一离心管中低速离心(2000r／min，3min)除去多余的生理盐水，此时，凝胶柱变干并可能与针筒内壁分离，精确定量加入脂质体样品，注意勿滴入柱床边缘，离心(2000r／min，3min)使脂质体进入离心管中，待测。再在凝胶柱上加入少量生理盐水，依上法离心，此次离心液中可能不再有脂质体或仍含有少量，这主要取决于脂质体的大小及组成，但游离药物在此过程中因葡聚糖吸附而不会被离出，然后可在凝胶柱上再加生理盐水，离心使柱干，此时游离药物被洗脱进入离心液中，反复几次，直至全部游离药物均从柱子上离心洗脱下来，分别测定包封药物及游离药物浓度，就可计算出EN％(图20—10)。

微型柱离心法的优点是脂质体悬液几乎没有被稀释，对于实验室小规模的试验，可较好地用来分离除去未包裹药物和快速地测定包封率。

2．鱼精蛋白凝聚法(protamine aggregation)

此法可用于任何组成的脂质体，如中性或带负电荷的脂质体(图20－11)。方法如下：

取0.1ml脂质体悬液于10ml锥形离心管中，加入0.1ml鱼精蛋白溶液(10mg／ml)，搅匀，静置3min，再加3ml生理盐水，在室温条件下离心，吸取2ml上清液，测定游离药物的浓度。将剩余上清液弃去，沉淀物以0.6ml 10％ Triton X-100重新混悬，使脂质体膜材溶解，再补充生理盐水至总体积为3.2ml，测定包封药物的浓度，就可方便地算出EN％。

(二)包裹容积的测定

包裹容积(entrapped volume)是指制成的脂质体相对于每毫克磷脂所占的内水相的体积，一般以微升(µl)表示。包裹容积的计算可通过测定包裹在脂质体内药物的总量来推测。假设在脂质体内水性介质中药物的浓度与开始制备时所用的药物浓度一样，经分离除去未包裹药物后没有物质从脂质体中渗漏出来，则很容易计算。但是在许多情况下，这样的假设往往不能成立。例如用二次乳化法制备脂质体时，在干燥除去有机溶剂时内水相可能也会失去；另外由于内外渗透压的差异，水分子可以进入或逸出脂质体，因此测定内部容积最好的办法是直接测定水的量。例如利用具有光谱性的液体代替内相介质，利用核磁共振法(NMR)测定，然后测出水的量。将脂质体在高速离心(200000g，6h)下沉降成为紧密的沉淀，小心除尽上清液，将沉淀物以D20(deuterium oxide)重新混悬，由于膜对于水的渗透性使整个体系中H20和D20很快达到平衡，取出少量用于磷脂量测定，剩余部分可作水的NMR扫描，峰高与D20中含水浓度成正比，与标准溶液对照即可求得水的量，从而计算出脂质体的包裹容积。

三、脂质体的稳定性

脂质体在放置过程中可能发生多种不同的变化。如磷脂质会氧化和水解，生成短链的磷脂，并在膜中形成具溶解性的衍生物；另外脂质体还可发生凝聚、融合等物理变化，从而导致包裹物质的渗漏。因此脂质体制剂若要发展为产品应市，必须在贮藏期间具有良好的稳定性；在体内到达靶组织之前或发挥其缓释作用之前亦须保持一定的大小及完整性。已证明脂质体在血液中比较稳定，但随磷脂的化学性质、胆固醇的比例和脂质体的大小、双分子层的数目等的不同，脂质体在体内的稳定性也会有所不同。但若在贮存过程中，药物从脂质体迅速渗漏，则必将限制脂质体的应用价值。

(一)化学稳定性

脂质体组分磷脂的氧化降解应在制备时即加以防止，可采用一些措施尽可能地降低氧化程度，例如，使用新鲜提纯的磷脂和新鲜蒸馏的溶剂，尽量避免高温，并在充氮和无氧的条件下完成制备过程，最后将脂质体贮存于惰性环境等。
在膜材组成中加入抗氧剂也是一种有效的方法。目前常用的抗氧剂是α-生育酚，为一种无毒的食用脂质。据认为蛋卵磷脂的氧化分解可因α-生育酚的加入大大减缓。另一可选择的降低氧化程度的方法是使用饱和磷脂代替不饱和磷脂，在天然来源的磷脂中，其不饱和度随植物、蛋黄、哺乳动物依次增加，对于蛋黄磷脂，不饱和度取决于动物的饲料及所用的提纯方法。
但是，无论是不饱和还是饱和磷脂，在脂质体的水性悬液中，都可能水解而形成溶血磷脂和脂肪酸，溶血磷脂进一步水解而形成甘油磷脂和脂肪酸，甘油和磷酸之间的酯键很难水解，所以不产生游离的磷酸和甘油。精制天然豆磷脂在脂质体水性悬液中的水解动力学已有研究。结果表明，豆磷脂的水解主要受H+和OH+的催化作用，在pH6.5左右水解速率最小。体系中加入缓冲离子如醋酸、枸橼酸和缓血酸铵也可轻度增加豆磷脂的水解。

(二)物理稳定性

脂质体中包裹药物的渗漏和凝聚、融合成大的团块等物理稳定性问题是脂质体研究工作中的一大难题。一些研究表明，小单层脂质体在贮存中体积增大，药物渗漏与脂质成分及包裹药物的性质有关。由中性磷脂制备的脂质体的凝聚主要是由于范德华力相互作用所致，可在膜材中加入少量负电荷磷脂(如10％PA或PG)来克服。在膜材中加入微量的1,3-二乙酰-2-磷脂酰胆碱也可以阻止较小脂质体的融合。
较大的脂质体在制备方法适当的条件下一般不发生融合，而小于40nm的小单层脂质体由于膜的曲率大，易于发生融合，特别在相变温度时更易发生。
采用前体脂质体等重建脂质体的方法可以较好地避免脂质体在贮存中发生的化学和物理变化。重建脂质体有以下三种类型：含药或不含药的干脂质膜；含药或不含药的冻干脂质混合物：含药冻干脂质体。对于干脂质膜或冻干脂质混合物，重建时所获得的药物包封率是有限的，特别是对亲水性药物的包封率常常不高，悬液中含有较多的游离药物，实际应成价值不大。对于具有适当结构的亲脂性药物，重建产品可达到较满意的包封率，但在重建过程中所需的条件，例如搅拌程度和方法，要求在高出常温下超声处理等，实际应用不甚方便。
对于亲水性药物，可选择含药冻干脂质体这一重建形式，有报道在冰冻过程中若加入亲水性聚合物，如葡聚糖能产生自由流动能，利于冻干脂质体在水性介质中重建。例如当含有胰岛素的冻干脂质体用这种方法处理时，其重建后的包封率可达原来的70％，即在冰冻和重建过程中胰岛素的渗漏率大约为30％。如果包裹的是低分子量药物，渗漏率可能更高些。但是，这种技术为保证脂质体制剂在贮存中的稳定性提供了一个有效的方法。

四、脂质体大小的测定

脂质体的大小将影响脂质体在体内的处置，也是脂质体重要的质量指标之一。测定脂质体大小的方法有激光扫描法，电子显微镜法或库尔特粒度分析法。无疑，电镜测定法最为准确。因为人们可以直接观察每一个脂质体，并获得各个大小范围内脂质体外形的精确信息。但是要观察大量脂质体样本非常费时。相反．激光扫描法非常简单且操作快速，但仅能测出脂质体的平均性质。与之类似，采用库尔特粒度分析仪也可测出脂质体的大小分布，但后二种方法均难以描述更精细的结构。关于粒度测定的细节可参见本书第十二章。

五、脂质体的成分分析

(一)磷脂质的分析

1．含量测定

直接精确测定磷脂质浓度比较困难，因为干燥磷脂中总含有一定量的残留溶剂或其它杂质磷脂，因此最广泛使用的测定磷脂的方法是非直接法，例如含磷量的测定。对于制备脂质体的大多数磷脂而言，每摩尔磷脂均含1mol磷，仅有个别例外，如每摩尔心磷脂含有2mol磷。因此样品中磷脂的浓度可通过测定磷含量来计算。这里介绍二种磷测定法。

(1)Bartlett法

将磷脂的有机磷酸解成无机磷后，加入钼酸铵使之转化成磷钼酸，磷钼酸可用萘磺酸铵定量还原为蓝色，蓝色的强度由分光光度法测定，与标准品(如磷酸二氢钾)对照即可计算出含磷量。该法灵敏度较高且重现性好，但若样品中含有少量无机磷则会干扰测定。

(2)Stewart法

当脂质体混悬于磷酸盐缓冲液中，此时宜采用Stewart法。该法是利用磷脂在有机溶剂中与亚铁硫氰酸铵形成有色复合物，而不受无机磷存在的影响进行测定。在计算时，使用一与磷脂结构有关的转换因子将吸收值换算成磷脂毫克数，该因子随磷脂头基不同而异。也可利用磷脂标准液绘制标准曲线来计算。因此该法不适于测定含有未知磷脂的混合物。特别须指出的是，该法不能用于甘油磷脂的测定，若脂质体中含有卵磷脂和甘油磷脂，则可用该法对前者定量，再通过Bartlett法测定总的磷脂，就可计算出甘油磷脂的量。

2．磷脂质的薄层层析

薄层层析是检查磷脂质纯度的主要手段。与所有的层析法一样，磷脂质的薄层层析也是利用磷脂在液态有机相中对亲水性固定相有不同的亲和性，当液相在固定相展开时，不同的磷脂具有不同的保留时间，可根据亲水性的强弱改变展开剂的组成，从而改变磷脂在两相中的分配系数。最常用的固定相是硅胶，展开剂则常用含有氯仿的溶剂。如①氯仿：甲醇：水：(65：25：4 V／V)；②氯仿：甲醇：水：氨水(65：35：2.5：2.5 V／V)；③氯仿：丙酮：甲醇：醋酸：水(6：8：2：2：1 V／V)；④乙酸乙酯：环己烷(1：1 V／V)等。最常用的显色剂为碘，也可用50％的硫酸 - 甲醇液或重铬酸钾液显色。

(三)磷脂氧化程度

1．磷脂的氧化

磷脂脂肪酸的氧化主要是由于游离基的作用。在电磁波辐射或者微量游离金属离子的催化下。脂肪酸碳链上首先脱去一个氢原子形成游离基，进而与空气中的氧发生连锁反应。含有双键的碳链更易受影响，因此聚合不饱和磷脂特别容易氧化降解。在含有单个或多个不饱和脂肪酸的脂质混合物中，磷脂的氧化分成三个阶段进行：①单个双键的偶合；②过氧化物的形成；③形成乙醛及链断裂。
值得注意的是，在无氧情况下仍会发生游离基反应导致双重或三重偶合的形成，但不产生过氧化物。另外，降解的最后一步过程要消耗偶合双键，因此在最终降解产物增加的同时，笫一步的降解产物将会减少。故很难用一种试验方法评估磷脂的氧化程度，甚至即使应用几个不同试验仍仅能大致估计氧化过程相对速率大小。

2．氧化指数的测定

氧化指数是用来检测游离基偶合的指标，因为氧化偶合后的磷脂在230nm左右具有紫外吸收峰而有别于未氧化磷脂。典型的紫外吸收图谱如图20－12。

国内有人提出作为制备脂质体膜材的卵磷脂，其氧化指数应控制在0.2以下，测定方法是，将磷脂溶于无水乙醇，配成一定浓度的澄明溶液，分别测定在波长233nm及215nm吸收值。按下式计算：
氧化指数 = A233nm／A215nm

3．过氧化物的测定

卵磷脂氧化产生丙二醛及溶血磷脂等。丙二醛(MDA)在酸性条件下可与硫巴比妥酸(TBA)反应，生成一种红色染料(TBA-Pigment)

该化合物在波长535nm处有特异吸收，吸收值的大小即反映磷脂的氧化程度。有人对丙二醛量与溶血之间的关系进行了研究，实验证明，当每毫升含卵磷脂的生理盐水中丙二醛含量超过2.3µg时，在37℃放置1～2h即产生溶血。
除上述方法可估计磷脂的氧化程度外，根据聚合不饱和脂肪酸链在氧化最后阶段发生断裂或缩短，也可用气 - 液色谱法了解这些酰基链的变化。

(四)胆固醇的分析

与磷脂质类似，胆固醇的纯度及其氧化产物可用气 - 液色谱法进行检测。另外，由于胆固醇不论是游离型还是酯化型都能与含高氯酸铁的乙酸乙酯和硫酸试剂反应生成铁复合物，在波长610nm处有紫外吸收，采用标准胆固醇溶液对照，就可计算出胆固醇的量。

六、脂质体的灭菌

许多研究论文都认为脂质体不宜用加热灭菌的办法，且对各类辐射及各种化学灭菌剂也敏感，所以只能使用过滤灭菌或采用无菌操作法进行制备。这也是影响脂质体广泛应用于临床的一个重要原因。
近年来，国内有人采用100℃ 30min湿热灭菌法获得成功，灭菌前后脂质体的形态及大小均无明显的变化，渗漏率约为5％。另有人采用辐射灭菌法，即用60钴发出的γ射线，对三磷酸腺苷脂质体和甲氨蝶呤脂质体作辐射灭菌，照射剂量为15～20kGy，无菌试验结果均由试验前的阳性转为阴性。脂质体粒径灭菌前后无显著变化。灭菌所致渗漏率较小。
灭菌方法的实用性可能与混悬介质种类、磷脂组成及纯度等有关。采用121℃加热20min灭菌处理几种脂质体，发现在生理盐水中脂质体发生凝聚，而在等渗糖溶液和多羟基化合物溶液中不发生凝聚。加热灭菌后，具有较高的过氧化物值的含蛋卵磷脂的分散液稍变黄，改用具低过氧化物值的蛋卵磷脂、氢化蛋卵磷脂或DPPC则无此变化。在中性pH时充入氮气也可阻止颜色变化，但加入α-生育酚无效。经0.4µm膜过滤的由蛋卵磷脂组成的脂质体的大小变小。在这一变化中，介质的类型也有明显影响。加热灭菌期间，包裹有羧基荧光素阴离子的负电荷脂质体(PC／chol／PG)发生渗漏，而使用正电荷脂质体(PC／chol／十八胺)不仅在加热灭菌期间不发生渗漏，且可贮存很长时间不渗漏。

Ⅵ 瑞芯智造高分辨率纳米单颗粒分析仪怎么样

瑞芯智造(深圳)科技有限公司推出的Nanocoulter Ⅰ 高分辨纳米单颗粒分析仪为纳米颗粒快速定量测量提供了一个平台。测量纳米颗粒时采用电学性质识别电解质溶液中的粒子,而无需依赖其光学参数以及其他物理性质。该仪器可测量单个粒子并快速整合粒子尺寸与浓度的统计数据。这一特殊性能将Nanocoulter Ⅰ与市面上其他纳米粒度仪区分开来。

Nanocoulter Ⅰ主要特性:

 单个检测流体中的纳米颗粒

 一次性检测卡,避免交叉污染

 多维数据,测试过程可视化

 无需对标,全自动分析纳米颗粒粒径分布、浓度以及电位数据

 任何类型的纳米颗粒(无机&有机,透明&不透明,导电&绝缘)

 粒径测量范围:40-2000nm

 浓度测量范围:106-1012个/ml

 检测速度:5分钟之内完成测试

 样本需求量:50μl以内

 台式大小,400(mm)×350(mm)×310(mm)

 重量:19kg

Nanocoulter Ⅰ技术原理:

库尔特原理(亦称:电阻感应脉冲RPS),悬浮在电解液中的颗粒随电解液通过小孔时,取代相同体积的电解液,在恒电流设计的电路中导致小孔管内外两电极间电阻发生瞬时变化,产生电位脉冲。脉冲信号的大小和次数与颗粒的大小和数目成正比。属于对颗粒个体的测量和三维的测量,不但能准确测量物料的粒径分布,更能作粒子绝对数目和浓度的测量。其所测粒径更接近真实,并且不受样本物理化学性质的影响。

光刻纳米孔芯片:

库尔特原理测量粒径范围依赖孔径大小,通过使用最先进的光蚀纳米孔硅基芯片,最高加工精度可达1nm,将传统的库尔特计数只能测量微米级别的颗粒下探到40nm。不同孔径的芯片应对不同粒径的颗粒,检测范围可从40nm-2000nm。

Nanocoulter Ⅰ如何做到单颗粒检测

液体样本中的颗粒在电渗流的驱动下,单个通过纳米孔,产生电脉冲信号(如下图所示),可测量每个通过纳米孔的粒子,提供实时的粒径大小与浓度信息,是真正意义上的单颗粒检测,不受制于颗粒的光学性质与其他物理化学性质,可用于任何材料的粒子的单颗粒测量。

Nanocoulter Ⅰ工作原理展示动画

应用方向:

细胞外囊泡(外泌体)

外泌体近年来在基础研究和临床诊断治疗等方向均展现出极大的潜力,受到广泛关注。外泌体分离纯化是所有研究工作的第一步,因此分离出来的外泌体的鉴定工作显得尤为重要。Nanocoulter Ⅰ可快速得到样品的粒径分布情况和准确的浓度信息,是外泌体研究工作中的得力助手。

病毒

对于病毒的治疗开发、药物载体、以及常规研究而言,病毒及其团聚物的数量和尺寸变化非常重要,Nanocoulter Ⅰ可以快速的提供单个病毒的浓度、团聚物浓度、粒径分布数据。细微的浓度差异(2倍),粒径差异(10nm)都可准确的表征,凭借超高的分辨率现已成为很多许多病毒研发生产企业的质控指标。

脂质体

脂质体是由卵磷脂和神经酰胺等制得,是一种类似生物膜结构的双分子层微小囊泡,可以与细胞膜融合,并且无免疫原性,是优良的药物载体材料。Nanocoulter Ⅰ不仅可以对脂质体样本进行粒径和粒径分布、浓度检测,还可以对是否成功载药进行分析,在脂质体的制备,载药研究上有指导性的意义。

细菌

库尔特原理,一直以来被行业作为细胞计数的金标准技术,Nanocoulter Ⅰ在此基础上发展起来的纳米库尔特技术,搭载不同孔径的纳米芯片,可应对各种细菌的检测,测试时间短、用量少、可活体检测、无需复杂制样,在细菌计数方面有着得天独厚的优势,并且可同时得到细菌的粒径及粒径分布、zeta电位数据。

纳米材料

各种纳米材料在医疗诊断、生物技术、工业生产等多领域都有极广泛的应用,纳米材料的浓度、粒径、粒径均一性影响纳米材料产品的性能,Nanocoulter Ⅰ采用经典的库尔特原理(电阻脉冲感应法),一个微球产生一个电阻脉冲,一次上样即可测得纳米全方位的信息,并且不受材料性质的影响,在纳米材料的研发、生产、应用等领域发挥日益重要的作用。

多分散体系

多分散颗粒混合物是指组成颗粒大小、形状或分子量不同的混合物。这种混合物的粒度分布很难确定;混合物的大量光学特性,例如不透明度,并不能提供关于总体分布的详细信息。当颗粒尺寸减小到亚微米范围时,这一点尤其明显。典型的表征仪器,如动态光散射(DLS)和光学粒子跟踪不能分析高度多分散的混合粒子,而可以NanocoulterⅠ可以。

Ⅶ 制备脂质体的5种常用方法

目前，制备脂质体的方法较多，常用的有薄膜法、反相蒸发法、溶剂注入法和复乳法等，这些方法一般称为被动载药法，而H梯度法，硫酸铵梯度法一般被称为主动载药法。
脂质体是由磷脂分子在水相中通过疏水作用形成的，因此制备脂质体所强调的不是膜组装，而是如何形成适当大小、包封率高和稳定性高的囊泡。制备的方法不同，脂质体的粒径可从几十纳米到几微米，并且结构也不尽相同。
脂质体常用制备方法主要有薄膜分散法、反相蒸发法、注入法、超声波分散等。
在制备含药脂质体时，首先将药物溶于水相或有机相中，然后按适宜的方法制备含药脂质体，该法适于脂溶性强的药物，所得脂质体具有较高包封率。

Ⅷ 免疫脂质体的免疫脂质体

第一代免疫脂质体（IML)
是指连有单克隆抗体的脂质体。通过单克隆抗体与靶细胞的特异结合，将脂质体包载的药物导向靶组织，赋予脂质体主动靶向性。
第二代免疫脂质体
此技术包括PEG含有的长循环脂质体，使抗体或配体结合到脂质体表面。
第三代免疫脂质体
为了增加长效脂质体的靶向性，将抗体或其它配体连接于长效脂质体表面上的聚合物（如PEG)链的末端上，从而避免了PEG链对靶位识别的干扰，得到一种新型脂质体。
免疫脂质体具有制备工艺简便，无毒、无免疫原性及可被生物膜利用的特点，它携带、保护及释放药物的能力高于Mab（单克隆抗体），是现阶段抗体靶向治疗的研究热点。
脂质体的制法
目前较为成熟的脂质体制备技术主要有以下两种： 脂质体的高效低毒作用是通过体内实验得以验证的。采用药代动力学/药效动力学（PK/PD）模型系统，在这个系统中，PK参数用动力学实验数据分析法描述包封于脂质体的药物及未包封的药物在治疗部位的积蓄；而PD参数通过动物实验用来描述成活率及致死率，这个模型能够比较确切的预测和循环药物的体内释放率。

Ⅸ 请你利用所学的分子生物学知识设计一个实验方案

查找人胰岛素的基因序列，人工合成之后连接到酵母菌的质粒载体上，质粒上应有标记基因，培养并筛选连接成功的酵母菌，再进行培养，检测其产物是否为胰岛素，选择产物是胰岛素的酵母菌进行培养，收集所产胰岛素，分离纯化，实验验证，临床应用。

首先克隆人的胰岛素基因——与酵母载体连接构建酵母表达载体——将重组体转入酵母细胞中——在30度条件下培养即可得到大量含胰岛素的酵母细胞——破碎酵母细胞，提取胰岛素——纯化胰岛素蛋白即可得到大量胰岛素。

(9)脂质体分析主要用什么仪器扩展阅读：

①生物化学和生物物理学是用化学的和物理学的方法研究在分子水平，细胞水平，整体水平乃至群体水平等不同层次上的生物学问题。而分子生物学则着重在分子（包括多分子体系）水平上研究生命活动的普遍规律；

②在分子水平上，分子生物学着重研究的是大分子，主要是蛋白质，核酸，脂质体系以及部分多糖及其复合体系。而一些小分子物质在生物体内的转化则属生物化学的范围；