凝胶电泳测定条带的仪器是什么

『壹』 请问做琼脂糖凝胶电泳用什么仪器

Wealtec的GES或mini GES电泳槽，还需要交流转直流的供电装置-电泳仪（ELITE300/ELITE300 PLUS）

『贰』 琼脂糖凝胶电泳marker的作用

琼脂糖凝胶电泳marker的作用是分子标记。

DNA分子标记具有的优越性有：大多数分子标记为共显性，对隐性性状的选择十分便利；基因组变异极其丰富，分子标记的数量几乎是无限的；在生物发育的不同阶段，不同组织的DNA都可用于标记分析；分子标记揭示来自DNA的变异；

表现为中性，不影响目标性状的表达，与不良性状无连锁；检测手段简单、迅速。随着分子生物学技术的发展，DNA分子标记技术已有数十种，广泛应用于遗传育种、基因组作图、基因定位、物种亲缘关系鉴别、基因库构建、基因克隆等方面。

(2)凝胶电泳测定条带的仪器是什么扩展阅读

标记（Marker），染色体上一个可以被识别的区域（比如限制性内切酶的酶切点，基因的位置等）。标记的遗传能够被检测出来。标记可以是染色体上有表达功能的部分（比如基因），也可以是没有编码蛋白质功能但遗传特性能够被检测出来的部分。

蛋白marker可分为：

未预染的Marker即宽分子量蛋白标准、高分子量蛋白标准以及低分子量蛋白标准；

预染的Marker即单色预染和多色预染。

在westernBlot过程中，分子量Marker就像个螺丝钉一样虽然是个小细节，然而就是这样一个小细节对实验结果有着不可忽视的作用。

这个Western Blot参照家族的一员的作用主要是用来指示蛋白条带所对应的分子量大小，只有标准量精确无误，实验结果才有说服力，除此之外，蛋白标准还有表示转移成功或者蛋白在凝胶上的电泳程度等等的作用，所以选择正确的蛋白Marker也是western blot实验成功的必要条件之一。

『叁』 如何用琼脂糖凝胶电泳测定DNA片段大小其根据是什么

步骤:
1.
制备1%
琼脂糖凝胶
(大胶用70ml,小胶用50ml):
称取0.7
g(0.5
g)
琼脂糖
置于
锥形瓶
中,加入70
ml(50ml)1×TAE,
瓶口
倒扣小烧杯.
微波炉
加热煮沸3次至琼脂糖全部融化,摇匀,即成1.0%琼脂糖凝胶液.
2.
胶板制备:取
电泳槽
内的有机玻璃内槽(制胶槽)洗干净,晾干,放入制胶
玻璃板
.取透明
胶带
将玻璃板与内槽两端边缘封好,形成模子.将内槽置于水平位置,并在固定位置放好
梳子
.将冷却到65℃左右的琼脂糖凝胶液混匀小心地倒入内槽玻璃板上,使胶液缓慢展开,直到整个玻璃板
表面
形成均匀胶层.
室温
下静置直至
凝胶
完全凝固,垂直轻拔梳子,
取下
胶带,将凝胶及内槽放入电泳槽中.添加
1×TAE
电泳缓冲液
至没过胶板为止.
3.
加样:在点样板或parafilm上混合DNA
样品
和上样缓冲液,上样缓冲液的最终
稀释倍数
应不小于1X.用10
ul微量移液器分别将样品加入胶板的样品
小槽
内,每加完一个样品,应更换一个加样头,以防污染,加样时勿碰坏样品孔周围的凝胶面.(注意:加样前要先记下加样的顺序).
4.
电泳:加样后的凝胶板立即通电进行电泳,电压60-100V,样品由
负极
(
黑色
)向
正极
(红色)方向移动.电压升高,琼脂糖凝胶的有效分离范围降低.当
溴酚蓝
移动到距离胶板下沿约1cm处时,停止电泳.
5.电泳完毕后,取出凝胶,用含有0.5
ug/ml的
溴化乙锭
1×TAE
溶液
染色约20
min,再用
清水
漂洗10
min.
6.观察照相:在
紫外灯
下观察,DNA存在则显示出红色
荧光
条带,采用
凝胶成像系统
拍照保存.
原理
:
借助琼脂糖凝胶的
分子筛
作用，
核酸
片段因其
分子
量或分子
形状
不同，电泳移动速度有差异而分离。

『肆』 琼脂糖凝胶电泳检测DNA 电泳所得各条带都是什么

溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂，用于观察琼脂糖（agarose）和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA。溴化乙锭用标准302nm 紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号，可用Polaroid 底片或带CCD成像头的凝胶成像处理系统拍摄。
观察琼脂糖凝胶中DNA最常用的方法是利用荧光染料溴化乙锭进行染色，溴化乙锭含有一个可以嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团。它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中，大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。当染料分子插入后，其平面基团与螺旋的轴线垂直并通过范德华力与上下碱基相互作用。这个基团的固定位置及其与碱基的密切接近，导致与DNA结合的染料呈现荧光，其荧光产率比游离溶液中染料有所增加。DNA吸收254nm处的紫外辐射并传递给染料，而被结合的染料本身吸收302nm和366nm的光辐射。这两种情况下，被吸收的能量在可见光谱红橙区的590nm处重新发射出来。由于溴化乙锭-DNA复合物的荧光产率比没有结合DNA的染料高出20-30倍，所以当凝胶中含有游离的溴化乙锭（0.5ug/ml）时，可以检测到少至10ng的DNA条带。
溴化乙锭可以用来检测单链或双链核酸（DNA或RNA）。但是染料对单链核酸的亲和力相对较小，所以其荧光产率也相对较低。事实上，大多数对单链DNA或RNA染色的荧光时通过染料结合到分子内形成较短的链内螺旋产生的。
尽管在该染料存在的情况下，线状DNA的电泳迁移率约降低15%，因此，当需要知道DNA片段的准确大小（如DNA限制酶酶切图谱的鉴定），凝胶应该在无EB情况下电泳，电泳结束后用EB染色。染色完毕后，通常不需要脱色。但是在检测小量DNA（小于10ng）片段时，通常要将染色后的凝胶进行脱色

『伍』 琼脂糖凝胶电泳具体操作步骤是什么需要注意什么事项

一、操作步骤：

1、电泳方法

一般的核酸检测只需要琼脂糖凝胶电泳就可以；如果需要分辨率高的电泳，特别是只有几个bp的差别应该选择聚丙烯酰胺凝胶电泳；用普通电泳不合适的巨大DNA链应该使用脉冲凝胶电泳。

2、凝胶浓度

对于琼脂糖凝胶电泳，浓度通常在0.5～2%之间，低浓度的用来进行大片段核酸的电泳，高浓度的用来进行小片段分析。低浓度胶易碎，小心操作和使用质量好的琼脂糖是解决办法。

3、缓冲液

常用的缓冲液有TAE和TBE，而TBE比TAE有着更好的缓冲能力。电泳时使用新制的缓冲液可以明显提高电泳效果。

4、电压和温度

电泳时电场强度不应该超过20V/cm，电泳温度应该低于30℃，对于巨大的DNA电泳，温度应该低于15℃。

5、DNA样品的纯度和状态

注意样品中含盐量太高和含杂质蛋白均可以产生条带模糊和条带缺失的现象。乙醇沉淀可以去除多余的盐，用酚可以去除蛋白。

6、DNA的上样

正确的DNA上样量是条带清晰的保证。注意太多的DNA上样量可能导致DNA带型模糊，而太小的DNA上样量则导致带信号弱甚至缺失。

7、Marker的选择

DNA电泳一定要使用DNA Marker或已知大小的正对照DNA来估计DNA片段大小。Marker应该选择在目标片段大小附近ladder较密的，这样对目标片段大小的估计才比较准确。

8、凝胶的染色和观察

实验室常用的核酸染色剂是溴化乙锭（EB），染色效果好，操作方便，但是稳定性差，具有毒性。注意观察凝胶时应根据染料不同使用合适的光源和激发波长，如果激发波长不对，条带则不易观察，出现条带模糊的现象。

二、注意事项：

1、巨大的DNA链用普通电泳可能跑不出胶孔导致缺带。

2、高浓度的胶可能使分子大小相近的DNA带不易分辨，造成条带缺失现象。

3、电泳缓冲液多次使用后，离子强度降低，pH值上升，缓冲性能下降，可能使DNA电泳产生条带模糊和不规则的DNA带迁移的现象。

4、如果电泳时电压和温度过高，可能导致出现条带模糊和不规则的DNA带迁移的现象。特别是电压太大可能导致小片段跑出胶而出现缺带现象。

5、变性的DNA样品可能导致条带模糊和缺失，也可能出现不规则的DNA条带迁移。在上样前不要对DNA样品加热，用20mM NaCl缓冲液稀释可以防止DNA变性。

6、太多的DNA上样量可能导致DNA带型模糊，而太小的DNA上样量则导致带信号弱甚至缺失。

(5)凝胶电泳测定条带的仪器是什么扩展阅读

琼脂糖凝胶具有网络结构，物质分子通过时会受到阻力，大分子物质在涌动时受到的阻力大，因此在凝胶电泳中，带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量，而且还取决于分子大小，这就大大提高了分辨能力。

但由于其孔径相比于蛋白质太大，对大多数蛋白质来说其分子筛效应微不足道，现广泛应用于核酸的研究中。

蛋白质和核酸会根据pH不同带有不同电荷，在电场中受力大小不同，因此跑的速度不同，根据这个原理可将其分开。电泳缓冲液的pH在6~9之间，离子强度0.02~0.05为最适。常用1%的琼脂糖作为电泳支持物。

琼脂糖凝胶约可区分相差100bp的DNA片段，其分辨率虽比聚丙烯酰胺凝胶低，但它制备容易，分离范围广。普通琼脂糖凝胶分离DNA的范围为0.2-20kb，利用脉冲电泳，可分离高达10^7bp的DNA片段。

DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷，在电场中向正极移动。由于糖-磷酸骨架在结构上的重复性质，相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷，因此它们能以同样的速率向正极方向移动。

『陆』 聚丙烯酰胺凝胶电泳条带是什么意思

许多分子，如氨基酸、多肽、核苷酸等都具有可电离基团，在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动，这就是电泳，由于各种离子的移动速率不同，就把各种不同物质分开，前后分成了一排一排，在光学仪器下便显示为一条条的光带，这就是电泳条带，人们可以根据条带的宽窄和位置利用已有的资料或软件，来分析各种物质的成分和含量。

『柒』 生化实验做聚丙烯酰胺凝胶电泳时剥胶步骤时，材料说注意测量，是测量什么呀

对的。用直尺分别量取各个标准分子量的条带到凝胶顶端的距离，计算各个条带的相对迁移率（
mR =样品迁移距离（cm）/染料迁移距离（cm）），然后 以标准蛋白质分子量的对数对相对迁移率作图，得到标准曲线；最后根据待测样品的相对迁移率，从标准曲线上查出其分子量。

『捌』 sds凝胶电泳用什么marker

sds凝胶电泳用蛋白marker、彩虹蛋白marker就可以。
蛋白marker可分为：
一、未预染的Marker即宽分子量蛋白标准、高分子量蛋白标准以及低分子量蛋白标准;
二、预染的Marker即单色预染和多色预染。
在western Blot过程中，分子量Marker就像个螺丝钉一样没虽然是个小细节，然而就是这样一个小细节对实验结果有着不可忽视的作用。这个 Western Blot参照家族的一员的作用主要是用来指示蛋白条带所对应的分子量大小，只有标准量精确无误了，实验结果才有说服力，除此之外，蛋白标准还有表示转移成功或者蛋白在凝胶上的电泳程度等等的作用，所以选择正确的蛋白Marker也是western blot实验成功的必要条件之一。