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破碎大肠杆菌用什么仪器

发布时间:2022-05-17 09:05:05

㈠ 大肠杆菌检测需要哪些仪器及耗材

常用仪器:灭菌锅、恒温培养箱、鼓风干燥箱,冰箱,电子天平,均质器,菌落计数器,PH计,显微镜,超净工作台。
产品名称
无菌吸管、锥形瓶、玻璃培养皿、pH试纸、试管、烧杯、量筒、试管刷、洗耳球、试管架、均质袋、移液器,酒精灯、接种环。
平板计数琼脂培养基....

㈡ 做大肠杆菌 沙门氏菌 葡萄球菌 巴氏杆菌的实验检测 一般都用什么方法 和仪器设备 请说的详细些

大肠埃希菌(Escherichia coli)
取供试液10ml(相当于供试品1g、1ml、10cm2),直接或处理后接种至适量(不少于100ml)的胆盐乳糖培养基中,培养18~24小时,必要时可延长至48小时。
取上述培养物0.2ml,接种至含5mlMUG培养基的试管内,培养,于5小时,24小时在366nm紫外线下观察,同时用未接种的MUG培养基作本底对照。若管内培养物呈现荧光,为MUG阳性;不呈现荧光,为MUG阴性。观察后,沿培养管的管壁加入数滴靛基质试液,液面呈玫瑰红色,为靛基质阳性;呈试剂本色,为靛基质阴性。本底对照应为MUG阴性和靛基质阴性。
如MUG阳性、靛基质阳性,判供试品检出大肠埃希菌;如MUG阴性、靛基质阴性,判供试品未检出大肠埃希菌;如MUG阳性、靛基质阴性,或MUG阴性、靛基质阳性,则应取胆盐乳糖培养基的培养物划线接种于曙红亚甲蓝琼脂培养基或麦康凯琼脂培养基的平板上,培养18~24小时。

若平板上无菌落生长、或生长的菌落与表1所列的菌落形态特征不符,判供试品未检出大肠埃希菌。若平板上生长的菌落与表1所列的菌落形态特征相符或疑似,应进行分离、纯化、染色镜检和适宜的生化试验,确认是否为大肠埃希菌。
表1 大肠埃希菌菌落形态特征
培养基 菌落形态
曙红亚甲蓝琼脂 显蓝黑色、浅紫色、蓝紫色或粉红色,菌落中心呈深紫色或无明显暗色中心,圆形,稍凸起,边缘整齐,表面光滑,湿润,常有金属光泽
麦康凯琼脂 鲜桃红色或微红色,菌落中心呈深桃红色,圆形,扁平,边缘整齐,表面光滑,湿润

沙门菌(Salmonella)
取供试品10g或10ml,直接或处理后接种至适量(不少于200ml)的营养肉汤培养基中,用匀浆仪或其他适宜方法混匀,培养18~24小时。
取上述培养物1ml,接种于10ml四硫磺酸钠亮绿培养基中,培养18~24小时后,分别划线接种于胆盐硫乳琼脂(或沙门、志贺菌属琼脂)培养基和麦康凯琼脂(或曙红亚甲蓝琼脂)培养基的平板上,培养18~24小时(必要时延长至40~48小时)。若平板上无菌落生长,或生长的菌落不同于表4所列特征,判供试品未检出沙门菌。
若平板上生长的菌落与表4所列的菌落形态特征相符或疑似,用接种针挑选2~3个菌落分别于三糖铁琼脂培养基高层斜面上进行斜面和高层穿刺接种,培养18~24小时,如斜面未见红色、底层未见黄色;或斜面黄色、底层无黑色,判供试品未检出沙门菌。否则,应取三糖铁琼脂培养基斜面的培养物进行适宜的生化试验和血清凝集试验,确认是否为沙门菌。
表4 沙门菌菌落形态特征
培养基 菌落形态
胆盐硫乳琼脂 无色至浅橙色,半透明,菌落中心带黑色或全部黑色或无黑色
沙门、志贺菌属琼脂 无色至淡红色,半透明或不透明,菌落中心有时带黑褐色
曙红亚甲蓝琼脂 无色至浅橙色,透明或半透明,光滑湿润的圆形菌落
麦康凯琼脂 无色至浅橙色,透明或半透明,菌落中心有时为暗色。

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)
取供试液10ml(相当于供试品1g、1ml、10cm2),直接或处理后接种至适量(不少于100ml)的亚硫酸钠(钾)肉汤(或营养肉汤)培养基中,培养18~24小时,必要时可延长至48小时。取上述培养物,划线接种于卵黄氯化钠琼脂培养基或甘露醇氯化钠琼脂培养基的平板上,培养24~72小时。若平板上无菌落生长或生长的菌落不同于表5所列特征,判供试品未检出金黄色葡萄球菌。
表5 金黄色葡萄球菌菌落形态特征
培养基 菌落形态
甘露醇氧化钠琼脂 金黄色,圆形凸起,边缘整齐,外围有黄色环,菌落直径0.7~1mm
卵黄氯化钠琼脂 金黄色,圆形凸起,边缘整齐,外围有卵磷脂分解的乳浊圈,菌落直径1~2mm
若平板上生长的菌落与表5所列的菌落特征相符或疑似,应挑选2~3个菌落,分别接种于营养琼脂培养基斜面上,培养18~24小时。取营养琼脂培养基的培养物进行革兰染色,并接种于营养肉汤培养基中,培养18~24小时,作为浆凝固酶试验。
血浆凝固酶试验 取灭菌小试管3支,各加入血浆和无菌水混合液(1:1)0.5ml,再分别加入可凝固株的营养肉汤培养物(或由营养琼脂培养基斜面培养物制备的浓菌悬液)0.5ml、金黄色葡萄球菌营养肉汤培养物(或由营养琼脂培养基斜面培养物制备的浓菌悬液)0.5ml、营养肉汤或0.9%无菌氯化钠溶液0.5ml,即为试验管、阳性对照管和阴性对照管。将3管同时培养,3小时后开始观察直至24小时。阴性对照管的血浆应流动自如,阳性对照管血浆应凝固,若试验管血浆凝固者为血浆凝固酶试验阳性,否则为阴性。如阳性对照管或阴性对照管不符合规定时,应另取制备血浆,重新试验。
若上述疑似菌为非革兰阳性球菌、血浆凝固酶试验阴性,判供试品未检出金黄色葡萄球菌。

㈢ 观察大肠杆菌时应该用什么显微镜

不行,因为一般显微镜的我们使用的目镜是10*,高倍物镜是40*,所以高倍镜放大倍数是400倍左右,而大肠杆菌大小一般为大小0.5~3微米,至少要放大1000多倍才可以看清,而且用光学显微镜时由于光线的限制,其实是很难看得清的。你要观察大肠杆菌时,最好能将它作为临时切片。
用的仪器嘛,最好能够用电子显微镜,肯定能看得清楚。

㈣ 如何让大肠杆菌破碎

在低温下超声波破碎,效果还是很好的

㈤ 怎么除去污水中的大肠杆菌,需要用到什么药品和仪器

煮沸半小时。
或者用次氯酸钠处理。
或者用乙醇处理。
或者超声。
或者用碱处理。
或者用酸处理。
都可以的,看你的需要而定。很多种方法。

㈥ 做饮料大肠杆菌和细菌总落数的实验需要哪些仪器

就是培养细菌的常用仪器啊···平板,涂布器,样品经梯度稀释后涂布接种,在37℃培养后计数,然后查在相应稀释倍数下规定的菌落数比较一下就行了···

㈦ 化验水里面的大肠杆菌都用什么设备或仪器,急!急!谢谢!

恒温培养箱、恒温水浴锅、冰箱、托盘天平(感量0.1克)、培养皿、刻度吸管、锥形瓶。

㈧ 建微生物实验室都需要什么仪器(主要做大肠杆菌、霉菌等)

高压灭菌锅、生化培养箱、干燥箱、恒温水浴锅、显微镜、万分之一的天平、0.1的台秤 称量纸、
还有密闭的无菌室 还有很多玻璃器皿
除了这些 另外你的无菌室里面必须配有紫外灯杀菌用的 我也做过一段时间的面包中 大肠杆菌和细菌总数水分的测定

㈨ 如何破碎大肠杆菌细胞且让蛋白有活性啊

可以用反复冻融法,-20摄氏度冷冻,4摄氏度复融。反复几次,即可。但是需要注意的是,具体条件需要自己摸索。
还有一种方法,将E.Coli制成部分原生质体,然后采用低渗状态,让细胞涨破。
如果觉得还不行,还可结合各种表面活性剂,如NP-40等
呵呵!最好的建议还是找一台超声波细胞破碎仪,因为条件是现成的不需要花大力气摸条件………………
……………………
详细资料请参考:
细胞活性/细胞增殖/细胞毒性分析:
http://proct.bio1000.com/100112/

㈩ 大肠杆菌的检测方法

多管发酵法。

多管发酵法是一种检测水体中大肠杆菌的传统方法,这种方法是在44.5℃的含有荧光底物的培养基上连续培养24h,而后能产生分解荧光底物——葡萄糖醛酸酶,从而释放出荧光产物,进而使培养基在紫外光照射下产生特征荧光。此方法可被用来对原样品中的菌落数作统计学估计。

在单料或双料乳糖胆盐发酵管内发酵,分离培养试验,利用伊红美蓝培养皿分离,接着是在乳糖发酵管中进行二次发酵,最后通过芽孢染色、革兰氏染色、显微镜观察等来完成。多管发酵法对试验条件要求不高,成本低,但是检测时间较长,容易受其他条件干扰,进而影响到测定结果的精确度。

(10)破碎大肠杆菌用什么仪器扩展阅读:

注意事项:

1、检样时注意无菌操作。

2、稀释时采用的稀释液可以用磷酸盐缓冲液或生理盐水,接种时可采用九管法,设置三个梯度,分别为0.1g/mL、0.01g/mL、0.001g/mL,每一个稀释度的试管应充分混匀。

3、每次实验需要有阴性对照。

4、使用小倒管培养基配制时,为排净气泡,灭菌时不要把试管的盖子盖的太紧,灭菌后注意观察一下倒管中的气体是否排完全、

5、高压灭菌后等高压灭菌锅的压力表达到0,取出培养基放到冰箱冷却,效果会比较好。

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