㈠ 蛋白质的盐析
稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂,通常用量是原材料体积的1-5倍,提取时需要均匀的搅拌,以利于蛋白质的溶解。提取的温度要视有效成份性质而定。一方面,多数蛋白质的溶解度随着温度的升高而增大,因此,温度高利于溶解,缩短提取时间。但另一方面,温度升高会使蛋白质变性失活,因此,基于这一点考虑提取蛋白质和酶时一般采用低温(5度以下)操作。为了避免蛋白质提以过程中的降解,可加入蛋白水解酶抑制剂(如二异丙基氟磷酸,碘乙酸等)。
下面着重讨论提取液的pH值和盐浓度的选择。
1、pH值
蛋白质,酶是具有等电点的两性电解质,提取液的pH值应选择在偏离等电点两侧的pH 范围内。用稀酸或稀碱提取时,应防止过酸或过碱而引起蛋白质可解离基团发生变化,从而导致蛋白质构象的不可逆变化,一般来说,碱性蛋白质用偏酸性的提取液提取,而酸性蛋白质用偏碱性的提取液。
2、盐浓度
稀浓度可促进蛋白质的溶,称为盐溶作用。同时稀盐溶液因盐离子与蛋白质部分结合,具有保护蛋白质不易变性的优点,因此在提取液中加入少量NaCl等中性盐,一般以0.15摩尔。升浓度为宜。缓冲液常采用0.02-0.05M磷酸盐和碳酸盐等渗盐溶液。
㈡ 如何在盐析和透析操作中维持蛋白质的各种活性
盐析和透析是利用蛋白质的物理化学性质,以非色谱的方法进行纯化,克服色谱方法纯化贻贝粘蛋白设备和材料成本高的问题。整个操作均在冰水浴中进行,这样可以保证整个盐析和透析操作中的酶不会有太多的分解。
用蒸馏水将透析液用半透膜过滤,滤过的液体进入烧杯,用硫酸钡检验滤液,如果检测到硫酸根存在,重复以上操作直到滤液不产生沉淀。

(2)蛋白质盐析需要什么仪器扩展阅读:
向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后,可以降低蛋白质的溶解度,使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作盐析,是物理变化,可复原。向某些蛋白质溶液中加入某些重金属盐,可以使蛋白质性质发生改变而凝聚,进而从溶液中析出,这种作用叫作变性,性质改变,是化学反应,无法复原。
㈢ 常有的蛋白浓缩方法有哪些
蛋白浓缩方法基本有: 丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸铵沉淀法;(低温)有机溶剂沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超滤法;透析法;离子交换层析和冷冻干燥法…… 1.丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 试验要求的仪器简单,但是常常导致蛋白质变性。 2.免疫沉淀法:得有特异性抗体! 3.硫酸铵沉淀法:利用高浓度盐将蛋白质析出(盐析),选择硫酸按是因为:盐析有效性,pH范围广,溶解度高,溶液散热少,经济! 4.(低温)有机溶剂沉淀法:强调低温(0-4度以下)是因为10度时蛋白会在有机溶剂中变性,可用乙醇,丙酮……注意:Mg2+离子,pH值 5.聚乙二醇沉淀法:使用PEG时旨在个别情况下才会是蛋白质稍有变性!他溶解是散热低,形成沉淀的平衡时间短,通常达到30%时蛋白质就会达到最大量的沉淀! 6.超滤法:主要针对小体积蛋白质溶液(几ml)此法更不易引起变性!不过得有浓缩器,不是哪个实验室都有的! 7.透析法:主要用于更换蛋白质的缓冲液!的有透析袋!不需要特殊的仪器! 8.离子交换层析:可用阴离子交换树脂进行浓缩! 9.冷冻干燥法:在冷冻状态下让扬品种的液体升华 参考网址on http://www.bio1000.com/experiment/biochemical/351804.html
㈣ 蛋白质盐析实验
蛋白质盐析一般是指溶液中加入无机盐类
(
轻金属盐,如nacl,(nh4)2so4等)
而使蛋白质
溶解度
降低而析出的过程。
㈤ 蛋白质的盐析需要的实验仪器和药品
超级简单……主要看你怎么做。
常见的实验流程是往蛋白质溶液里加入盐的固体或者饱和盐溶液,振荡观察有无蛋白质沉淀析出。
实验仪器:烧杯(装蛋白质溶液,用其他功能类似的东西也行,比如锥形瓶或者试管)。如果用饱和盐溶液需要一个滴瓶或者细口瓶来装盐溶液,需要量筒来计量;如果是盐固体需要药匙来取盐。
药品:蛋白质溶液,中性盐。这个盐具体起来可以是硫酸铵,氯化钠或者氯化铵硫酸钠什么的,有很多种。
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顺便,楼下答案是胡扯。专业术语里没有“变质”这种说法。
㈥ 蛋白质盐析盐析
因为蛋白质是亲水性大分子,所以在水溶液中有双电层结构,来保证分子的溶解度平衡并稳定存在。当加入盐时,盐会电离成离子态,离子的电性破坏了蛋白质的双电层结构,从而使其沉降,析出。加入浓酸和浓碱是不行的,苛性的环境将使蛋白质变性。怎么样,清楚吧,呵呵,学化学的。把分给我吧。
㈦ 建立一个蛋白分离纯化实验室需要什么设备
1. 前处理
把蛋白质从原来的组织或溶解状态释放出来,保持原来的天然状态,并不丢
失生物活性。常用的方法:匀浆器破碎、超生波破碎、纤维素酶处理以及溶菌酶等。
超声波破碎法:当声波达到一定频率时,使液体产生空穴效应使细胞破碎的技术。超声波引起的快速振动使液体局部产生低气压,这个低气压使液体转化为气体
,即形成很多小气泡。由于局部压力的转换,压力重新升高,气泡崩溃。崩溃的气泡产生一个振动波并传送到液体中,形成剪切力使细胞破碎。
2. 粗分级
分离可用盐析、等电点沉淀和有机溶剂分级分离等方法。这些方法的特点是简便、处理量大,
3. 细分级
样品的进一步纯化。样品经粗分离以后,一般体积较小,杂蛋白大部分已被除去。进一步纯化,一般使用层析法包括凝胶过滤、离子交换层析、吸附层析以及亲和层析等。必要时还可选择电泳、等电聚焦等作为最后的纯化步骤。
结晶是最后的一步
分离纯化的方法:1.分子大小;2.溶解度;3.电荷;4.吸附性质;5.对配体分子的生物亲和力等。
(一)根据分子大小不同的纯化方法
1. 透析
利用蛋白质分子不能通过半透膜,使蛋白质和其它小分子物质如无机盐、单糖等分开。
2. 密度梯度离心。
蛋白质颗粒的沉降系数不仅决定于它的大小,而且也取决于它的密度。
3. 凝胶过滤
利用蛋白质分子大小,因为凝胶过滤所用的介质是凝胶珠,其内部是多孔的网状结构。当不同的分子大小的蛋白质分子流过凝胶层析柱时,比凝胶珠孔径大的分子进入珠内的网状结构,而被排阻在凝胶珠之外随溶剂在凝胶珠之间的空隙向下移动并最先流出柱外,比网孔小的分子能不同程度底自由出入凝胶珠的内外,由于不同大小的分子所经路径不同而得到分离。大分子先被洗脱下来。小分子后被洗脱
㈧ 蛋白质盐析条件是什么变性的条件是什么
蛋白质盐析条件是:加入无机可溶性盐或者其水溶液。
变性的条件是:受热、高能射线,紫外线、强酸、强碱、重金属盐、某些有机物。
㈨ 什么是蛋白质的盐析
盐析(salting out)是指在蛋白质水溶液中加入中性盐,随着盐浓度增大而使蛋白质沉淀出来的现象。
中性盐是强电解质,溶解度又大,在蛋白质溶液中,一方面与蛋白质争夺水分子,破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜;另一方面又大量中和蛋白质颗粒上的电荷,从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出。
常用的中性盐有硫酸铵、‘氯化钠、硫酸钠等,但以硫酸铵为最多。
得到的蛋白质一般不失活,一定条件下又可重新溶解,故这种沉淀蛋白质的方法在分离、浓缩,贮存、纯化蛋白质的工作中应用极广。

(9)蛋白质盐析需要什么仪器扩展阅读。
盐析剂与水结合愈强烈,盐析效应愈强。
由于水合数与离子的大小有关,即离子愈小,水合数就愈大,盐析效应也愈强。
盐析剂所含阳离子半径愈小,电荷愈多,则对被盐析离子的水化层影响愈大,使被盐析离子脱水愈易,其盐析效应愈强。
所以化工生产中常用的盐析剂多是离子势较大的阳离子Li+、Al3+、Fe3+、Mg2+、Sn2+等形成的盐。
我们选择了这些阳离子所形成的氯化物和硝酸盐, 并通过探索性实验, 确定选用一种较合适的盐析剂。