1. 常用的色谱仪器有哪两大类,各自有何特点
色谱仪器分为气相色谱和液相色谱,还有气相色谱质谱联用仪等;
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那么,高效液相色谱仪(HPLC,)如何选型?
高效液相色谱仪的选型,归结起来就是2个问题:如何确定高效液相色谱仪的配置?如何选择高效液相色谱仪的品牌?
今天我们就来谈谈第一问题,如何确定高效液相色谱仪的配置?
高效液相色谱仪可以分为5大部分:高压输液泵单元、进样器单元、分离单元、检测器单元、色谱数据处理单元,下面我们来逐一分析,谈谈高效液相色谱仪的选型细则。
1、高压输液泵单元的配置选型:
高效液相色谱仪的高压输液方式分为等度方式、梯度方式两大类别。
等度方式:在色谱分析过程中,流动相中各个组分的比例不随时间发生变化,例如某次分析过程中流动相中甲醇与水的比例是50:50一直保持不变,那么这种就叫做等度方式。
梯度方式:在色谱分析过程中,流动相中各个组分的比例随时间发生发生变化,例如某次分析过程中,随着时间的推移,流动相中其中一种(或几种)溶剂比例逐渐增大、另一种或几种溶剂的比例逐渐减少,最终那么这种输液方式就叫做梯度方式。
相应以上2种流动相输液方式,有等度泵和梯度泵这两种配置方式。
等度泵:一般采用单泵来作为高压输液泵单元,这是一种最简单最经济的配置方式。
梯度泵:又分为高压梯度、低压梯度。
高压梯度:常用的是二元高压梯度泵,也有三元高压梯度泵;我们通常所说的双泵,就是指“二元高压梯度泵”。有几元高压,则必须有几台泵;高压梯度泵单元,除了几台高压泵之外,还需要有配套的流动相混合装置(通常采用混合器);由于是高压混合的梯度方式,所以通常不太会产生气泡,脱气机通常可以不用配备。
低压梯度:与高压梯度“有几元高压就用几台泵”所不同的是,低压梯度只需要一台高压泵,但是在高压泵的前端,需要加上比例阀(有的公司称为低压梯度单元),通过比例阀来调节几种不同流动相进入高压泵的比例,从而实现梯度淋洗。因为低压下各种不同溶剂混合时可能产生吸热或放热,所以对于低压梯度泵单元来说,流动相脱气机与混合器一样,都是必不可少的。
高效液相色谱仪(HPLC)的高压输液泵单元的选型,主要是根据所检测项目方法的所需来定,方法中流动相输液是等度方式,那么等度泵(单泵)即可满足需求;如果方法中规定需要用到梯度淋洗输液方式,那么就需要选择梯度泵了。
在一些有HPLC分析方法开发任务的单位,为了满足将来可能的方法开发需要,即便暂时不需要梯度泵,也往往会配备梯度泵以利拓展方法。
2、进样器单元的配置选型
高效液相色谱仪(HPLC)的进样器单元,有2种配置可供选择:手动进样器、自动进样器。
手动进样器:无论是国产还是进口大牌,例如沃特世(Waters)、岛津(Shimadzu)、安捷伦(Agilent),世界上绝大多数公司均采用美国Rheodyne公司生产的六通进样阀作为高效液相色谱仪的手动进样阀。
自动进样器:自动进样器的最大优点就是,能极大的提高设备使用效率、减少人力成本。例如一个公司的HPLC使用部门,可以在下午下班之前,把未做完的50个样品都放进自动进样器内,然后设定分析程序、仪器清洗程序、关机程序,然后所有的人都可以下班,无需派人值守,第二天早上打印图谱、上报数据即可。
3、分离单元(高效液相色谱柱)
色谱柱是高效液相色谱仪的核心部件。
色谱法最核心的机制就是把样品中各个组分进行有效分离,而实现分离靠的就是色谱柱。
色谱柱选择时需要考虑四大参数:固定相类型(填料种类)、柱长、柱内径、填料粒度。
固定相类型:目前主要有硅胶基质的ODS(碳十八)、氨基、氰基、苯基、硅胶等色谱柱,以及高分子聚合物的固定相填料。目前ODS(碳十八)应用最为广泛,高效液相色谱法大约有80%分离采用的就是ODS(碳十八)填料。
柱长:色谱柱的长度越长,分离效果越好,但是背压也就越大、柱子价格就会越贵。目前柱长应用较多的是375px、500px、625px这三个长度,尤其以625px最多。
柱内径:其它几个柱参数不变的情况下,高效液相色谱柱的内径越小,分离度越好(分离度越高),但是柱负载量越小。常用柱内径是3.9mm、4.6mm、6.0mm,尤其以4.6mm为最常用。
填料粒径:根据色谱法的速率理论,填料粒径越小,分离效果越好;但是填料粒度越小,在同样的流动相输送流速下,对于高效色谱仪高压泵的背压也就越大,对于高压泵的加压能力、密封性能也就要求越高。高效液相色谱仪一般采用3微米、5微米或10微米的填料粒径,而3微米以下粒径的填料,通常应用于超高效液相色谱仪。高效液相色谱法应用最多的是5微米粒径的填料。
分离单元还有另外两个问题需要掂量:是否需要配预柱(保护柱)、是否需要配柱温箱。
预柱(保护柱):预柱(保护柱)的存在,会加大色谱死体积,会降低柱效,所以除非样品特别脏、或有特别多的高分子物质会堵塞分析柱,否则尽量不用预柱(保护柱)。
柱温箱:因为高效液相色谱法对于温度的些微波动并不特别敏感,除了一些对于柱温稳定性要求特别高的分离,高效液相色谱法很多情况下并不需要配置柱温箱。当然,如果采购预算足够多,安装柱温箱确实能有更好的色谱出峰时间重复性。
4、检测器单元的配置选型
高效液相色谱仪的检测器有很多种,最常见的是紫外检测器,还有示差检测器、荧光检测器、二极管阵列检测器、蒸发光散射检测器等等。
紫外检测器:是一种选择性检测器,几乎是所有HPLC检测器里面价格最便宜、应用最广泛的一种检测器,适合于测定有紫外吸收的物质(带苯环、杂环、双键叁键的物质)。紫外检测器的特点是灵敏度很高、适用性很广泛。
示差检测器:是一种通用型检测器,但是它的灵敏度低于紫外检测器,而且它对于流速比较敏感。示差检测器主要用来对一些没有紫外吸收的物质进行检测,例如糖类、高分子聚合物等等。
荧光检测器:仅仅适合于在紫外光照射下能发射荧光的物质,例如维生素A、维生素D、黄曲霉毒素等检测。高效液相色谱仪的荧光检测器的特点是灵敏度高、但适用范围较窄。
二极管阵列检测器:是紫外检测器的一个变种,二极管阵列检测器的特点是灵敏度较紫外检测器低、但是能做三维图谱,特别适合于医药研发类的应用。
蒸发光散射检测器:蒸发光散射检测器是一种新型的通用型检测器,未来的趋势是可以替代示差检测器等来检测无紫外吸收的物质,但是目前价格非常昂贵。
5、色谱数据处理单元
高效液相色谱仪的色谱数据处理单元,有数据处理机和色谱工作站两种,随着电脑的普及与应用,色谱数据处理机已经渐渐被淘汰,目前以色谱工作站为主流。
色谱工作站又分为可否反控两大类。
可反控工作站:不但能记录与处理色谱数据,而且可以反控高效液相色谱仪的各个组成单元。因为一些控制指令接口与数据传输的技术性问题,可反控工作站一般是各大仪器厂商自行研发与设计的,互相之间不能通用。
不可反控工作站:仅能记录与处理色谱数据,不可反控高效液相色谱仪。不可反控工作站通常是外挂式的,包含硬件和软件两大部分,硬件部分主要是一个A/D转换器,将高效液相色谱仪传输来的模拟信号转换成数字信号,再输进计算机;软件部分主要功能就是把硬件传输来的数字信号转换成图谱并进行积分计算等操作。
不可反控工作站的优点是通用性强,但是不可反控仪器、不便进行自动化操作。
二极管阵列检测器必须要用特殊的三维色谱软件。
综上所述,搞清楚了高效液相色谱仪的高压输液泵单元、进样器单元、分离单元、检测器单元、色谱数据处理单元的选型考量细则,那么我们才可以在尽量节约经费的情况下,选到我们所需要的仪器配置了。
2. 元素分析检测分析的仪器有哪些
元素分析仪是一种能分析物质所含元素的一种仪器,能利用先进的技术精密地分析物质,已广为使用。可检测普碳钢、低合金钢、高合金钢、生铸铁、球铁、合金铸铁等多种材料中的Si、Mn、P、Cr、Ni、Mo、Cu、Ti等多种元素。元素分析仪作为一种实验室常规仪器,可同时对有机的固体、高挥发性和敏感性物质中C、H、N、S、元素的含量进行定量分析测定,在研究有机材料及有机化合物的元素组成等方面具有重要作用。可广泛应用于化学和药物学产品,如精细化工产品、药物、肥料、石油化工产品碳、氢、氧、氮元素含量,从而揭示化合物性质变化,得到有用信息,是科学研究的有效手段。元素分析仪化验的五大元素是特指钢铁中的碳、硫、硅、磷、锰五种元素。
元素分析是用来鉴定被测物质由哪些元素(或离子)所组成,这类方法称为定性分析法;用于测定各组分间(各种化学成分)量的关系(通常以百分比表示),称为定量分析法。物质的五大元素分析所采用的化学分析方法可分为经典化学分析和仪器分析两类。前者基本上采用化学方法来达到分析的目的,后者主要采用化学和物理方法(特别是的测定阶段常应用物理方法)来获取结果,这类分析方法中有的要应用较为复杂的特定仪器。发展迅速,且各种分析工作绝大部分是应用仪器分析法来完成的,但是经典的化学分析方法仍有其重要意义。有些大型精密仪器测得的结果是相对值,而五大元素分析仪器的校正和校对所需要的标准参考物质一般是用准确的经典化学分析方法测定的。因此,仪器分析法与化学分析法是相辅相成的,很难以一种方法来完全取代另一种。
3. 食品检测实验室一般应配备哪些仪器设备
凯氏定氮仪,分光光度计,液相色谱仪,荧光检测器。
酸度,可溶性糖,淀粉,版NaCl等理化参数,可选权择滴定的方法基本就是滴定管等,不需要仪器。
蛋白质,亚硫酸盐等需要蒸馏装置,蛋白质最好买个凯氏定氮仪。
硝酸盐、亚硝酸盐等添加剂用可见分光光度计
山梨酸、苯甲酸、糖精钠等添加剂一般用液相色谱仪uv检测器就可以
氨基甲酸脂类农药可用液相色谱仪-荧光检测器。
有机氯农药可以用GC-ECD
有机磷农药可用GC-FPD
有条件的话大多数农药都可用液质或气质来检测。
微生物,主要就是环境要达到一定的净化级别。
4. 测定有机物所需要的仪器有哪些
测定有机物所需要的仪器:
1) 最常用的和最有效的是色谱-质谱(GC-MS)。
可分离出不同分子的色谱峰, 质谱测定这个峰的分子量。
2)NMR(核磁共振):通过HNNR和CNMR的测定,确定有机分子的结构。
3)红外光谱:确定有机分子含有的官能团。
其它还有折光仪,元素分析仪,紫外吸收等。
5. 测量物质全部信息可以用哪些仪器,比如xrd sem xps这类的
英语课程,在课程有道课程里边有
6. 食品中碳水化合物的检测设备有哪些
在各种食品中,碳水化合物存在形式和含量各不相同,它包括单糖、双糖和多糖。
高ph条件下,使用配有脉冲安培检测器(hpae-pad)和高效阴离子交换柱的离子色谱可以测定。糖类、糖醇及寡糖、聚糖等可以在一次进样后得到高分辨率的分离而无需衍生,并且可以定量到p摩尔(10-12
mol)水平。该技术已广泛应用于常规检测和研究中,且该方法得到国际标准组织及其它官方机构的认同。
7. 测棒棒糖水份和还原糖需要哪些仪器
测棒棒糖和原糖水分建议用卡尔费休水分测定仪来测量,因为失重法来测量的话,里面其他物质容易挥发,造成测量不准确。但是糖类不易溶解于甲醇,要加入相应的助溶剂来促进溶解。具体可以参考下面的文章
http://www.heye17.com/?content/case/7/index.html
8. 一般做油品检测需要用到哪些仪器
常规油复品检测需要用到得利制特A1010运动粘度检测仪、A1020开口闪点测定仪、闭口闪点测定仪、油液污染度测定仪、酸值测定仪、微量水分测定仪、凝点倾点测定仪等,还有自然点、破乳化、界面张力、铜片腐蚀等方面的检测。
9. 食品检验常用的仪器有哪些
1.电子天平:食品检验用试剂、样品和标准品的称量;
2.酸度计:食品检验过程中pH值的测定;
3.冷冻离心机:食品检验过程中营养成分或者污染物等的提取分离;
4.离心机:食品检验过程中营养成分或者污染物等的提取分离;
5.超净工作台:食品检验过程中提供局部超净工作环境;
6.生物安全柜:食品检验过程中提供洁净安全的操作环境;
7.索氏提取器:食品检验过程中营养成分或者污染物的提取;
8.超临界萃取仪:食品检验过程中营养成分或者污染物的提取;
9.磁力搅拌器:食品检验过程中目的物质提取或反应过程中的搅拌混匀;
10.微波消解仪(高压):食品检验过程中样品的消解;
11.冷冻干燥机:食品检验过程中样品的冷冻干燥;
12.碎花制冰机:食品检验用冰的制备;
13.高压灭菌器:食品检验中灭菌试剂的制备;
14 .冰箱:食品样品和试剂的存放;
15.冷藏柜:食品样品和试剂的存放;
10. 测定糖类的主要方法有哪些
4种糖的测定方法
总结:
1、 直接滴定法。
原理为 糖还原天蓝色的氢氧化铜为红色的氧化亚铜。缺点:水样中的还原性物质能对糖的测定造成影响。
2、 高锰酸钾滴定法。
所用原理同直接滴定法。缺点:水样中的还原性物质能对糖的测定造成影响,过程较为复杂,误差大。
3、硫酸苯酚法。
糖在浓硫酸作用下,脱水形成的糠醛和羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物,在10-100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比,且在485nm波长下有最大吸收峰,故可用比色法在此波长下测定。苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定,方法简单,灵敏度高,实验时基本不受蛋白质存在的影响,并且产生的颜色稳定160min以上。
缺点:如果水样呈橙红色(大部分水样为黄色),会对比色法造成较大的干扰。
4、蒽酮法
糖在浓硫酸作用下,可经脱水反应生成糠醛和羟甲基糠醛,生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物,在一定范围内,颜色的深浅与糖的含量成正比,故可用于糖的测定。
缺点:,不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同,果糖显色最深,葡萄糖次之,半乳糖、甘露糖较浅,五碳糖显色更浅。
综合比较;采用蒽酮法能将最为准确地测定尾水中糖的含量。