为什么要参比溶液调节仪器

⑴ 光度分析实验中，为什么要用参比溶液调节仪器的零点

那就是符合朗伯比尔定律定律的要求，达到扣除测定物质之外的一切吸光值。

⑵ 测定样品吸光度前,必须用参比溶液做空白试验,为什么

参比溶液：用来调节仪器的零点，消除由于吸收池壁及溶剂对入射光的反射和吸收带来的误差，并扣除干扰的影响。

⑶ 制作吸收曲线时，为什么每改变入射光波后，都必须用参比溶液

由于比色皿和参比溶液对不同波长的入射光有不同的反射和吸收，所以当测量波长改变时，都要用参比溶液进行调零，这样才能测出有色物质在该波长下的实际吸光度。

在进行光度测量时，利用参比溶液来调节仪器的零点，可以消除由于吸收池壁及溶剂对入射光的反射和吸收带来的误差，并扣除干扰的影响。

(3)为什么要参比溶液调节仪器扩展阅读

选择参比溶液可分为以下几种情况：

1、溶剂参比显色剂及其它试剂均无色，被测溶液中又无其它有色离子时，可用溶剂(如蒸馏水或其它有机溶剂)作为参比溶液。

2、试剂参比显色剂本身有颜色，可用不加试样的其它试剂作为参比溶液。

3、试液参比显色剂无色，被测溶液中有其它有色离子，可采用不加显色剂的被测溶液作为参比溶液。

4、其它参比当显色剂有色，试液中的有色成分干扰测定时，可在一份试液中加入适当的掩蔽剂，将被测组分掩蔽起来，然后加入显色剂和其它试剂，以此作为参比溶液。

另一种方法，是用不含被测组分的试样，与被测试样同时进行相同的处理，得到平行操作参比溶液。如血液中药物浓度监测，取不含药物的血样制备平行操作参比溶液。

⑷ 用分光光度法测定时,为什么要用参比溶液来调节仪器透光度为100%

当某波长光通过溶液时，其中的某些粒子会产生吸收，分光光度法通过检测光强度变化来确定溶液中粒子浓度，不同浓度的粒子吸收的某波长的光是不一样的。所谓参比溶液，即不含待测粒子的空白对照溶液，待测粒子浓度为0，规定此溶液完全透光；以此为基准，测定其他含待测粒子溶液的浓度。

⑸ 为什么要用参比溶液来调节透光度

1.不是所有的吸光光度分析中都以试剂空白做参比溶液，一般是：
(1)高吸光度法。光电检测器未受光时，其透光度为零，光通过—个比试样溶液稍稀的参比溶液后照到光电检测器上，调其透光度(T)为100％，然后测定试样溶液的吸光度。此法适用于高含量测定。
(2)低吸光度法。先用空白溶液调透光度为100％，然后用一个比试样溶液稍浓的参比溶液，调节透光度为零，再测定试样溶液的吸光度。此法适用于痕量物质的测定。
(3)双参比法。选择两个组分相同而浓度不同的溶液作参考溶液(试样溶液浓度应介于两溶液浓度之间)，调节仪器，使浓度较大的参比溶液的透光度为零，而浓度较小的参比溶液的透光度为100％，然后测定试样溶液的吸光度。
3、邻二氮菲分光光度法直接测二价铁；
全铁—先用三氧化锡将三价铁还原成二价铁，然后加入氯化高汞以氧化过量的三氧化锡，而后按二价铁的方法测就行了

⑹ 在光度分析实验中为什么要用参比溶液调节仪器的零点

不进行此项操作，会引入空白溶液误差，不能保证结果的有效性。

⑺ 测量吸光度时为什么要用参比液，选择参比液的原则是什么

因为样品溶于溶液，溶剂等也对紫外有吸收，因此需要参比液扣除多余的紫外吸收，得到真正的样品的紫外吸收。
选择适当的参比溶液：
a. 如果仅有显色剂与被测组分反应的产物有吸收，则可以用纯溶剂作参比溶液；
b. 如果显色剂和其他试剂有颜色，则用试剂溶液作参比液；
c. 如果显色剂与试剂中干扰组分反应，其反应产物有吸收，则按如下方式配置参比液：(1) 吸收较弱时，直接用试剂溶液作参比液； (2)吸收较强时，可选用合适的掩蔽剂将被测组分掩蔽后再加显色剂和其他试剂，以此配制的溶液作参比液。

⑻ 测定吸光度时，为什么要选择参比溶液选择参比液的原则是什么

参比溶液是为了消除其除了本身的物质以外的外在影响因素；原则也就是除了需要测定的物质,其余的都要相同。

参比液中应不含被测物及不含影响被测元素吸收单色光有干扰的物质，一般可以用蒸馏水做参比，有的实验需要扣除空白，这时的参比是和试样一样的处理方法，除了不含被测物质之外。

如果仅有显色剂与被测组分反应的产物有吸收,则可以用纯溶剂作参比溶液；如果显色剂和其他试剂有颜色,则用试剂溶液作参比液。

原理

吸光系数与入射光的波长以及被光通过的物质有关，只要光的波长被固定下来，同一种物质，吸光系数就不变。

当一束光通过一个吸光物质（通常为溶液）时，溶质吸收了光能，光的强度减弱。吸光度就是用来衡量光被吸收程度的一个物理量。

吸光度用A表示。A=abc，其中a为吸光系数，单位L/(g·cm)，b为光在样本中经过的距离（通常为比色皿的厚度），单位cm ， c为溶液浓度，单位g/L。A=Ecl影响吸光度的因数是b和c。a是与溶质有关的一个常量。此外，温度通过影响c，而影响A。

以上内容参考：网络-吸光度

⑼ 为什么在分光光度法中必须使用参比溶液

分光光度法分析中，为什么要使用参比溶液
因为：用分光光度计测量,被测的都为液体,通常是稀释后的,要测的是溶质吸光度,而溶剂也是有影响的,所以要有参比

⑽ 分光光度法分析中,为什么要使用参比溶液

一、原理
可见光、紫外线照射某些物质,主要是由于物质分子中价电子能级跃迁对辐射的吸收,而产生化合物的可见紫外吸收光谱.基于物质对光的选择性吸收的特性而建立分光光度法或称吸收光谱法的分析方法.它是以朗伯——比耳定律为基础.

朗伯—比耳定律 A = lg—- = ECLT
式中 A为吸收度；
T为透光率；
E为吸收系数,采用的表示方法是（E1％1cm）,其物理意义为当溶液浓度为1%（g/ml）,液层厚度为1cm时的吸收度数值；
C为100ml溶液中所含被测物质的重量（按干燥品或无水物计算）,g；
L为液层厚度,cm.
二、使用范围
凡具有芳香环或共轭双键结构的有机化合物,根据在特定吸收波长处所测得的吸收度,可用于药品的鉴别、纯度检查及含量测定.
三、仪器
可见-紫外分光光度计.其应用波长范围为200～400nm的紫外光区、400～850nm的可见光区.主要由辐射源（光源）、色散系统、检测系统、吸收池、数据处理机、自动记录器及显示器等部件组成.
本仪器是根据相对测量的原理工作的,即先选定某一溶剂（或空气、试样）作为标准（空白或称参比）溶液,并认为它的透光率为100％（或吸收度为0）,而被测的试样透光率（或吸收度）是相对于标准溶液而言,实际上就是由出射狭缝射出的单色光,分别通过被测试样和标准溶液,这两个光能量之比值,就是在一定波长下对于被测试样的透光率（或吸收度）.
本仪器可精密测定具有芳香环或共轭双键结构的有机化合物、有色物质或在适当条件下能与某些试剂作用生成有色物的物质.
使用前应校正测定波长并按仪器说明书进行操作.
四、仪器的校正
1.波长的准确度试验
以仪器显示的波长数值与单色光的实际波长值之间误差表示,应在±1.0nm范围内.
可用仪器中氘灯的486.02nm与656.10nm谱线进行校正.
2.吸收度的准确度试验
3.杂散光的试验
4.波长重现性试验
5.分辨率试验
五、测定方法
1.对照品比较法
（1）按各品种项下的方法,分别配制供试品溶液和对照品溶液,对照品溶液中所含被测成分的量应为供试品溶液中被测成分标示量的100±10%,所用溶剂也应完全一致,在规定的波长测定供试品溶液和对照品溶液的吸收度后,按下式计算含量,即得.
（2）计算式
A样×G对/稀释倍数×100×1
含量（%）= ————————————-- ×100%
A对×G样/稀释倍数×100×1
2.吸收系数法
（1）按各品种项下的方法配制供试品溶液,在规定的波长处测定其吸收度,再以该品种在规定条件下的吸收系数计算含量.用本法测定时,应注意仪器的校正和检定.
（2）计算式
A样
含量（%）= ——————————————- ×100%
G样/稀释倍数×(E1％1cm)对×100×1
3.计算分光光度法
采用计算分光光度法应慎重.本法有多种,使用时均应按各品种项下规定的方法进行.当吸收度处在吸收曲线的陡然上升或下降的部位测定时,波长的微小变化可能对测定结果造成显著影响,故对照品和供试品测试条件应尽可能一致.若测定时不用对照品,如维生素A测定法,则应在测定时对仪器作仔细的校正和检定.
六、注意事项
1.空白溶液与供试品溶液必须澄清,不得有浑浊.如有浑浊,应预先过滤,并弃去初滤液.
2.测定时,除另有规定外,应以配制供试品溶液的同瓶溶剂为空白对照,采用1cm的石英吸收池.
3.在规定的吸收峰波长±2nm以内测试几个点的吸收度,以核对供试品的吸收峰波长位置是否正确,除另有规定外,吸收峰波长应在该品种项下规定的波长±2nm以内；否则应考虑该试样的真伪、纯度以及仪器波长的准确度,并以吸收度最大的波长作为测定波长.
4.一般供试品溶液的吸收度读数,以在0.3～0.7之间的误差较小.
5.吸收池应选择配对,否则要引入测定误差.在规定波长下两个吸收池的透光率相差小于0.5％的吸收池作配对,在必要的情况时,须在最终测量扣除吸收池间的误差修正值.
6.由于吸收池和溶剂本身可能有空白吸收,因此测定供试品的吸收度后应减去空白读数,再计算含量.
7.仪器的接地必须良好,一切裸露的零件对地电位不得超过24伏（测电笔的氖管不得发亮）.
8.在使用过程中,如需开启试样室盖时或暂时停止测试时,必须及时推入光门钮杆（使光电管前光门关闭）,保护光电管,以防止光电管受强光或长时间照射而损坏.
9.在测定时或改测其它检品时,应用待测溶液冲洗吸收池3～4次,用干净绸布或擦镜纸擦净吸收池的透光面至不留斑痕（切忌把透光面磨损）.
10.取吸收池时,应拿毛玻璃两面,切忌用手拿捏透光面,以免粘上油污.使用完后及时用测定溶剂冲净,再用纯化水冲净,用干净绸布或擦镜纸擦干,晾干后,放入吸收池盒中,防尘保存.
11.若吸收池内外壁沾污,两池差较大的处理.
（1）可用绸布缠在扁竹条外或用脱脂棉缠在细玻璃棒上蘸上乙醇,轻轻摩擦,再用纯化水冲净.
（2）如上述方法处理不好,必要时可用重铬酸钾-硫酸洗液泡洗1～2分钟,用自来水冲净,再用纯化水冲净.
（3）不得用毛刷刷洗或硬物拭擦,以防止表面光洁度受损影响正常使用.
12.请务必注意经常保持硅胶的干燥,目的是保护光学元件和光电放大器系统不致受潮损坏而影响仪器的正常工作,如发现有的硅胶由蓝色变为粉红色,应立即更换.该仪器干燥剂筒有两个：一个是装在放大器暗盒上,另一个装在单色光器暗盒上.
13.在更换硅胶干燥剂时,应关闭切断电源.
14.在停止工作期间,主机试样室内应放入袋装或筒装硅胶干燥剂.用防尘罩罩住整个仪器,并在防尘罩内放数袋防潮硅胶.
15.仪器在操作中,狭缝的宽度应从小逐渐开大.若狭缝过大,由于进入光电管的光能量强度过大,将会使放大器输出信号达到饱和,以至数字显示出溢出（即数字闪烁或示1不变）.这不是仪器有故障.
16.将波长旋转放在625nm,铗缝关闭在0.02nm附近,选择按键恢复在停止工作部位（即三个键均弹出）.
17.搬动仪器时应搬在主体端,不要搬在试样室和光电管盒端以及光源灯室部位,以防止仪器狭缝或光路部件受力而发生变形.并在搬动或运输时,应将可动部分固定,如各旋钮可用胶布贴住,狭缝位置开大些,然后固定,不要关小狭缝,以免运输时振动使狭缝刀口受损坏.
18.仪器的光栅、反射镜绝对不能擦拭,否则将损坏仪器光学表面,增加杂散光.
19.仪器经过搬动请及时检查并纠正波长精度,为保证测定的准确性请经常校准波长精度.如有异常,应立即报告质量保证部,但不得擅自调整,并及时做好记录.
七、结果计算
A
E1％1cm（供试品） = ——
CL
E1％1cm（供试品）
含量（%）= ——————————- ×100%
E1％1cm（标准值或对照品）
八、允许差
仪器分析方法的误差限度,除另有规定外,其相对偏差应在±(2.0～3.0)%.