细胞冻存最常用的设备是什么

① 如何冻存细胞

细胞冻存是生物医学研究中一种重要的细胞保存技术。在进行细胞冻存前，需要准备一系列的仪器和试剂。常用的仪器包括净化工作台、离心机、恒温水浴箱、冰箱（4℃、-20℃、-70℃）、倒置相差显微镜、培养箱、液氮冰箱等。此外，还需要各种玻璃和塑料器皿，例如吸管、培养瓶、玻璃瓶、废液缸、吸头、枪头、胶塞、移液管、离心管、冻存管等。其他工具如微量加样枪、红血球计数板、记号笔、医用橡皮膏、移液枪等也是必不可少的。

在冻存细胞时，首先需配制含有10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的冻存培养液。然后取对数生长期的细胞，用胰蛋白酶消化，悬浮细胞移至15ml离心管中。离心后去除胰蛋白酶及旧的培养液，加入适量冻存培养液，轻轻吹打使细胞均匀，计数并调整细胞密度。接着将细胞分装入冻存管中，每管1～1.5ml，标记相关信息。冻存程序为降温速率-1～-2℃/min，温度达-25℃以下时可增至-5℃～-10℃/min，最后迅速浸入液氮中。

细胞复苏时，从液氮容器中取出冻存管，置于37℃温水中融化，打开盖子，用吸管吸出细胞悬液，加入离心管并滴加10倍以上培养液，混匀。离心后弃去上清液，加入含10%小牛血清培养液重悬细胞，计数并调整细胞密度，接种培养瓶，37℃培养箱静置培养。次日更换一次培养液，继续培养。

在进行细胞冻存和复苏的过程中，需要注意几个要点。首先，适合冻存的细胞应从增殖期到形成致密单层细胞前的培养细胞，最好为对数生长期细胞。在冻存前一天最好换一次培养液。其次，冻存管放入液氮容器或从中取出时，需做好防护工作，以免冻伤。最后，冻存和复苏最好用新配制的培养液。

② 大家都用什么设备，液氮存储细胞

储存细胞一定要用到专用保存液氮的低温液氮容器，但是存放细胞的是定制的提筒或提篮，提筒可定制两层的，提篮可定制5cmx5cmx4cm和5cmx5cmx6cm的，据客户提出提篮的容量有点小，储存的细胞有点少，所以为了满足客户冻存大量细胞天驰液氮低温容器生产厂家特别做改进，尽可能达到客户的需求。然而也有用冰箱储存细胞培养基等低温条件保存的珍贵样本等。但是大部分都会选择液氮罐，因为液氮的沸点-196度，可以满足很多细胞的实际保存。提醒一下：如果用提篮只能选择125mm和210mm口径的液氮罐。