Ⅰ 茶葉中茶多酚含量怎麼測定
實驗四 茶葉中茶多酚含量的測定——高錳酸鉀直接滴定法
一、目的：掌握高錳酸鉀直接滴定法測定茶葉中茶多酚含量的原理及操作
二、原理
茶葉中茶多酚易溶於熱水，在用靛紅作指示劑的情況下，樣液中能被高錳酸鉀氧化的物質基本上都屬於茶多酚物質。根據消耗1mL mL的高錳酸鉀相當於茶多酚的換算系數，可計算茶多酚的含量。
三、儀器與試劑
儀器：分析天平、電動磁力攪拌器、電熱水浴鍋、500mL白瓷皿。
試劑：1、%靛紅溶液：稱取靛紅1g加入少量水攪勻後，再慢慢加入相對密度為的濃硫酸50mL，冷卻後用蒸餾水定容至1000mL，如果靛紅不純，可下法磺化處理是：稱取靛紅1g，加濃硫酸50mL，在80℃烘箱或水浴中加熱磺化4~6h，用蒸餾水定容至1000mL，過濾後貯於棕色瓶中。
2、%草酸溶液：准確稱取草酸，用蒸餾水溶解後定容至1000mL。
3、高錳酸鉀標准溶液：稱取AR的高錳酸鉀，用蒸餾水溶解後定容至1000mL。准確吸取%草酸溶液10mL，放入250ml錐形瓶中（平行3份），加入蒸餾水50mL，再加入相對密度為的濃硫酸10mL，搖勻，在70~80℃水浴中保溫5分鍾，取出後用高錳酸鉀進行滴定。開始慢滴，待紅色消失後再滴第二滴，以後可逐漸加快，邊滴邊搖，待溶液出現淡紅色保持1分鍾不變即為終點。計算高錳酸鉀溶液的百分比濃度。
四、測定步驟
1、供測試液的准備：
准確稱取茶葉磨碎樣品1g，放在250mL錐形瓶中，加入沸蒸餾水80mL，在沸水浴中浸提30分鍾，然後抽濾、洗滌，濾液倒入100mL容量瓶中，冷至室溫，最後用蒸餾水定容至100mL，搖勻。
2、測定：
取200ml蒸餾水放入白瓷皿中，加入%靛紅溶液5mL，再加入供測試液5mL，開動磁力攪拌器，用已標定的高錳酸鉀溶液邊攪拌邊滴定，滴定速度以1滴/s為宜，接近終點時應慢滴。直到溶液由深藍色轉變為亮黃色為止，記下消耗的高錳酸鉀毫升數。同時做空白測定。
五、結果計算
X=
式中：X—茶多酚的含量，% ，B—空白消耗的高錳酸鉀毫升數，mL
A—樣品消耗的高錳酸鉀毫升數，mL ω--高錳酸鉀的濃度，%
m—樣品的質量g， V1—測定用供測試液的體積，mL ，V2--供測試液的體積，mL
實驗三 茶葉中茶多酚含量的測定——酒石酸鐵比色法
一、實驗目的：
1、掌握酒石酸鐵比色法測定茶多酚的含量的原理及操作。
2、進一步熟悉721－分光光度計的使用。
二、原理：
茶葉中多酚類物質占茶嫩梢乾重的20％～35％，由約30種以上的酚類物質所組成，通稱茶多酚。按其化學結構分為四類：（1）兒茶素類，屬黃烷醇類；（2）黃酮及黃酮醇類；（3）花白素及花青素，即羥基-［4］-黃烷醇及其鉀鹽；（4）醋酸及縮酚酸類。其中以黃烷醇類化合物最重要（佔多酚的80％左右）。純兒茶素一般為白色無定形粉末，在空氣中極易氧化成棕色物，能溶於水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯等有機溶劑中。茶多酚能溶於水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯，微溶於油脂。對熱、酸較穩定，2%的溶液加熱至120 ℃並保持30min，無明顯變化。在鹼性條件下易氧化變質。
實驗表明，茶多酚清除活性氧自由基作用的活性，為等量維生素C的493倍，且能有效消除脂質過氧化產物丙二醛，具有降血脂的顯著功效。還有研究表明，茶多酚還具有抑制痢疾、傷寒、霍亂、金黃色葡萄球菌等有害菌的作用；具有較強的抗放射性作用，以及在抗衰老，抑制瘤細胞，預防心腦血管疾病等方面都顯示出很好的效應，是一種有開發前景的天然抗氧化劑。1988年7月我國已批准茶多酚作為食品添加劑。國內已建立了茶多酚工業化生產線，並開發研製出了茶多酚的第二代產品即兒茶素（TC）。
茶多酚的測定方法有高錳酸鉀直接滴定法和酒石酸鐵比色法，由於高錳酸鉀直接滴定法操作比較復雜，且靠肉眼觀察顏色判斷終點，如果樣品溶液顏色較深時，可能影響測定結果。本實驗將應用酒石酸鐵比色法測定茶多酚的含量。
酒石酸鐵能與茶多酚生成紫褐色絡合物，絡合物溶液顏色的深淺與茶多酚的含量成正比。因此可以用比色方法測定。該法可避免高錳酸鉀滴定法所產生的人為視覺誤差。
三、儀器與試劑：
儀器：分光光度計
試劑：
（1）酒石酸鐵溶液：稱取 FeSO4·7H2O ，含 4個結晶水的酒石酸鉀鈉，加蒸餾水溶解後，用蒸餾水稀釋至1000mL
（2）的磷酸緩沖液： Na2HPO4·12H2O ，·2H2O，加蒸餾水溶解後．用蒸餾水稀釋至1000mL．
四、步驟：
（l）樣品溶液的制備方法：准確稱取茶葉磨碎樣品1g於200mL三角燒瓶中，加入沸水80mL，在沸水浴中浸提30min，然後過濾、洗滌，濾液倒人100mL容量瓶中，冷至室溫，最後用蒸餾水定容至刻度，搖勻，備用。
（2）測定：吸取樣品溶液 1mL於 25mL容量瓶中，加蒸餾水4mL，加酒石酸鐵溶液5mL，搖勻，再加入磷酸緩沖液稀釋至刻度。以蒸餾水代替樣品溶液加入同樣的試劑作空白。選擇540nm波長和1cm的比色杯測定吸光度。
五、計算：
式中：ω—茶多酚的含量，%，A—樣品溶液的吸光度值，T—樣品溶液的總體積，mL
V—測定用樣品溶液的量，mL，m—樣品質量，g
—用1cm比色杯，當吸光度為時，試液中茶多酚的濃度為mL
六、說明及注意事項：
1、磷酸鹽緩沖液在常溫下容易生長黴菌，放冰箱中保存或臨用時現配。
2、樣品溶液制備中的注意事項：
（1）較透明的樣液，如果味茶飲料，將樣液充分搖勻後，直接取樣測定。
（2）較渾濁的樣液，如果汁茶飲料、奶茶飲料等，稱取充分混勻的樣液25mL於50mL容量瓶中，加95%的乙醇15mL充分混勻，放置15min，用水定容至刻度，過濾。
（3）含有碳酸氣的樣液，如農夫汽茶，量取充分混勻的樣液100mL於250mL的燒杯中，稱取其總量，於電爐上加熱至沸，在微沸狀態下加熱10min，以將二氧化碳排除，放冷，用水補足原來的質量，搖勻，備用。
測定
准確吸取試液1 ml， 注人2 5 m L的容量瓶中， 加水4 ml和酒石酸亞鐵溶液5 ml， 充分混合， 再加p H 7 . 5 磷酸鹽緩沖液至刻度， 用10mm比色杯，在波長540nm處，以試劑空白溶液作參比，測定吸光度( A)