KDA防爆膜

『壹』 120kda蛋白質 80v轉膜多長時間

120kda蛋白質不算特別大的蛋白
如果是濕轉的話，恆壓80V轉膜3個小時左右就可以了
如果是半干轉的話，電壓20V轉膜30分鍾，可能效果會比濕轉差一些

所以120kda蛋白質80V轉膜需要3個小時左右

『貳』 western blot濕轉用什麼膜，PVDF還是NC分子量120kDa的~謝謝

NC膜 尼龍膜 PVDF膜
靈敏度和解析度 高 高 高
背景 低 較高 低
結合能力 80－110 ug/cm2 >400 ug/cm2 125－200 ug/cm2

（適合於SDS存在下與蛋白質的結合）

材料質地 乾的NC膜易脆 軟而結實 機械強度高

溶劑耐受性 無 無 有

操作程序 緩沖液潤濕,避免氣泡 緩沖液潤濕 使用前100%甲醇潤濕

檢測方式 常規染色，可用放射性和非放射性檢 不能用陰離子染料 常規染色，可用考馬斯亮藍染色

適用范圍 0.45um 一般蛋白 0.2um一分子量小於20kD蛋白 0.1um一分子量小於7kD

價格 價格較便宜 便宜 較貴

『叄』 結核抗體陽性還有一個加號，16kda陽性lma陽性38kda陽性結核蛋白晶元陽性ppd測試陰性，的

人抗肝細胞膜抗體(LMA)-陽性可能是感染其他病菌所致，不一定是結核病。
ppd測試陰性-————兒童未受自然結核病感染。

人人都感染過結核菌，只不過多數人不會發病。ppd試驗陰性說明卡介苗未接種上或兒童未受自然感染。
總結一下：本人建議你去打一針結核病疫苗，其他的沒有了

『肆』 用超濾膜（3kDa）抽濾後，如何收集濾膜上的高分子物質

這個只能清洗了，就看你截留的是什麼物質，用溶劑去洗，或者也可以藉助離心機。

『伍』 披膜病毒的理化特性

病毒核衣殼蛋白，也稱為核心蛋白(C)，分子量為30～33kDa。序列分析表明， 辛德畢斯病毒C蛋白有一個類似於某些植物病毒核衣殼蛋白的結構：N端大約115個殘基帶正電荷，可能與病毒基因組RNA特異性地相互作用，以起始核衣殼的形成過程;其餘部分約150個殘基，與糖蛋白E2膜內的C端相連，這一區域在所有甲病毒都是保守的。
病毒的脂質來源於宿主細胞的胞漿膜，約占病毒粒子乾重的30%。 脂類的組成取決於病毒感染的細胞類型。磷脂與膽固醇的比例在甲病毒為2∶1，風疹病毒為4∶1。糖約占病毒粒子重量的6%，存在於糖蛋白中，主要有甘露糖和N聚糖(N linked glycan)，此外，風疹病毒E2含有O聚糖(O linked glycan)。
甲病毒穩定存在於pH值7～8的環境，而在酸性條件下，則很快被滅活。大多數甲病毒對熱敏感，37℃時的半存活期為7小時， 但58℃時很快滅活。風疹病毒在37℃時的半存活期只有1～2小時，58℃時的半存活期為5～20分鍾。由於有脂質囊膜， 所有披膜病毒對有機溶劑(乙醚和氯仿等)和去污劑敏感。

『陸』 western blot中目的蛋白分子量<=30KDa（30KDa,24KDa,14KDa)時，電泳和轉膜（濕轉）各需要多長時間

這種小分子量的蛋白 半干轉就可以了

30KD

電泳條件： 我們實驗室的100V恆壓跑。跑到出來就可以裁膠轉膜了。10%-12%的分離膠

半干轉條件：如果裁的是2*8cm 的膜 一般是0.04mA 30-40分鍾

轉膜：0.45 或者0.22um size 的NC/PVDF膜

24KD

電泳條件： 我們實驗室的100V恆壓跑。跑到出來就可以裁膠轉膜了。10%-12%的分離膠

半干轉條件：如果裁的是2*8cm 的膜 一般是0.04mA 20-30分鍾

轉膜：0.45 或者0.22um size 的NC/PVDF膜

14KD

電泳條件： 我們實驗室的100V恆壓跑。跑到出來就可以裁膠轉膜了。15%的分離膠

半干轉條件：如果裁的是2*8cm 的膜 一般是0.04mA 15-20分鍾

轉膜： 0.22um size 的NC/PVDF膜

為了達到最佳的優化條件，建議轉完做一下麗春紅或者考馬斯亮藍染色。

希望您快點找到最佳的實驗條件。

『柒』 分子量120kDa，轉膜條件求助

我用的是濕轉，我跑分子量130的。沒有加SDS。用的是PVDF膜，甲醇活化一般只用半分鍾到一分鍾，就放入去離子水中泡著待用了。轉膜時，是恆流300mA，基本就轉1.5-2h。一般沒問題的呀。我覺得你檢查一下你的轉膜緩沖液（我一般不重復用），還有就是鋪膜有沒有氣泡。另外實在找不到原因可以適當延長轉膜時間，但也不可以太長。其實120KD轉兩小時足夠了。
另外，我有時封閉後也會marker看不清楚，影響不大，只要還能辨別marker的條帶就ok了。

『捌』 western-blot中分離膠的濃度怎麼選擇

western blot中分離膠濃度的選擇取決於目的蛋白分子量 不同的分離膠濃度對不同的目的蛋白分子量的解析度不一樣，比如15%的分離膠更適合45kDa的分目的蛋白，而10%的分離膠更適合70kDa的目的蛋白而因為western blot的膜應該是完全覆蓋SDS PAGE的凝膠，所以不用太擔心條帶在凝膠上位置偏上活偏下 所以western blot中分離膠濃度的選擇取決於目的蛋白分子量

如果以溴酚藍跑到膠的底部為准,26kD在10%的由下往上1/4的地方,而15%就在由下往上大約1/2（不太確定）的地方,對於分子量比較小的蛋白,當然是膠的濃度越大,分離效果越好.但是你必須考慮到,膠的孔徑一旦小於蛋白-SDS復合體的直徑,分子量大於這個蛋白的所有蛋白仍然不能有好的分離效果.如果孔徑太大,所有蛋白都跑得那麼快,也是分不開的.
所以,關鍵是看這個分子量附近的蛋白,比如±5kD以內的所有蛋白,在不同濃度的膠中的速度差要盡可能達到最大,假設是對數正態分布,那麼方差要足夠大,才會有較好的分離效果.另一方面,蛋白跑的路程越大,也越能和附近的蛋白分開.
我的建議是溴酚藍跑到底,而目標蛋白正好在整塊膠的1/2的地方,分離的效果時最好的

『玖』 國內生產陶瓷膜的企業有哪些

久吾高科是自主研發生產的陶瓷膜的

『拾』 選擇分離60KDa 的蛋白選擇什麼種類的超濾膜想讓蛋白留在濃縮液里

那就是濃縮，如果要提高回收率用10K的超濾膜