接科工具箱

A. 无菌接种箱操作过程。开始接种材料，比如需要接种的在试管中的母种是否也需要放到接种箱内消毒呢

是的，试管中的母种也需要放到接种箱内，因为接种箱消毒后就接种操作了，不再开箱；如果是气雾消毒试管口是封住的，不会杀死母种，如果是紫外线杀菌，可以在试管外裹纸，一般不裹也没关系，紫外线是外表面杀菌和空气杀菌，杀死不了母种。

B. 灵芝接种需要哪些条件和设备

常用的有接种室、洁净工作台或接种箱及各种接种工具。

（1）接种室

也称为无菌室。一般高2～2.2米，面积4～6米²，室内放接种工作台，室顶吊挂30～40瓦的紫外线杀菌灯和日光灯。无菌室外应连接一个2～3米²的缓冲间，缓冲间屋顶应安装紫外线杀菌灯和日光灯各一支。接种间门不能与缓冲间门对着开，防止空气对流。

（2）接种箱

也称无菌箱（图5），是用木结构安装或有机玻璃制成的密闭箱。一般分为双人和单人两种，双人式接种箱的容积以能放入120～150瓶菌种为宜，接种箱前后有两扇能启动的倾斜度为70度的玻璃窗，窗下部为木质挡板，在挡板上开两个直径13～15厘米，圆心相距50厘米的圆形操作孔。孔口装有具松紧带的套袖。箱顶部为木板，安装紫外线杀菌灯和日光灯各一支，箱顶侧面开直径5～8厘米的排气孔，孔口覆盖8层纱布过滤空气。有的简易接种箱不用紫外灯而采用高锰酸钾与福尔马林熏蒸灭菌或特制的灭菌药。接种箱制造容易，移动方便，而且体积小，消毒比较彻底，适应性较广。

图6 接种工具

1.接种针 2.接种环 3.接种钩 4.接种耙 5.接种铲 6.接种勺 7.接种刀（a）、手术刀（b） 8.弹簧接种枪 9.镊子 10.剪刀

（5）培养条件

培养室：要求室内干燥、洁净能保温、保湿，有条件的地方在培养室可以安装空调机。或用电炉加热，可以装配自动控温仪。培养架：放置培养物的架子，用木材、钢材或塑料加工的架子。

另外，还有温度计及干湿温度计、恒温培养箱等。

C. 如何进行接种箱的熏蒸消毒灭菌

在无超净工作台的地方，采用人工制作的接种箱进行接种。一般先在接种箱中铺一层聚丙烯塑料布，把冷却的培养袋和准备好的容器，菌种袋放入。接种箱熏蒸应封闭严密，按每立方米用甲醛10毫升，高锰酸钾5克混合消毒，1.5小时后接种。为防止杂菌产生抗药性也可用硫磺熏蒸交替进行。硫磺每立方米20克放于盒内点燃，能有效除杂菌。

D. 如何自制组培用接种箱

最好用玻璃来做，普通的厚玻璃切割好用玻璃胶黏在一起就行，一侧留一个活动的开口，操作孔直接用玻璃刀划圆洞，记得操作口是朝上的.

E. 求食用菌接种箱的制作方法

说简单就是风机和电组丝而以，原理就像吹头发的电吹风，我们做菌的有时剩下几袋没接菌就用那个

F. 蘑菇菌种生产时有哪些常用的接种设备、工具与场所

蘑菇菌种生产依据菌种的容器、培养基的基质、生产的场所的不同分为两个不同的生产环节：一是以试管为容器，以PDA或PSA为基质，通常在实验室生产的一级种，二是以菌瓶（菌袋）为容器，以木屑、麸皮为基质，通常在菌种生产车间生产的二级种（原种）、三级种（栽培种）。接种环节关系到菌瓶和菌袋的成品率，也直接影响生产的经济效益。接种常用的场所和设备是接种室、接种箱或超净操作台。

（1）接种箱 又名无菌操作箱，主要用于菌种分离和菌种繁殖的无菌操作。箱体多采用木材框架，四周木板或五合板镶密，正面镶玻璃，形成具有密封性的梯形箱体，便于药物灭菌，防止接种时杂菌侵入。接种箱的左顶部和右底部对角线分别开两个直径4～5厘米的圆形洞口，用10～12层纱布过滤空气，接种时酒精灯能正常燃烧，正面开两个10～12厘米的圆形洞口，装上布袖套，便于双手伸入箱内进行操作。箱顶安装1盏紫外线灭菌灯，箱内可用空间消毒剂熏蒸消毒（接种箱结构如图5，接种工具如图6）。

图7 无菌室布局

（3）超净工作台 超净工作台又称净化操作台，是一种利用过滤除菌的原理将空气经过工作台内的预过滤器及高效过滤器除尘过滤，洁净后以层流状态（平行流或垂直流）通过操作区，形成高洁净度的局部区域环境。由上部或前面狭缝中喷送出的高速气流所形成的空气幕，保护操作区不受外界空气的影响，呈无菌状态。净化台要求装置在清洁的房间内，并安装紫外线灯。操作方法简单，只要接通电源，按下通风键钮，同时开启紫外线灯约30分钟后关闭紫外线灯即可接种。

G. 食用菌接种箱怎样制作

一般农村都是找木匠制作。你可以在网络图片搜索接种箱。就可以看到相关的图片。

H. 食用菌接种箱如何灭菌

【针对不同的污染，要用不同的灭菌方法】
1 接种箱滋生霉菌引起的污染
也许有人会认为，接种箱是用于接种的设备，要经常消毒，而且每次使用前都要经过消毒处理，怎么也会生长霉菌呢？其实，这是一种误解。首先，接种箱多为木质结构，木材中含有丰富的木质纤维素，它是各种霉菌生活的良好营养成分；其次，接种箱的使用随生产而具有季节性，每年都有较长一段时间闲置未用，在这段时间内，就极有可能出现霉菌污染。那么，在什么情况下接种箱才会出现霉菌污染呢？接种箱被污染多是出现在接种箱闲置未使用的时候，但笔者认为，引起污染的直接原因往往并不在这段时间，而是在生产季节接种箱被使用的时候。在使用接种箱时，生产者操作不规范或使用不当都会使接种箱过于潮湿，比如让培养基或菌料等撒落箱内而没有及时清理，或者由于接种箱内外温差较大，引起箱内而没有及时清理，或者由于接种内外温差较大，引起箱内热空气遇冷凝结成水珠等。接种箱受潮后，如果没有及时通风排湿，这样在接种箱闲置不使用的时候，就很容易滋生霉菌。
针对上述引起接种箱污染的原因，要防止污染，在实际工作中，一是要在接种箱使用时，尽量降低接种箱内的湿度。要避免培养基、菌料或酒精棉球等直接落入箱内，如不谨掉入箱则应尽快清理； 要避免接种箱内外出现温差而引起受潮，具体应做到：
（1）料袋或料瓶灭菌后应充分冷却再进入接种箱内进行消毒处理，以免引起接种箱内温度过高；
（2）消毒剂的用量要严格按照规定使用。目前常见的消毒剂如气雾消毒剂、福尔马林等，在使用时都是利用这些物质发生氧化反应来产生烟雾或蒸汽，从而达到对空气消毒的目的。我们知道，氧化反应往往会产生大量的热量，因此，在保证消毒效果的前提下，消毒剂的使用不宜过量；
（3）提高接种速度，控制好接种时间。接种速度慢、时间长，不仅工作效率低、生产周期长，而且酒精灯长时间燃烧会产生大量的热量，使箱内温度过高。此外，接种时间长，也会延长培养基、菌种等在空气中暴露的时间，这样会增加杂菌污染的机会。二是在接种箱长期闲置不用时，应将接种箱箱盖、袖套口及时打开，以利通风排湿。实际上，在生产上要完全避免接种箱受潮往往是很难做到的，但问题的关键是当生产季节结束以后，就应及时进行通风降湿，并将接种箱放置在通风干燥的地方。
如果接种箱已经出现了霉菌污染，那么又如何处理呢？在实际工作中，有些生产者对这个问题往往重视不够，或者根本就没有意识到这个问题，在使用接种箱时仍按照常规的方法进行消毒处理（殊不知在消毒剂的使用浓度和消毒时间不延长的情况下，消毒剂的消毒效果与空气中的杂菌的数量是密切相关的），结果往往就会“不明”原因的大规模污染。接种箱出现霉菌污染以后，实现要用酒精棉球或蘸有福尔马林的棉球擦拭肉眼可见的霉菌，然后，再用福尔马林进行熏蒸或用气雾消毒剂消毒，这样连续处理2次-3次以后才能使用。
2 接种操作引起的污染
接种在食用菌制种和栽培上是非常重要的环节，对控制好杂菌污染至关重要。接种时要求生产者应严格掌握微生物无菌操作规程，概括起来，主要有以下几点：
2.1 各种接种工具和用品等应随同料袋、料瓶、菌种等一并进行消毒处理，应当尽量避免在操作过程中向箱内传递物品。
2.2 进箱操作前，在箱外用清水洗净双手，进箱后再用酒精棉球擦拭双手和接种工具，并对接种工具用火焰灼烧灭菌，在接种过程中还要定期用火焰灭菌。
2.3 对于试管种的扩大培养，试管应平持，试管口不能朝上，同时试管口也不要离开酒精灯火焰，这样才能达到火焰“封口”的目的。
2.4 接种操作要做到“轻、快、准”。“轻”是指接种时动作幅度不要太大，以减少空气波动；“快”是指动作操作要快，避免菌种和培养基在空气中暴露时间过长；“准”指的是接种动作要准确到位，接种工具、菌种块等不要到处乱撞、乱放。
2.5 接种操作完毕，及时移走物品，并将箱内收拾干净。
3 接种箱空气引起的污染
接种箱内空气中杂菌孢子或微生物菌体数量直接影响到接种后培养物的纯菌率。引起箱内空气污染的原因是多方面的，如消毒不彻底、接种箱密封性能差等。其中，消毒不彻底是引起箱内空气污染的最常见原因。消毒不彻底可能是由于消毒剂本身的原因引起的，比如，消毒剂效果差、用药量不够等，也有可能是由于长时间使用同一种消毒剂（长期使用同一种消毒剂引起消毒效果差，其原因如果能排除消毒剂本身的质量问题，从生物学的角度来说，往往是由于消毒剂对杂菌抗药性变异的定向选择作用，从而是杂菌抗药性种群不断增大。鉴于此，生产上应注意不同的消毒剂轮换使用）。此外，接种箱密封性能差也是造成空气消毒不彻底的原因之一。

I. 采用手工接种箱接种或接种室接种如何降低污染率

蘑菇菌种生产通常采用接种箱或超净工作台接种，进行手工接种，都应树立无菌观念，严格无菌操作程序。根据实践经验，应严格如下操作步骤。
（1）两次消毒 第一次是空消，第二次当培养袋、工具及菌种进箱（室）后再消毒。常用消毒方法有：①喷洒消毒剂，用5%的石炭酸喷雾；②薰蒸消毒，每立方米空间用10毫升福尔马林加5克高锰酸钾气化反应对空间杀菌；③气雾消毒，采用正宗的气雾消毒盒，每立方米空间用量为4～6克，点燃后闭封30分钟；④紫外线灭菌，将工具、待接的菌瓶（菌袋）、菌种（用黑色布或纸包裹好）移入接种箱内，室内接通电源，用输出额定功率30～60瓦紫外线灭菌灯照射30分钟；在照射时人员离开，防止眼角膜、视网膜及皮肤受伤。
（2）严格菌种质量 接种前用5%的高锰酸钾溶液或5%新洁而灭的水溶液擦洗菌种瓶（袋）表面后，在接种箱无菌条件下拔去棉塞，用75%酒精擦洗瓶口或菌袋套环，过火焰后扒弃菌种1～2厘米表层后包上塑料膜。
（3）严格接种操作 接种前将紫外线灯关闭并做好换气工作，接种工具，菌种瓶口部及手需用75%酒精擦洗消毒，工具与菌种瓶表面需严格经火焰灭菌；经灭菌后的接种工具需挂空，工具停用时靠放接触部位需经火焰灭菌后使用。菌种瓶口始终保持平放或略朝下方，操作应敏捷、准确。接种时先核对菌种种名、菌号，细心检查菌种瓶（袋）四周和棉花塞，确认菌丝生长正常，色泽一致，无异色异味，无混入杂菌菌种。同一接种箱只接同一品种，同一接种室只接同一品种或同一接种室内的同一接种组只接同一品种，防止同一菌筒接不同菌号的菌种。

J. 香菇菌种生产时常用的有哪些接种设备、工具与场所

香菇菌种生产依据菌种的容器、培养基的基质、生产的场所的不同分为两个不同的生产环节：一是以试管为容器，以PDA或PSA为基质，通常在实验室生产的一级种；二是以菌瓶（菌袋）为容器，以木屑、麸皮为基质，通常在菌种生产车间生产的二级种（原种）、三级种（栽培种）。接种环节关系到菌瓶和菌袋的成品率，也直接影响生产的经济效益。接种常用的场所和设备是接种室、接种箱或超净操作台。

（1）接种箱 又名无菌操作箱，主要用于菌种分离和菌种繁殖的无菌操作。箱体多采用木材框架，四周用木板或五合板镶密，正面镶玻璃，形成具有密封性的梯形箱体，便于药物灭菌，防止接种时杂菌侵入。接种箱的左顶部和右底部对角线分别开两个直径4～5厘米的圆形洞口，用10～12层纱布过滤空气，接种时酒精灯能正常燃烧，正面开两个10～12厘米的圆形洞口，装上布袖套，便于双手伸入箱内进行操作。箱顶安装1盏紫外线灭菌灯，箱内可用空间消毒剂熏蒸消毒（接种箱结构如图5，接种工具如图6）。