KDA防爆膜

『壹』 120kda蛋白质 80v转膜多长时间

120kda蛋白质不算特别大的蛋白
如果是湿转的话，恒压80V转膜3个小时左右就可以了
如果是半干转的话，电压20V转膜30分钟，可能效果会比湿转差一些

所以120kda蛋白质80V转膜需要3个小时左右

『贰』 western blot湿转用什么膜，PVDF还是NC分子量120kDa的~谢谢

NC膜 尼龙膜 PVDF膜
灵敏度和分辨率 高 高 高
背景 低 较高 低
结合能力 80－110 ug/cm2 >400 ug/cm2 125－200 ug/cm2

（适合于SDS存在下与蛋白质的结合）

材料质地 干的NC膜易脆 软而结实 机械强度高

溶剂耐受性 无 无 有

操作程序 缓冲液润湿,避免气泡 缓冲液润湿 使用前100%甲醇润湿

检测方式 常规染色，可用放射性和非放射性检 不能用阴离子染料 常规染色，可用考马斯亮蓝染色

适用范围 0.45um 一般蛋白 0.2um一分子量小于20kD蛋白 0.1um一分子量小于7kD

价格 价格较便宜 便宜 较贵

『叁』 结核抗体阳性还有一个加号，16kda阳性lma阳性38kda阳性结核蛋白芯片阳性ppd测试阴性，的

人抗肝细胞膜抗体(LMA)-阳性可能是感染其他病菌所致，不一定是结核病。
ppd测试阴性-————儿童未受自然结核病感染。

人人都感染过结核菌，只不过多数人不会发病。ppd试验阴性说明卡介苗未接种上或儿童未受自然感染。
总结一下：本人建议你去打一针结核病疫苗，其他的没有了

『肆』 用超滤膜（3kDa）抽滤后，如何收集滤膜上的高分子物质

这个只能清洗了，就看你截留的是什么物质，用溶剂去洗，或者也可以借助离心机。

『伍』 披膜病毒的理化特性

病毒核衣壳蛋白，也称为核心蛋白(C)，分子量为30～33kDa。序列分析表明， 辛德毕斯病毒C蛋白有一个类似于某些植物病毒核衣壳蛋白的结构：N端大约115个残基带正电荷，可能与病毒基因组RNA特异性地相互作用，以起始核衣壳的形成过程;其余部分约150个残基，与糖蛋白E2膜内的C端相连，这一区域在所有甲病毒都是保守的。
病毒的脂质来源于宿主细胞的胞浆膜，约占病毒粒子干重的30%。 脂类的组成取决于病毒感染的细胞类型。磷脂与胆固醇的比例在甲病毒为2∶1，风疹病毒为4∶1。糖约占病毒粒子重量的6%，存在于糖蛋白中，主要有甘露糖和N聚糖(N linked glycan)，此外，风疹病毒E2含有O聚糖(O linked glycan)。
甲病毒稳定存在于pH值7～8的环境，而在酸性条件下，则很快被灭活。大多数甲病毒对热敏感，37℃时的半存活期为7小时， 但58℃时很快灭活。风疹病毒在37℃时的半存活期只有1～2小时，58℃时的半存活期为5～20分钟。由于有脂质囊膜， 所有披膜病毒对有机溶剂(乙醚和氯仿等)和去污剂敏感。

『陆』 western blot中目的蛋白分子量<=30KDa（30KDa,24KDa,14KDa)时，电泳和转膜（湿转）各需要多长时间

这种小分子量的蛋白 半干转就可以了

30KD

电泳条件： 我们实验室的100V恒压跑。跑到出来就可以裁胶转膜了。10%-12%的分离胶

半干转条件：如果裁的是2*8cm 的膜 一般是0.04mA 30-40分钟

转膜：0.45 或者0.22um size 的NC/PVDF膜

24KD

电泳条件： 我们实验室的100V恒压跑。跑到出来就可以裁胶转膜了。10%-12%的分离胶

半干转条件：如果裁的是2*8cm 的膜 一般是0.04mA 20-30分钟

转膜：0.45 或者0.22um size 的NC/PVDF膜

14KD

电泳条件： 我们实验室的100V恒压跑。跑到出来就可以裁胶转膜了。15%的分离胶

半干转条件：如果裁的是2*8cm 的膜 一般是0.04mA 15-20分钟

转膜： 0.22um size 的NC/PVDF膜

为了达到最佳的优化条件，建议转完做一下丽春红或者考马斯亮蓝染色。

希望您快点找到最佳的实验条件。

『柒』 分子量120kDa，转膜条件求助

我用的是湿转，我跑分子量130的。没有加SDS。用的是PVDF膜，甲醇活化一般只用半分钟到一分钟，就放入去离子水中泡着待用了。转膜时，是恒流300mA，基本就转1.5-2h。一般没问题的呀。我觉得你检查一下你的转膜缓冲液（我一般不重复用），还有就是铺膜有没有气泡。另外实在找不到原因可以适当延长转膜时间，但也不可以太长。其实120KD转两小时足够了。
另外，我有时封闭后也会marker看不清楚，影响不大，只要还能辨别marker的条带就ok了。

『捌』 western-blot中分离胶的浓度怎么选择

western blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量 不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样，比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白，而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白而因为western blot的膜应该是完全覆盖SDS PAGE的凝胶，所以不用太担心条带在凝胶上位置偏上活偏下 所以western blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量

如果以溴酚蓝跑到胶的底部为准,26kD在10%的由下往上1/4的地方,而15%就在由下往上大约1/2（不太确定）的地方,对于分子量比较小的蛋白,当然是胶的浓度越大,分离效果越好.但是你必须考虑到,胶的孔径一旦小于蛋白-SDS复合体的直径,分子量大于这个蛋白的所有蛋白仍然不能有好的分离效果.如果孔径太大,所有蛋白都跑得那么快,也是分不开的.
所以,关键是看这个分子量附近的蛋白,比如±5kD以内的所有蛋白,在不同浓度的胶中的速度差要尽可能达到最大,假设是对数正态分布,那么方差要足够大,才会有较好的分离效果.另一方面,蛋白跑的路程越大,也越能和附近的蛋白分开.
我的建议是溴酚蓝跑到底,而目标蛋白正好在整块胶的1/2的地方,分离的效果时最好的

『玖』 国内生产陶瓷膜的企业有哪些

久吾高科是自主研发生产的陶瓷膜的

『拾』 选择分离60KDa 的蛋白选择什么种类的超滤膜想让蛋白留在浓缩液里

那就是浓缩，如果要提高回收率用10K的超滤膜